九运会艺术体操比赛与世界艺术体操锦标赛个人前8名运动员在4项A2加分的差距分析

采用最新国际艺术体操评分规则对九运会及世界艺术体操锦标赛个人前 8名绳、圈、球、棒的成绩册及比赛录像资料进行分析 ,研究表明 :增加我国运动员各项器械运用并结合难度完成的总数量 。

Th9细胞对非小细胞肺癌患者CD8^+T细胞抗肿瘤活性的调控作用

目的:观察并分析Th9细胞及其分泌的白细胞介素-9(IL-9)对非小细胞肺癌(NSCLC)患者CD8^+T细胞抗肿瘤活性的影响。方法:选择32例NSCLC患者(肺癌组)和11例健康对照者(对照组)。分离肺癌组血浆、外周血单个核细胞(PBMCs)、肿瘤部位和非肿瘤部位的支气管肺泡灌洗液(BALF)及对照组血浆和PBMCs,检测Th9细胞比例、IL-9水平和转录因子PU.1 mRNA相对表达量。纯化肺癌组Th9细胞、CD8^+T细胞和原代NSCLC细胞,使用重组IL-9刺激CD8^+T细胞,观察细胞增殖和分泌穿孔素、颗粒酶B水平。建立Th9细胞、CD8^+T细胞与原代NSCLC细胞的共培养细胞,观察IL-9对CD8^+T细胞的细胞杀伤功能和非细胞杀伤功能的影响。组间比较采用t检验、配对t检验或Wilcoxon配对检验。结果:肺癌组外周血Th9细胞比例、IL-9水平和PU.1 mRNA相对表达量低于对照组(均P<0.0001),肺癌组肿瘤部位分离的BALF中Th9细胞比例、IL-9水平和PU.1 mRNA相对表达量低于非肿瘤部位(均P<0.0001)。IL-9刺激可增加肺癌组CD8^+T细胞增殖和穿孔素、颗粒酶B分泌,IL-9刺激还可提升肺癌组CD8^+T细胞对原代NSCLC细胞的细胞杀伤和非细胞杀伤功能,主要表现为细胞死亡比率增加、干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌升高。Th9细胞也可提升肺癌组CD8^+T细胞对原代NSCLC细胞的细胞杀伤和非细胞杀伤功能,抗IL-9中和抗体可抑制Th9细胞对CD8^+T细胞功能的调控作用。结论:Th9细胞可能通过分泌IL-9在体外增强NSCLC患者CD8^+T细胞的抗肿瘤功能。

肿瘤浸润性辅助性T细胞9细胞对胃癌患者CD8^(+)T细胞抗肿瘤活性的调控作用

目的探讨辅助性T细胞9(Th9)细胞和白细胞介素9(IL-9)在胃癌患者中的水平,评估Th9/IL-9对胃癌患者抗肿瘤免疫应答的调控作用。方法纳入2018年10月至2019年8月在新乡医学院第一附属医院行手术治疗的胃癌患者34例,同期健康体检者20例。采集外周血,分离血浆和外周血单个核细胞(PBMCs),从手术切除的胃癌组织分离肿瘤浸润性淋巴细胞(TILs)和自体胃癌细胞,分选PBMCs和TILs中的CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞和CD4^(+)CCR4^(-)CCR6^(-)CXCR3^(-)细胞。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆IL-9水平,流式细胞术检测PBMCs和TILs中CD3^(+)CD4^(+)IL-9^(+)Th9细胞比例,实时荧光定量聚合酶链反应检测IL-9和转录因子富嘌呤核酸结合蛋白1(PU.1)mRNA的相对表达量。以重组人IL-9刺激胃癌患者PBMCs和TILs,采用细胞计数试剂盒8法检测细胞增殖,Western blot法检测信号转导和转录激活因子3(STAT3)和STAT6磷酸化,ELISA法检测细胞因子分泌。以重组人IL-9刺激胃癌患者TILs分选的CD8^(+)T细胞,建立CD8^(+)T细胞与自体胃癌细胞的直接接触与间接接触共培养系统,通过检测乳酸脱氢酶(LDH)水平计算靶细胞死亡比例,ELISA法检测γ-干扰素(γ-IFN)和肿瘤坏死因子(TNF-α)水平。CD4^(+)CCR4^(-)CCR6^(-)CXCR3^(-)细胞、CD8^(+)T细胞与自体胃癌细胞共培养,加入抗IL-9中和抗体,检测靶细胞死亡比例。结果对照组PBMCs和胃癌组PBMCs中CD3^(+)CD4^(+)IL-9^(+)Th9细胞比例分别为(1.21±0.25)%和(1.14±0.19)%,差异无统计学意义(P=0.280)。胃癌组TILs中CD3^(+)CD4^(+)IL-9^(+)Th9细胞比例为(2.30±0.55)%,高于对照组PBMCs和胃癌组PBMCs(均P<0.001)。对照组和胃癌组血浆IL-9水平分别为(5.04±1.51)ng/ml和(4.93±1.25)ng/ml,差异无统计学意义(P=0.787)。对照组PBMCs和胃癌组PBMCs中IL-9 mRNA相对表达量分别为1.33±0.39和1.36±0.27,差异无统计学意义(P=0.691)。胃癌组TILs中IL-9 mRNA相对表达量为2.90±0.75,高于对照组PBMCs(P<0.001)和胃癌组PBMCs(P<0.001)。对照组和胃癌组PBMCs中PU.1 mRNA相对表达量分别为1.21±0.12和1.20±0.11,差异无统计学意义(t=0.21,P=0.833)。胃癌组TILs中PU.1 mRNA相对表达量为2.81±0.65,高于对照组PBMCs(P<0.001)和胃癌组PBMCs(P<0.001)。重组人IL-9对胃癌患者PBMCs和TILs的增殖无明显影响(均P>0.05),但可提高STAT6的磷酸化水平,促进TILs分泌γ-IFN、IL-17和IL-22(均P<0.05)。在直接接触共培养系统中,IL-9刺激使肿瘤浸润性CD8^(+)T细胞诱导的自体胃癌细胞死亡比例增加[(20.62±2.27)%比(16.08±2.61)%,P<0.01)]。在间接接触共培养系统中,IL-9刺激并未增加CD8^(+)T细胞诱导自体胃癌细胞死亡比例[(5.21±0.70)%比(5.31±1.22)%,P=0.998]。但在两种共培养系统中,IL-9刺激后γ-IFN分泌水平均增加[直接接触共培养系统:(100.40±12.05)pg/ml比(76.45±8.56)pg/ml;间接接触共培养系统:(78.00±9.98)pg/ml比(42.09±10.71)pg/ml;P<0.01],TNF-α分泌水平均无明显变化(均P>0.05)。在直接接触共培养系统中,CD4^(+)CCR4^(-)CCR6^(-)CXCR3^(-)细胞+CD8^(+)T细胞+胃癌细胞组的靶细胞死亡比例为(22.01±3.05)%,γ-IFN水平为(104.5±12.84)pg/ml,均高于CD8^(+)T细胞+胃癌细胞组[分别为(16.08±2.61)%和(76.45±8.56)pg/ml,均P<0.01],但CD4^(+)CCR4^(-)CCR6^(-)CXCR3^(-)细胞+CD8^(+)T细胞+胃癌细胞+抗IL-9中和抗体组的靶细胞死亡比例为(14.47±3.14)%,γ-IFN水平为(70.45±19.43)pg/ml,均低于CD4^(+)CCR4^(-)CCR6^(-)CXCR3^(-)细胞+CD8^(+)T细胞+胃癌细胞组(均P<0.01)。结论肿瘤浸润性Th9细胞及其分泌的IL-9可促进胃癌患者CD8^(+)T细胞活性,增强抗肿瘤免疫应答。