JDP2:一种参与组蛋白乙酰化的转录因子

Jun二聚化蛋白-2(Jun dimerization protein-2,JDP2)是转录因子复合体AP-1的抑制性组分。JDP2能形成同源二聚体或与c-Jun、JunB、JunD、ATF-2等形成异源二聚体,抑制AP-1的转录激活作用。同时JDP2还能募集组蛋白去乙酰基酶,或直接与组蛋白结合,抑制组蛋白的乙酰化,通过改变染色质结构调控基因转录。J D P2通过在D N A、染色质多个水平调控基因的转录,在细胞的多种生理或病理活动中发挥着重要作用。

新基因JDP2通过不同通路抑制人胰腺癌上皮向间质转化作用的研究

目的研究Jun二聚化蛋白2(JDP2)与人胰腺癌细胞系BxPC3上皮向间质转化(EMT)之间的关系。方法应用pCEFL-HA-JDP2质粒瞬时转染BxPC3细胞系,并继续分别用转化生长因子β1(TGF-β1)和I型胶原(Collagen I)诱导,以仅加DMSO为空白对照组,倒置显微镜观察细胞形态学变化,Western blot及免疫荧光检测E-cadherin、vimentin的表达。Transwell小室侵袭实验验证侵袭能力的变化。结果与空白对照组相比,转染JDP2组上皮标志物E-cadherin及间质标志物vimentin表达变化不明显,而转染空质粒组则E-cadherin表达降低而vimentin表达升高,提示JDP2能够抑制由Collagen I及TGF-β1诱导的EMT;同时我们验证,转染JDP2质粒组细胞侵袭能力亦明显小于转染空质粒组细胞(P<0.05)。结论 JDP2,作为AP-1类因子的抑制因子,可以通过不同通路抑制EMT的产生,从而为胰腺癌的分子靶向治疗找到新的方向。

JDP2在TGF-β1诱导的人胰腺癌细胞系Panc-1上皮向间质转化中的作用

目的:研究JDP2与TGF-β1诱导的人胰腺癌细胞系Panc-1上皮向间质转化之间的关系.方法:实验分为空白对照组、JDP2转染组、空质粒转染组3组,并分别用P、P-J-T、P-V-T缩写代表.用pCEFL-HA-JDP2质粒和pCEFL空质粒瞬时转染人胰腺癌细胞系Panc-1,48h之后应用TGF-β1分别刺激JDP2转染和空质粒转染组细胞48h.以正常的Panc-1细胞为空白对照组,仅加等量的PSB.倒置显微镜下观察各组细胞的形态学变化的差异;应用RT-PCR及Westernblot的方法检测E-cadherin及vimentin的蛋白及mRNA表达变化;应用Transwell侵袭实验观察各组细胞的迁移能力.结果:P-J-T组能够明显抑制由TGF-β1诱导产生的EMT.与P组相比,P-J-T组大部分细胞没有明确的形态学上的变化,E-cadherin及vimentin蛋白及mRNA表达变化不明显,迁移能力亦无明确差异(48.0±5.3vs52.0±7.2),未成功诱导EMT;而P-V-T组Panc-1细胞大多数变成长梭形,细胞间紧密连接丢失,E-cadherin表达明显降低(mRNA表达:P<0.01;蛋白表达:P<0.05),vimentin蛋白及mRNA表达明显升高(P<0.01),侵袭至小室下室的细胞明显增加(48.0±5.3vs81.0±10.7,P<0.01),出现非常显著的上皮向间质转化特征.结论:JDP2具有明显抑制EMT的作用,JDP2转染后的胰腺癌细胞系可以明显抑制由TGF-β1诱导的EMT,这使得JDP2有可能成为新的胰腺癌的靶向治疗因子.

非小细胞肺癌组织中Jdp2、Phf2表达变化及意义

目的探讨非小细胞肺癌组织中Jun二聚化蛋白2(Jdp2)、Phf手指蛋白2(Phf2)的表达变化及意义。方法选取非小细胞肺癌患者86例,采用免疫组化法检测癌组织及正常肺组织(距肿瘤边缘>5 cm)中Jdp2、Phf2的表达,分析二者表达与非小细胞肺癌患者临床病理特征的关系,Spearman相关分析二者表达的相关性;对患者进行随访,分析Jdp2、Phf2表达与患者预后的关系。结果非小细胞肺癌组织中Jdp2、Phf2阳性表达率低于正常肺组织(P均<0.05)。非小细胞肺癌组织中Jdp2与Phf2表达呈正相关(r=0.672,P<0.05)。非小细胞肺癌组织中Jdp2、Phf2阳性表达与肿瘤TNM分期、分化程度有关(P均<0.05)。Jdp2、Phf2阳性表达患者5年生存率低于Jdp2、Phf2阴性表达患者(P<0.05)。结论非小细胞肺癌组织中Jdp2、Phf2均呈低表达,二者表达变化与肿瘤分期、分化程度及患者预后有关。

JDP2与胰腺癌侵袭及转移的相关性

目的:探讨JDP2蛋白在胰腺癌组织中的表达及其与胰腺癌临床病理特征的关系.方法:利用Western blot检测36例胰腺癌手术切除标本与对应的癌旁胰腺组织中JDP2蛋白的表达.用Log-rank检验分析JDP2蛋白表达与预后的关系.结果:JDP2在胰腺癌中的表达与对应癌旁胰腺组织相比显著下降(0.287±0.052vs0.517±0.172,P<0.05).JDP2在胰腺癌中的表达与肿瘤大小、病理分级、肿瘤累及范围、淋巴结转移、远处转移和临床分期有明显差异(P<0.05),胰腺癌中JDP2的表达水平下降时,术后生存时间明显缩短(P<0.01).结论:JDP2可能与胰腺癌的增殖、侵袭、转移及预后密切相关.

miR-203a-3p靶向JDP2基因调控结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的探讨miR-203a-3p靶向Jun二聚化蛋白(JDP)2基因对结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法将miR-con组(转染miR-con)、miR-203a-3p组(转染miR-203a-3p mimics)、anti-miR-203a-3p组(转染anti-miR-203a-3p)、anti-miR-con组(转染anti-miR-con)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-JDP2组(转染pcDNA-JDP2)、anti-miR-203a-3p+si-con组(共转染anti-miR-203a-3p和si-con)、anti-miR-203a-3p+si-JDP2组(共转染anti-miR-203a-3p和si-JDP2)、miR-con+野生型3′URT-荧光素酶表达载体(JDP2-WT)组(共转染miR-con和JDP2-WT)、miR-con+突变型3′URT-荧光素酶表达载体(JDP2-MUT)组(共转染miR-con和JDP2-MUT)、miR-203a-3p+JDP2-WT组(共转染miR-203a-3p和JDP2-WT)、miR-203a-3p+JDP2-MUT组(共转染miR-203a-3p和JDP2-MUT),均用脂质体法转染至结肠癌HT29细胞中;采用qRT-PCR检测miR-203a-3p和JDP2 mRNA表达水平;Western印迹检测蛋白表达;噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;Transwell检测各组细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果与人正常结肠黏膜上皮细胞NCM460相比,结肠癌细胞SW480、SW620、LOVO和HT29中miR-203a-3p表达水平显著升高,JDP2表达水平显著降低(P<0.05);干扰miR-203a-3p表达、过表达JDP2均可抑制HT29细胞增殖、迁移和侵袭,并下调基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、周期蛋白依赖性激酶(CDK)4及细胞周期蛋白(Cyclin)D1蛋白表达(P<0.05)。miR-203a-3p靶向调控JDP2的表达,干扰miR-203a-3p抑制HT29细胞增殖、迁移和侵袭的结果被沉默JDP2表达所逆转,沉默JDP2表达能够减弱干扰miR-203a-3p对HT29细胞抗增殖、抗迁移、抗侵袭作用。结论干扰miR-203a-3p对结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭具有抑制作用,其机制可能与靶向调控JDP2有关。

活血补肾安神方调控AhR-JDP2-Nrf2轴改善H9c2细胞氧化损伤的机制研究

目的基于AhR-JDP2-Nrf2轴探讨活血补肾安神方改善H9c2细胞氧化损伤的作用机制。方法将H9c2细胞分为正常组、模型组、中药组、曲美他嗪组、空质粒组、过表达组、中药+过表达组、曲美他嗪+过表达组,采用H_(2)O_(2)诱导氧化应激模拟心肌损伤,转染Jun二聚化蛋白2(JDP2)过表达基因,分别予活血补肾安神方和盐酸曲美他嗪干预。流式细胞仪检测细胞凋亡,试剂盒检测细胞上清液丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型辅酶Ⅱ(NADPH)含量,Western blot检测H9c2细胞芳香烃受体(AhR)、JDP2、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)蛋白表达,RT-qPCR检测AhR、JDP2、Nrf2、HO-1mRNA表达。结果与正常组比较,模型组H9c2细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率升高(P<0.01),细胞上清液MDA、SOD、NADPH含量升高(P<0.05),细胞AhR、JDP2、Nrf2、HO-1蛋白及mRNA表达升高(P<0.05);与模型组比较,中药组和曲美他嗪组H9c2细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率显著降低(P<0.01),细胞上清液MDA、SOD、NADPH含量降低(P<0.05),中药组H9c2细胞AhR、JDP2、Nrf2、HO-1蛋白及mRNA表达降低(P<0.05)。与空质粒组比较,过表达组H9c2细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率升高(P<0.01),细胞上清液MDA、NADPH含量升高(P<0.01),SOD含量降低(P<0.01),细胞AhR、JDP2、Nrf2、HO-1蛋白及mRNA表达升高(P<0.05);与过表达组比较,中药+过表达组和曲美他嗪+过表达组H9c2细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率显著降低(P<0.05,P<0.01),细胞上清液MDA、NADPH含量降低(P<0.01),SOD含量升高(P<0.01),细胞AhR、JDP2、Nrf2、HO-1蛋白及mRNA表达降低(P<0.05)。结论活血补肾安神方可能通过调节JDP2表达调控AhR-JDP2-Nrf2轴,减轻H9c2细胞氧化损伤,抑制心肌细胞凋亡,发挥保护心肌细胞作用。

EDNRA和JDP2基因与中国汉族人群散发颅内动脉瘤关联分析

目的研究内皮素受体A型基因（EDNRA）和Jun二聚化蛋白-2基因（JDe2）基因单核苷酸多态性（SNP）位点与中国汉族人群散发颅内动脉瘤的相关性。方法收集四川省人民医院神经外科自2008年至2012年收治的288例颅内动脉瘤患者和576例正常人的外周血DNA样本，采用病例对照关联研究方法，及通过SnapShot单碱基延伸法分析，选取EDNRA基因上游rs6842241、rs6841581位点和JDP2基因rs741846、rs175646位点，分析其与颅内动脉瘤的相关性。结果EDNRA基因rs6842241和rs6841581位点及JDP2基因rs741846和rs175646位点的基因型分布均符合哈迪一温伯格（Hardy-Weinberg）平衡（P〉0．05）。rs6842241（P=0．000）、rs6841581（P=0．000）等位基因频率在颅内动脉瘤组与对照组之间差异有统计学意义，而rs741846（P=0．156）、rs175646（P=-0．223）等位基因频率在颅内动脉瘤组与对照组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。Haploview单体型分析发现，rs6842241和rs6841581位于同一个连锁不平衡区域，其单体型CG、AA和AG在颅内动脉瘤组与对照组相比频率更高，差异具有统计学意义（P=-0．000，P=-0．000，P=0．009）。结论EDNRA基因上游rs6842241、rs6841581位点与中国汉族人颅内动脉瘤发病相关，而归忍基因rs741846、rs175646位点则与中国汉族人颅内动脉瘤的发病不相关。

非小细胞肺癌分子生物学指标临床意义分析

目的分析非小细胞肺癌患者癌组织中XIAP及Jdp2、FATS表达水平以及其临床意义,为临床治疗非小细胞肺癌及观察患者病情变化提供一定依据。方法将2019年3月—2021年1月天津市蓟州区人民医院收治的93例非小细胞肺癌患者纳入本次研究,所有纳入患者均行手术切除肿瘤治疗,并取患者癌组织以及癌旁组织进行分析,比较癌组织以及癌旁组织XIAP、Jdp2及FATS的阳性表达率,并分析XIAP、Jdp2、FATS阳性表达和TNM分期的关系,通过Pearson相关性分析法分析XIAP、Jdp2、FATS表达的相关性。结果癌旁组织Jdp2、FATS阳性率明显高于癌组织,而XIAP阳性率明显低于癌组织(P<0.05)。I期~Ⅱ期患者Jdp2、FATS阳性表达率明显高于Ⅲ期~Ⅳ期,XIAP阳性表达率明显低于Ⅲ期~Ⅳ期(P<0.05)。Jdp2以及FATS表达呈正相关(r=0.435,P<0.01)、Jdp2以及XIAP表达呈负相关(r=-0.617,P<0.01),FATS以及XIAP表达呈负相关(r=-0.538,P<0.01)。结论Jdp2、FATS的低表达、XIAP的高表达均与非小细胞肺癌疾病的发生以及发展具有十分密切的关系,且其表达具有一定相关性,可将其作为非小细胞肺癌诊疗的分子生物学指标,为临床诊断及治疗提供一定依据。