新新2号核桃花粉活力测定方法比较

【目的】探寻客观、快速、有效的核桃花粉活力测定方法,为新新2号核桃人工授粉、授粉树配置等花粉活力的测定提供技术手段。【方法】采用TTC染色法、I2-KI染色法、MTT染色法、离体萌发法和原位萌发法测定新新2号核桃花粉活力。【结果】TTC和I2-KI染色法染色后,无法区分花粉颜色,难以辨识花粉活力状况。离体培养法测定的花粉萌发率较低,且耗时较长。MTT染色法染色后,易于辨识花粉活力,测定的花粉活力接近原位萌发法。【结论】TTC和I2-KI染色法不适用于新新2号核桃花粉活力的快速测定;MTT染色法可用于野外快速测定新新2号核桃花粉活力,且效果较好。

南疆盆地新新2号核桃疏散分层形树形冠内坚果产量与物理品质格局

【目的】分析南疆盆地盛果期新新2号(Juglans regia‘Xinxin2’)核桃生产园,疏散分层形树形冠内坚果产量及其物理品质在垂直空间和水平空间上的分布,了解冠内坚果产量与物理品质的格局状况,以期为南疆盆地盛果期核桃的整形修剪提供科学依据。【方法】采用等体积(50 cm×50 cm×50 cm)树冠立体分隔法,在果实成熟期采集并测定树冠上层、中层、下层和内膛、中部、外围的坚果产量和物理品质。【结果】树冠单位体积坚果产量为上层>中层>下层,且上层与下层之间的差异达到了显著水平(P<0.05)。坚果的三径平均值、单果重、仁重为上层>中层>下层,且上层与下层之间坚果的三径平均值、单果重存在显著差异(P<0.05);果形指数为下层>上层>中层、内膛>中部=外围,且下层与中层之间存在显著差异(P<0.05)、内膛与中部和外围之间的差异达到了极显著水平(P<0.01);出仁率为外围极显著高于中部和内膛(P<0.01);不饱满果率为上层显著高于中、下层(P<0.05),内膛与中部和外围之间的差异达到了极显著水平(P<0.01)。【结论】南疆盆地新新2号核桃疏散分层形树形树冠上层单位体积坚果产量最高,其饱满坚果的物理品质最好,不饱满果率树冠内膛最高,其次是树冠上层。南疆盆地核桃整形修剪中应通过采取开角、疏枝等措施来改善树冠内光照条件以达到提质增产。

核桃CONSTANS-Like基因家族全基因组鉴定及表达分析

基于核桃基因组鉴定核桃COL(CONSTANS-Like)家族成员,并对其进行分析,以揭示核桃COL家族的分子进化和潜在功能。以‘新新2号’(Juglans regia cv.Xinxin No.2)为材料,对COL基因家族全基因组进行鉴定及生物信息分析,并分析其在不同组织及不同时间雌花芽的表达。结果表明,核桃基因组中共存在55个COL基因,不均匀地分布在16个染色体和1个Scaffold上,依次命名为JrCOL1-JrCOL55,氨基酸为117-789 aa,分子量为12.99-86.08 kD,等电点为4.00-8.94,进化树分析将其分为3个亚族,且同一分支基因的保守基序和基因结构位置相似。启动子区的顺式作用元件分析发现JrCOL基因含有大量与光信号、植物激素、胁迫等相关的顺式作用元件。‘新新2号’中JrCOL家族基因具有组织特异性表达,其中JrCO1、JrCO7a-c、JrCO8、JrCOL23、JrCO31a-c、JrCO33、JrCOL35和JrCOL50a-f在叶片中表达量最高。对‘新新2号’雌花芽不同时间JrCOL基因的RT-qPCR分析表明,JrCOL1、JrCOL35、JrCOL50a-f和JrCOL52在‘新新2号’雌花芽中,具有一致的表达趋势,其中JrCOL50a-f在‘新新2号’雌花芽分化过程中起到重要作用。在核桃基因组中鉴定出55个COL家族基因,分为3个亚家族,不均匀地分布在16个染色体和1个Scaffold上,结构进化保守,组织表达模式多样。推测JrCOL家族基因在核桃叶片发育过程中发挥重要功能。

核桃JrERF2-2基因克隆及其对逆境的响应

【目的】核桃(Juglans regia)是我国重要的木本粮油战略及扶贫攻坚树种,其生长发育受不良环境条件制约,但目前核桃响应逆境的适应机制尚不明确,影响了核桃产业的科学管理,妨碍了核桃产业综合效益的提高。该研究筛选优良抗逆候选基因,以揭示核桃抗逆适应机制。【方法】以"Ethylene Response Factor"为关键词在’香玲’核桃转录组中筛选ERF转录因子家族成员,经同源比对、开放读码框(ORF)、序列基本特征、PCR克隆等分析后选取其中的JrERF2-2进行基本生物信息及逆境表达分析。胁迫包括盐(NaCl)、干旱(PEG6000)及脱落酸(ABA)处理。【结果】JrERF2-2基因的ORF长906 bp,编码蛋白含262个氨基酸,分子质量为74.43 ku,理论等电点为5.07,与白桦(Betula platyphylla)、欧洲栓皮栎(Quercus suber)的ERF蛋白具有较近的亲缘关系,其上游1455 bp启动子中含多种逆境相关顺式作用元件,如干旱早期响应元件(ACGTATERD1)、热胁迫响应元件(CCAATBOX1)、低温响应元件(LTRE1HVBLT49)等。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)发现,JrERF2-2在NaCl、PEG6000、ABA处理下均可被诱导表达,且在胁迫后不同时期表达程度不同。【结论】JrERF2-2受ABA和渗透胁迫诱导,在植物逆境响应中具有一定作用,是核桃逆境适应机制研究的重要候选基因。

‘礼品2号’核桃引种表现及芽接换头栽培技术

利用11年生核桃(Juglans regia L.),采用大方块芽接技术进行高接引种,引进‘礼品2号’核桃品种,改接第2年,大部分开始挂果,第3年全部结果,第7年单株产量超过9kg, 667 m^(2)产量250 kg以上,果园价格20元/kg,经济效益显著。‘礼品2号’核桃品种树势健壮,抗逆性强,丰产性好,核仁口感香脆,是一个极有发展前途的优良品种。

核桃“晋核2号”在晋中市的选育试验调查研究

介绍了品质优良、稳产高效、性状优异的新品种核桃(Juglans regia)"晋核2号",并对该品种区域试验、品种特性、栽培技术等做详细研究。

核桃JrGI基因克隆及表达分析

GI(GIGANTEA)基因是生物节律钟关键输出基因,克隆核桃JrGI基因,并分析其在不同组织及不同时间的雌花芽表达情况,旨在为研究核桃JrGI基因的功能奠定基础。采用RT-PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction)技术从‘新新2号’叶片中克隆获得JrGI基因全长序列,对其进行生物信息学分析、烟草亚细胞定位及表达分析。结果表明,JrGI基因全长为3516 bp,编码1171个氨基酸,分子量为128.60 kDa,等电点(isoelectric point)为6.13,属于亲水性蛋白;系统进化分析表明JrGI蛋白与胡杨GI蛋白亲缘关系最近。烟草亚细胞定位显示JrGI蛋白位于细胞核中。对‘新新2号’雌花芽不同时间段JrGI、JrCO和JrFT基因进行RT-qPCR(real-time quantitative PCR)分析,结果表明在形态分化临界期的雌花芽中表达量最高,推测JrGI在此时间对雌花芽的分化起到重要作用。另外,JrGI基因在‘新新2号’各组织中均有表达,且在叶片中表达量最高,推测JrGI基因在核桃叶片发育过程中也发挥重要功能。

青龙衣的化学成分研究

目的研究青龙衣的化学成分。方法利用普通硅胶柱色谱技术对青龙衣乙醇提取浸膏进行分离、纯化,并利用核磁共振(NMR)、EI-MS等现代波谱技术鉴定化合物结构。结果从青龙衣中分离鉴定了8个化合物,分别为泰国树脂酸(siaresinolic acid,Ⅰ)、白桦脂酸(betulinic acid,Ⅱ)、胡萝卜苷(daucosterin,Ⅲ)、4,5-O-异丙叉基-α-四氢萘醌(4,5-O-isopropylidene-α-tetralone,Ⅳ)、4-甲氧基-α-四氢萘醌-5-O-α-葡萄糖苷(4-methoxy-α-tetralone-5-O-α-glucopyranoside,Ⅴ)、4-乙氧基-8-羟基-α-四氢萘醌(4-ethoxy-8-hydroxy-α-tetralone,Ⅵ)、2,3-二羟基-1-(4-羟基取代苯基)-1-丙酮[2,3-dihydroxy-1-(4-hydroxy-phenyl)-propan-l-one,Ⅶ]、二氢红花菜豆酸(dihydrophaseic acid,Ⅷ)。结论8个化合物均为首次从青龙衣中分离得到,其中化合物Ⅶ为新化合物,命名为核桃素D(juglanin D)。化合物Ⅳ为新的天然产物。

青龙衣化学成分研究

目的研究青龙衣的化学成分。方法采用溶剂萃取、硅胶柱色谱、高效液相色谱等方法进行分离纯化,通过核磁共振波谱、质谱等谱学数据分析鉴定结构。结果从青龙衣75%乙醇提取物中分离得到15个化合物,分别鉴定为表二氢菜豆酸(1)、4-丁氧基-5,8-二羟基-3,4-二氢-萘酮(2)、4-乙氧基-5,8-二羟基-3,4-二氢-萘酮(3)、茸毛香杨梅苷元(4)、多节孢酮(5)、4S-甲氧基-5,8-二羟基-二氢-萘酮(6)、4-甲氧基-5-羟基-α-四氢-萘酮(7)、胡桃种萘醌(8)、4,5,8-三羟基-1,2,3,4-四氢-萘-1-酮(9)、苹果酸-1-单乙酯(10)、苹果酸-1-单丁酯(11)、丁二酸(12)、葡萄糖乙苷(13)、1α,2α,4β-三羟基-1,2,3,4-四氢萘(14)、L-2-O-甲基-手性肌醇(15)。结论化合物5、10~14为首次从该属植物中分离得到,化合物1、4、15为首次从青龙衣中分离得到。

核桃花化学成分的研究

目的研究核桃Juglans regia花的化学成分。方法利用正和反相硅胶、Sephadex LH-20及制备液相等柱色谱方法进行分离纯化,根据谱学数据及理化性质鉴定化合物结构,并采用MTT法检测化合物的体外细胞毒活性。结果从核桃花95%乙醇水提取物中分离得到12个黄酮类化合物和7个生物碱类化合物,分别鉴定为金合欢素(1)、柚皮素(2)、5,7-二羟基-6,8,4′-三甲氧基黄酮(3)、木犀草素(4)、草质素(5)、白杨素(6)、异野樱素(7)、3,5-二羟基-4′,7-二甲氧基黄酮醇(8)、槲皮苷(9)、异槲皮苷(10)、山柰酚(11)、槲皮素(12)、2-(4-羟基苯乙基)异吲哚啉-1,3-二酮(13)、吲哚-3-甲酸乙酯(14)、1,2,3,4-四氢去甲哈尔满-1-酮(15)、3-醛基吲哚(16)、马齿苋酰胺E(17)、青兰素C(18)、N-苯甲酰-L-苯丙氨酸(19)。结论除化合物4和9~12外,其余化合物均为首次从胡桃属中分离得到,其中化合物13为1个新的天然产物。化合物2、3和5具有抑制人结肠癌HCT-116细胞、人肝癌HepG2细胞、人胃癌BGC-823细胞、人肺支气管癌NCI-H1650细胞、人卵巢癌A2780细胞的增殖作用。