橘红药材、饮片、标准汤剂与配方颗粒的指纹图谱相关性研究

目的建立橘红药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的HPLC指纹图谱,并分析其相关性和差异性。方法采用CORTECS T3色谱柱(150 mm×4.6 mm,2.7μm),乙腈(A)和0.05%磷酸水溶液(B)为流动相,进行梯度洗脱,流速为1.1 mL·min^(-1),检测波长为300 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。以橙皮苷为参照峰,测定15批橘红药材、饮片、标准汤剂与3批配方颗粒;采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)进行相似度评价,确定共有峰,并进行聚类分析。结果橘红药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的HPLC指纹图谱均确定了12个共有峰,并指认了其中7个峰,峰4为维采宁-2,峰6为阿魏酸,峰7为柚皮芸香苷,峰8为橙皮苷,峰10为川陈皮素,峰11为3,5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮,峰12为橘皮素。橘红药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒四者与相应对照指纹图谱的相似度均大于0.980;相关性分析的结果表明大部分共有峰显著相关;系统聚类分析结果表明,药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒之间无显著性差异。饮片到配方颗粒的质量分数转移率在21.7%~26.8%,均值为24.8%,在均值的±30%范围,未出现离散,说明传递性较好。结论橘红药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的主要化学成分组成基本相同,指纹图谱相关性良好,可为橘红配方颗粒生产过程的质量控制提供参考。

LC-MS/MS法分析橘红不同炮制品中9种成分含量差异

目的建立橘红中9种成分含量测定的方法,并探讨蜜炙、盐炙对橘红9种药效成分的影响。方法分别用盐炙法、蜜炙法加工橘红,采用LC-MS/MS法(高效液相色谱-串联质谱法)对橘红不同炮制品中绿原酸、芦丁、芸香柚皮苷、橙皮苷、橙皮素、柚皮素、橘红素、甜橙黄酮、川陈皮素9种成分进行含量测定分析。色谱条件:采用kinetex?GISTC18色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.6μm),以乙酸铵(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,柱温40℃,线性洗脱流速为0.4 mL/min。质谱条件:采用Sciex QTRAP4500复合三重四级杆线性离子肼串联质谱仪,在电喷雾正离子(ESI+)模式下,温度550℃,喷雾电压4500 V进行测定。结果实验建立了橘红中9种成分含量测定的方法,经验证该法稳定、可行。通过不同炮制品中9种成分的比较分析,结果显示,橘红素、甜橙黄酮、绿原酸、橙皮素、柚皮素含量炮制前后无显著变化,蜜橘红中橙皮苷含量显著升高,盐橘红中芸香柚皮苷含量显著降低,蜜橘红、盐橘红中川陈皮素炮制后含量降低。其中,橙皮苷含量在橘红蜜炙过程变化尤为明显。结论橘红经过蜜炙、盐炙后,部分成分升高,部分含量降低,其中橙皮苷作为主要药效成分,蜜炙后含量显著增高,推测可能与辅料影响和高温加热导致部分成分分解和成分之间相互转化以及促进药效成分溶出有关,实验结果可为蜜橘红的炮制增效作用提供理论支持,并为橘红炮制原理研究提供参考。