组成型光形态建成蛋白1介导p53及Jun激酶泛素化通路的研究进展

组成型光形态建成蛋白1(COP1)于多种类型肿瘤中过度表达,在促进细胞增殖、转化和肿瘤进展等多种生物学过程中起重要的作用。COP1与p53呈负调节并参与致癌基因Jun激酶的信号通路。目前COP1表达在人类肿瘤发生、发展中的具体作用仍存在许多争论,通过解析COP1与p53和Jun激酶的相互关联,进一步探讨与肿瘤的侵袭及转移关系。

c-Jun氨基末端激酶在慢性低O_2高CO_2大鼠海马损伤中的作用

目的:探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)在慢性低O2高CO2大鼠海马损伤中的作用。方法:采用慢性低O2高CO2肺动脉高压大鼠模型。30只SD大鼠随机分为正常对照(NC)组、低O2高CO22周(2WH)组和低O2高CO24周(4WH)组,每组10只。Morris水迷宫检测行为学,用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)动态观察海马p-JNKmRNA的转录情况,免疫组织化学法测定p-JNK在海马CA1/CA3区的变化,TUNEL法检测海马CA1/CA3区神经细胞凋亡。结果:与NC组相比,低O2高CO22WH、4WH组大鼠寻找站台的平均逃避潜伏期延长、游泳总距离增加(P<0.01或P<0.05),且4WH组比2WH组潜伏期延长及游泳总距离增加更加明显(P<0.05);NC组大鼠海马仅见少量JNKmRNA及蛋白表达,低O2高CO2各组较NC组JNK表达明显增加(P<0.01或P<0.05),且4WH组比2WH组增加更明显(P<0.05)。低O2高CO22WH、4WH组的TUNEL阳性细胞数均明显多于NC组(P<0.01或P<0.05),且4WH组比2WH组增多明显(P<0.01)。结论:低O2高CO2能导致大鼠学习记忆障碍,可能与激活海马神经细胞内JNK有关。

补阳还五汤对大鼠脑缺血后蛋白激酶B1和c—Jun氨基末端激酶1／2表达的影响

目的探讨补阳还五汤对脑缺血后大鼠蛋白激酶B1（AKT1）和c-Jun氨基末端激酶1/2（JNK1/2）的影响。方法将48只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组、模型组、补阳还五汤组，每组12只。采用大脑中动脉闭塞法（MCAO）建立右侧局灶性脑缺血大鼠模型。补阳还五汤组大鼠于术后2h起灌服补阳还五汤（主要由生黄芪120g、当归6g、赤芍4.5g、川芎3g、西红花3g、桃仁3g、广地龙3g组成）14.2 g/kg，每日1次，连续7 d。其他各组动物均给予等体积生理盐水。于第7日处死大鼠，取脑组织，采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）测定AKT1 mRNA表达，采用免疫组化法检测JNK1/2蛋白表达。结果与正常对照组和假手术组比较，模型组AKT1 mRNA表达量〔吸光度（A）值〕明显降低（0.48±0.08比0.63±0.11、0.61±0.09，均P＜0.05），JNK1/2阳性细胞数（个/mm2）明显增多（34.13±4.57比16.15±1.09、16.23±2.05，均P＜0.05）；与模型组比较，补阳还五汤组脑组织中AKT1 mRNA表达（0.93±0.11）和JNK1/2阳性细胞数（45.04±5.68）明显增加，差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。结论补阳还五汤可上调缺血脑组织AKT1 mRNA和JNK1/2阳性细胞数表达，是其脑保护作用机制之一。

益气活血通络解毒方对肺缺血／再灌注损伤小鼠细胞凋亡及c—Jun氨基末端激酶通路的影响

目的观察益气活血通络解毒方（YHTJF）对小鼠肺缺血／再灌注（I／R）损伤（LIRI）的影响，并探讨c-Jun氨基末端激酶（JNK）是否参与其凋亡机制。方法选择雄性C57BL／6J小鼠70只，按随机数字表法分为正常对照组（C组）、羧甲基纤维素钠（CMC-Na）＋正常对照组（CMC-Na＋C组）、CMC-Na＋假手术组（CMC-Na＋S组）、CMC-Na＋I/R模型组和CMC-Na＋YHTJF低、中、高浓度干预组（CMC-Na＋YL组、CMC-Na＋YM组、CMC-Na＋YH组）。C组不进行任何处理；CMC-Na＋S组只开胸，不夹闭肺门；其余各组均开胸夹闭肺门30min，再松开动脉夹使左肺再灌注3h。术毕处死小鼠留取肺组织，光镜和电镜下观察肺组织形态学及超微结构改变，并观察肺泡损伤定量评估指标（IQA）的变化；用原位末端缺刻标记试验（TUNEL）检测肺组织细胞凋亡指数（AI）；用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）和反转录-聚酶链反应（RT-PCR）检测JNK、葡萄糖调节蛋白78（GRP78）的mRNA和蛋白表达；并分析肺组织AI与JNK、GRP78的mRNA和蛋白表达及IQA的相关性。结果CMC-Na＋I／R组IQA、AI及JNK和GRP78 mRNA和蛋白表达均较CMC-Na＋S组明显升高[IQA：（74．00±7．31）％比（7．00±1．23）％，AI：（64．40±11．97）％比（5．60±1．14）％，JNKmRNA（灰度值）：1．143±0．284比0．152±0．128，GRP78 mRNA（灰度值）：0．897±0．129比0．284±0．044，JNK蛋白（A值）：0．428±0．074比0．073±0．052，GRP78蛋白（A值）：1．075±0．145比0．589±0．060j，CMC-Na＋YL组、CMC-Na＋YM组、CMC-Na＋YH组IQA、AI、JNK mRNA和蛋白、GRP78mRNA表达均较CMC-Na＋I／R组明显下降，以CMC-Na＋YM组较CMC-Na＋YL和CMC-Na＋YH组下降程度更显著[IQA：（26．20±3．35）％比（34．00±5．34）％、（41．20±9．18）％，AI：（29．40±3．05）％比（48．20±3．83）％、（39．20±6．14）％，JNK mRNA（灰度值）：0．681±0．130比0．804±0．153、0．938±0．11，GRP78 mRNA（灰度值）：0．450±0．105比0．747±0．231、0．566±0．115，JNK赁白（A值）：0．188±0．049比0．261±0．065、0．209±0．063，均P〈0．01]，CMC-Na＋YH组、CMC-Na＋YL组和CMC-Na＋YM组GRP78蛋白表达较CMC-Na＋I／R组明显升高，以CMC-Na＋YH组升高程度较CMC-Na＋YL组和CMC-Na＋YM组更显著（A值：1．429±0．226比1．130±0．169、1．128±0．177，均P〈0．01）。光镜下可见各组细胞凋亡以肺血管内皮细胞、肺泡上皮细胞为主，棕色颗粒为阳性细胞。电镜下可见：CMC-Na＋I／R组细胞核固缩并边集在核膜下，胞质浓缩，板层体减少、排空增多，细胞膜上微绒毛减少或消失，线粒体肿胀，肺泡隔及毛细血管内炎性细胞附壁增多。与CMC-Na＋I／R组比较，CMC-Na＋YL组、CMC-Na＋YM组、CMC-Na＋YH组肺组织超微结构损伤减轻，肺泡结构超微结构清晰可辨，核染色质较均匀，胞质增多，Ⅱ型肺泡上皮细胞表面微绒毛较多，板层小体数量增多，线粒体肿胀减轻，以CMC-Na＋YM组减轻最明显。肺组织AI与JNK、GRP78的mRNA和蛋白表达、IQA均呈显著正相关性（r值分别为0．907、0．928、0．880、0．712、0．911，均P〈0．01）。结论YHTJF可有效减轻小鼠LIRI肺组织细胞的凋亡，其机制可能与抑制JNK通路有关。

c-Jun氨基末端激酶与非酒精性脂肪性肝病

目前非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的发病率日益增加,但其发病机制至今仍不清楚。c-Jun氨基末端激酶是进化上保守的富含丝氨酸/苏氨酸的蛋白激酶家族成员之一,它与多种疾病的发病机制有关。近年来研究发现,c-Jun氨基末端激酶在NAFLD发病机制中具有重要作用,尤其是两种不同亚型在其中的独特作用更加引人关注。

IgA肾病中磷酸化c-Jun氨基末端激酶与肾小管上皮细胞转分化关系的研究

目的检测IgA肾病(IgAN)患者肾小管间质中转化生长因子β(1TGF-β1)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)在体内对肾小管上皮细胞转分化的调控作用。方法参考IgAN病理类型HASS分级标准,把39例IgAN患者的肾活检标本,分为轻度增生组(HaasⅠ、Ⅱ型)、局灶增生组(HaasⅢ型)和增生硬化组(HaasⅣ、Ⅴ型)。据Katafuchi半定量积分标准评估肾小管间质损伤指数,用免疫组织化学技术检测TGF-β1、p-JNK、α-SMA在肾小管间质的表达。结果 IgAN各病变组肾小管间质损伤指数和TGF-β1、p-JNK、α-SMA表达均增高,且p-JNK与TGF-β1、α-SMA表达和肾小管间质损伤指数正相关。结论在IgAN患者肾组织中,JNK可能是调控TGF-β1介导的肾小管上皮细胞转分化的关键细胞内信号。

热休克蛋白70抑制c—Jun氨基末端激酶通路对H2O2诱导心肌细胞凋亡的保护作用

目的 观察热休克蛋白70（HSP70）对H2O2诱导乳鼠心肌细胞凋亡的保护作用及其机制。方法培养大鼠心肌细胞，随机分为5组：对照组、H2O2组、热休克组、c—Jun氨基末端激酶（JNK）抑制剂组、热休克＋JNK抑制剂组。生化法测定各组细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、肌酸激酶（CK）活性和丙二醛（MDA）水平．流式细胞仪分析心肌细胞凋亡，噻唑蓝（MTT）法测定心肌细胞相对活力，Western blot法检测JNK的表达。结果 H2O2组LDH、MDA水平和CK活性明显高于其他组（P〈0．01），而SOD活性则明显低于其他组（P〈0．01）。细胞凋亡率H2O2组明显高于其他各组（P〈0．01）。细胞活力H20：组明显低于对照组（P〈0．01）．而热休克组、JNK抑制剂组、热休克＋JNK抑制剂组的细胞活力明显高于H2O2组（P〈0．01）。JNK只在H2O2组有表达。结论 HSP70对H2O2诱导的心肌细胞凋亡具有保护作用，其机制可能是HSP70大量表达后抑制了JNK信号的转导。

导痰汤通过c—Jun氨基末端激酶信号通路抑制人脐静脉内皮细胞细胞间黏附分子-1表达的研究

目的通过体外实验研究导痰汤是否能通过调节c—Jun氨基末端激酶（JNK）信号通路来干预细胞间黏附分子-1（ICAM—1）的表达，以揭示导痰汤治疗动脉粥样硬化的机制。方法培养人脐静脉内皮细胞（HuVEc），并随机分为7组。空白对照组：正常培养HUVEC24h；导痰汤对照组：用20％导痰汤含药血清预处理HUVEC6h；肿瘤坏死因子-a（TNF-a）诱导组：用200kU／L TNF—a培养HuVEC12h；5％、10％、20％导痰汤干预组及JNK阻滞组：TNF—a诱导前分别给予5％、10％、20％导痰汤含药血清或25umol／L JNK特异性阻滞剂SP600125预处理。采用聚合酶链反应（PCR）和蛋白质免疫印迹法（western blotting）检测HUVEC中ICAM-1mRNA和JNK蛋白的表达。结果TNF—a诱导组ICAM-1 mRNA和JNK蛋白表达显著高于空白对照组和导痰汤对照组（均P〈0．01）；用导痰汤含药血清或SP600125预处理，ICAM-1mRNA和JNK蛋白表达显著下降（P〈0．05或P〈0．01）。JNK蛋白与ICAM-1mRNA水平呈显著正相关（r=0．680，P〈0．01）。结论导痰汤可以有效抑制TNF—a刺激所致的HUVEC中ICAM-1的过度表达，这可能与导痰汤可抑制JNK信号通路有关。

c-Jun氨基末端激酶在慢性移植物抗宿主病狼疮样小鼠肾组织的表达及氟伐他汀的干预作用

建立慢性移植物抗宿主病(cGVHD)狼疮样小鼠模型,观察c-Jun氨基末端激酶(JNK)在狼疮样小鼠肾组织中的表达及氟伐他汀的干预作用。(C57BL/6J×DBA/2)F1代小鼠随机分为正常对照组、氟伐他汀高剂量组(10mg/kg)、低剂量组(5mg/kg)和模型组,16周后处死,采用双缩脲比色法观察各组小鼠24h尿蛋白量,免疫组织化学法定位检测JNK、p-JNK在肾组织的表达,RT-PCR法检测各组JNK mRNA表达及Western blotting半定量检测JNK、p-JNK蛋白表达。结果显示,模型组小鼠24h尿蛋白量、JNK mRNA及JNK、p-JNK蛋白表达较正常对照组均显著增加(P<0.01);氟伐他汀干预组较模型组上述指标均明显降低(P<0.01);高剂量组较低剂量组降低更明显(P<0.05)。JNK可能参与了狼疮肾炎病情进展,氟伐他汀可能通过影响JNK的表达从而延缓狼疮肾炎肾纤维化进程。

c-Jun氨基末端激酶在转化生长因子-β_1诱导肾系膜细胞合成纤维连接蛋白中的作用

目的研究c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)在转化生长因子-1β(transforminggrowth factor-β1,TGF-β1)诱导肾系膜细胞合成纤维连接蛋白(fibronectin)中所介导的作用。方法用蛋白免疫印迹法检测TGF-β1诱导的肾系膜细胞纤维连接蛋白合成以及JNK的磷酸化。用SP600125来抑制JNK的活性。结果加入TGF-β1后,系膜细胞JNK磷酸化水平逐渐增加,5 h时达高峰,TGF-1β显著增加系膜细胞纤维连接蛋白的表达。用SP600125预处理系膜细胞能增加TGF-β1引起的纤维连接蛋白表达,且具有剂量依赖性。结论JNK活化可能负性调控TGF-β1引起的纤维连接蛋白表达。

c-Jun氨基末端激酶与炎症性肠病发病的关系

c-Jun氨基末端激酶(JNK)是促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族成员之一,在机体的炎性反应过程中起到重要作用,其参与包括炎症性肠病(IBD)在内的一些炎性疾病的发病。现对JNK信号通路的致炎作用及其对于IBD发病的影响作一综述。

盐酸戊乙奎醚抑制脂多糖致急性肺损伤大鼠肺组织p38丝裂原活化蛋白激酶的活化

目的:观察盐酸戊乙奎醚(PHC)对脂多糖(LPS)致急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、c-jun氨基末端激酶(JNK)活化的影响。方法:SD大鼠随机分为对照组、LPS模型组(5mg/kgLPS,iv)和LPS+PHC高、中、低(3.0、1.0和0.3mg/kg)3个剂量组,每组6只,进行PHC对肺组织p38MAPK、JNK表达的量效性分析;另取大鼠在注入NS后即刻0(对照组)和注射LPS后2h、4h、6h和12h共5个时点,每时点6只,进行肺组织p38MAPK、JNK表达的时效性分析。蛋白免疫印迹法检测肺组织p38MAPK、JNK的表达。结果:LPS模型组大鼠肺组织磷酸化p38MAPK、JNK的表达显著高于对照组(P<0.05);PHC高剂量组显著抑制LPS诱导的大鼠肺组织磷酸化p38MAPK表达(P<0.05);PHC在造模后6h时最能有效抑制磷酸化p38MAPK上调。与LPS模型组相比,PHC高、中、低剂量组磷酸化JNK的表达均无显著差异(均P>0.05);造模后不同时点,PHC对磷酸化JNK的表达均无抑制作用。结论:PHC抑制LPS诱导的ALI大鼠肺组织p38MAPK活化,但不能抑制JNK活化,PHC对LPS诱导大鼠ALI的拮抗作用可能与其抑制p38MAPK的活化有关。

刺糖多糖对小鼠腹腔巨噬细胞核转录因子、丝裂原活化蛋白激酶及氨基末端激酶信号通路相关基因和蛋白表达的影响

目的探讨刺糖多糖对小鼠腹腔巨噬细胞中核转录因子(NF-κB)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)及c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路相关基因和蛋白表达水平的影响。方法将处于对数生长期的小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7按1×10^8 L^-1接种至24孔细胞培养板中,24 h后更换细胞培养液。将细胞分为0.0、12.5、50.0、100.0 mg·L^-1刺糖多糖组,每组细胞加入相应浓度的刺糖多糖干预24 h。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组细胞中p38、NF-κB p65、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)、JNK1/2/3 mRNA的表达,采用Western blot法检测各组细胞中磷酸化p38(p-p38)、p38、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)、NF-κB p65、磷酸化ERK1/ERK2(p-ERK1/ERK2)、ERK1/ERK2、磷酸化JNK1/2/3(p-JNK1/2/3)及JNK1/2/3蛋白的表达。结果刺糖多糖干预巨噬细胞24 h后,与0.0 mg·L^-1刺糖多糖组比较,50.0、100.0 mg·L^-1刺糖多糖组细胞中ERK1、NF-κB p65 mRNA表达量显著升高(P<0.05);12.5、50.0、100.0 mg·L^-1刺糖多糖组细胞中p38 mRNA表达量显著升高(P<0.05)。与12.5 mg·L^-1刺糖多糖组比较,50.0、100.0 mg·L^-1刺糖多糖组细胞中ERK1、p38、NF-κB p65 mRNA表达量显著升高(P<0.05)。与0.0、12.5 mg·L^-1刺糖多糖组比较,50.0、100.0 mg·L^-1刺糖多糖组细胞中p-p38、p-NF-κB p65、p-ERK1/ERK2、ERK1/ERK2蛋白表达量显著升高(P<0.05)。结论刺糖多糖能上调p38、NF-κB p65、ERK1/2蛋白的磷酸化水平,从而激活MAPK信号通路和NF-κB信号通路;刺糖多糖的免疫机制可能与NF-κB p65、p38、ERK1mRNA表达上调有关。

氨基末端激酶信号通路在Apoptin基因诱导Hela细胞凋亡中的作用

目的:探讨肿瘤特异性凋亡基因(Apoptingene)在诱导Hela细胞凋亡时,c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路在细胞发生凋亡中的作用。方法:用含有肿瘤特异性凋亡(Apoptin)基因的真核表达载体瞬间转染体外培养的Hela;采用流式细胞仪、免疫印迹法(Westernblot)、苔盼蓝染色法及RT-PCR等方法研究其在不同时间条件下Hela细胞诱导凋亡的作用。结果:Apopin基因瞬间转染的Hela细胞可出现明显的细胞凋亡;而且凋亡细胞的数量与Apoptin的转染时间有关;凋亡细胞内磷酸化型JNK蛋白随凋亡细胞数量的增加而增多,而非磷酸化型JNK蛋白表达无明显变化。结论:Apoptin基因具有诱导Hela细胞凋亡的作用,JNK信号通路的激活可能在Apoptin诱导肿瘤细胞凋亡过程中发挥作用。

氨基末端激酶信号通路在细跑凋亡中的作用

目的观察维生素E琥珀酸酯(VES)和维生素E(VE)对人B细胞白血病细胞株(Raji)的诱导凋亡作用及c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路在VES诱导细胞凋亡中的作用。方法应用流式细胞仪、免疫印迹法(Westernblot)等技术方法,体外观察VES和VE对Raji细胞的作用。结果VES和VE对Raji细胞均有程度不一的诱导凋亡作用,VES处理后6h,在DNA直方图上G1峰前出现一个明显的凋亡峰,并随着VES作用时间延长而增强,具有时间效应关系,而VE诱导凋亡的作用则相对较弱,同时VES作用后,细胞内磷酸化型JNK蛋白于6h开始增高,12h达到高峰,并持续24h,而非磷酸化型JNK蛋白表达无显著变化。结论VES是JNK的激活因子,JNK信号通路的激活在VES诱导肿瘤细胞凋亡的过程中发挥重要作用。

散发性大肠管状腺瘤癌变过程中NGX6 ILK和c-Jun的表达及意义

目的:探讨NGX6、ILK和c-Jun在散发性大肠管状腺瘤癌变过程中的可能作用。方法:采用免疫组化法检测22例异型增生性畸变隐窝灶(ACF)、68例大肠管状腺瘤伴上皮不同程度异型增生、21例大肠管状腺瘤癌变和21例正常对照中NGX6、ILK和c-Jun的表达情况结果:NGX6蛋白在正常对照、异型增生性ACF、大肠管状腺瘤伴上皮异型增生及大肠管状腺瘤癌变组中阳性表达率逐步降低,而ILK蛋白和c-Jun蛋白的阳性表达率则明显升高(P<0.05)异型增生性ACF、大肠管状腺瘤伴上皮轻、中、重度异型增生组中NGX6蛋白的阳性表达率分别为77.27%、70.83%、37.50%、35.00%,其中,大肠管状腺瘤伴上皮中、重度异型增生组中NGX6蛋白的阳性表达率明显低于异型增生性ACF及腺瘤伴上皮轻度异型增生组(P<0.05)。异型增生性ACF、大肠管状腺瘤伴上皮轻、中度异型增生组中ILK蛋白的阳性表达率明显低于腺瘤伴上皮重度异型组(P<0.05);C-Jun蛋白阳性表达率在大肠管状腺瘤伴上皮轻、中、重度异型增生和大肠管状腺瘤癌变组明显高于异型增生性ACF(P<0.05)。在大肠管状腺瘤癌变过程中NGX6和ILK间呈负相关(r=-0.455,P<0.05);NGX6和c-Jun间呈负相关(r=-0.417,P<0.05);ILK和c-Jun之间呈正相关(r=0.390,P<0.05)。结论:NGX6低表达可能与ILK及c-Jun高表达有关,这可能在散发性大肠管状腺瘤形成及癌变过程中发挥一定作用。

急性缺血性脑卒中患者血清Endocan、JKAP水平变化及与神经功能缺损和近期预后的关系

目的探讨急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清内皮细胞特异性分子(Endocan),Jun N-末端激酶途径相关磷酸酶(JKAP)水平变化及其与神经功能缺损和近期预后的关系。方法选取2020年1月至2022年1月神经内科住院部收治的192例新诊断AIS患者(AIS组)和50例健康志愿者(对照组),根据NHISS评分将AIS患者分为轻症组(NIHSS评分<6分,n=52)、中症组(6分≤NIHSS评分<14分,n=85)和重症组(NIHSS评分≥14分,n=55)。所有受试者入组后采用酶联免疫吸附试验检测血清Endocan,JKAP水平,比较不同神经缺损程度患者血清Endocan,JKAP水平差异。出院后90 d采用改良Rankin量表(mRS)评估神经预后,收集临床资料,分析影响AIS患者近期预后的因素以及Endocan,JKAP预测AIS患者近期预后的价值。结果AIS组血清Endocan水平高于对照组(P<0.05),JKAP水平低于对照组(P<0.05)。重症组血清Endocan水平高于中、轻症组(P<0.05),JKAP水平低于中、轻症组(P<0.05)。神经预后不良48例,预后良好144例,多因素Logistic回归分析结果显示高NIHSS评分,高水平Endocan是AIS预后不良的危险因素(P<0.05),高水平JKAP是保护因素(P<0.05)。Endocan,JKAP预测AIS患者近期预后的曲线下面积分别为0.773、0.742,联合Endocan,JKAP预测AIS患者近期预后的曲线下面积为0.914,高于单独Endocan,JKAP预测(P<0.05)。结论AIS患者血清Endocan水平增高,JKAP水平下降,且与神经缺损程度加重以及不良预后的发生有关,检测Endocan和JKAP可预测AIS患者预后不良风险。

急性缺血性卒中患者血清JKAP表达的临床意义及与Th1/Th2细胞因子表达的相关性分析

目的探讨急性缺血性卒中(AIS)患者血清Jun N-末端激酶通路相关磷酸酶(JKAP)表达与辅助性T细胞(Th)1/Th2细胞因子和神经缺损、神经预后的关系。方法选择2019年2月至2021年6月该院神经内科收治的175例AIS患者(AIS组)和103例体检健康者(对照组),根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将患者分为轻度组(<6分,51例)、中度组(6~<13分,68例)、重度组(≥13分,56例)。实时定量聚合酶链式反应检测血清JKAP表达,酶联免疫吸附试验检测血清Th1/Th2细胞因子[白细胞介素(IL)-4、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)],Pearson分析JKAP与Th1/Th2细胞因子之间的相关性。AIS患者出院90 d后采用改良Rankin量表(mRS)评估神经预后,多因素Logistic回归分析AIS预后不良的因素。结果AIS组血清JKAP表达、IL-4、IL-6、IL-10水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),IL-2、TNF-α、IFN-γ、IFN-γ/IL-4水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。重度组血清JKAP表达、IL-4、IL-6、IL-10水平低于中度组和轻度组(P<0.05),且中度组低于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05),IL-2、TNF-α、IFN-γ、IFN-γ/IL-4水平高于中度组和轻度组,差异有统计学意义(P<0.05),且中度组高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05)。AIS患者血清JKAP表达与IL-4、IL-6、IL-10呈正相关(P<0.05),与IL-2、TNF-α、IFN-γ、IFN-γ/IL-4呈负相关(P<0.05)。175例患者中失访3例,预后不良45例,预后良好127例,预后不良组血清JKAP表达、IL-4、IL-6、IL-10水平低于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05),IL-2、TNF-α、IFN-γ、IFN-γ/IL-4高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。高NIHSS评分、高IFN-γ/IL-4是AIS预后不良的危险因素(P<0.05),高JKAP是保护因素(P<0.05)。结论AIS患者血清JKAP表达降低,且与神经缺损加重、高IFN-γ/IL-4以及神经预后不良有关,是AIS患者神经预后不良的危险因素。

黄芪注射液抑制缺氧缺糖/复氧复糖大鼠海马神经元JNK3 mRNA的表达

目的:观察黄芪注射液对缺氧缺糖/复氧复糖大鼠海马神经元凋亡相关基因c-Jun氨基末端激酶3(JNK3)mRNA表达的影响。方法:取原代培养8 d的大鼠海马神经元,随机分为4组:正常对照组、黄芪注射液原液对照组、缺氧缺糖/复氧复糖组和黄芪注射液组。其中缺氧缺糖/复氧复糖组、黄芪注射液组及黄芪注射液原液对照组进行缺糖缺氧0.5 h再复氧复糖,并于复氧复糖后0 h、0.5 h、2 h、6 h、24 h、72 h和120 h采用原位杂交和RT-PCR方法检测海马神经元JNK3 mRNA的表达。结果:正常对照组大鼠海马神经元核膜完整,细胞突起明显,有少许细胞胞浆黄染;缺氧缺糖/复氧复糖组大鼠海马神经元胞核体积增大、突起回缩,大量细胞胞浆黄染,胞核内有黄色颗粒,海马JNK3 mRNA阳性神经元数目在各个时点均比正常对照组明显增多(P<0.05);黄芪注射液原液对照组神经元形态变化和海马JNK3 mRNA阳性神经元数目均与缺氧缺糖/复氧复糖组相一致(P>0.05);黄芪注射液组大鼠海马神经元有轻微核皱缩,可见部分神经元胞浆黄染,除120 h时点之外,海马JNK mRNA阳性神经元数目在各个时点均比缺氧缺糖/复氧复糖组明显减少(P<0.05)。缺氧缺糖/复氧复糖组在0 h、0.5 h、2 h、6 h、24 h、72 h和120 h海马神经元JNK3 mRNA平均灰度值均较正常对照组明显增加(P<0.05);与缺氧缺糖/复氧复糖组相比,黄芪注射液原液对照组各时点JNK3 mRNA的平均灰度值无明显变化(P>0.05),而黄芪注射液组除120 h之外在各个时点JNK3mRNA的平均灰度值均明显降低(P<0.05)。结论:黄芪注射液可抑制缺氧缺糖/复氧复糖大鼠海马神经元凋亡相关基因JNK3 mRNA表达,从而抑制缺氧缺糖/复氧复糖大鼠海马神经元的凋亡。

姜黄素通过抑制内质网应激和JNK通路过度活化减轻小鼠肺缺血再灌注损伤

目的:探讨姜黄素(curcumin,Cur)是否通过抑制内质网应激和c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路过度活化来减轻小鼠肺缺血再灌注(I/R)损伤。方法:采用C57BL/6J小鼠左侧肺原位I/R损伤模型。实验随机分为6组(每组10只),包括假手术组(sham组)、I/R组、DMSO组(I/R+DMSO组)和Cur组(I/R+Cur低、中、高剂量组)。实验结束后处死小鼠,留取左肺,检测肺湿干重比(W/D)和总肺水含量(TLW);光镜、电镜观察肺组织形态结构变化,并进行肺组织损伤评估(IQA);RT-PCR检测JNK和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的mRNA表达;West-ern blotting检测磷酸化JNK(p-JNK)和GRP78的蛋白表达;原位缺口末端标记法(TUNEL法)检测肺细胞凋亡指数(AI)。结果:与sham组相比,I/R组和DMSO组W/D、TLW、IQA及AI均明显升高(P<0.01),JNK、GRP78 mRNA和p-JNK、GRP78蛋白表达量上升(P<0.01),光镜、电镜均显示肺组织结构出现明显损伤性变化。I/R组与DMSO组相比,上述各指标无显著差异(P>0.05)。与I/R组和DMSO组相比,I/R+Cur低、中、高剂量组各组GRP78mRNA和蛋白表达量无明显变化(P>0.05),W/D、TLW、IQA及AI下降(P<0.05或P<0.01)且肺组织损伤减轻,JNK mRNA和p-JNK蛋白质表达量亦下降,以I/R+Cur高剂量组下降最为明显(P<0.01)。结论:缺血/再灌注引发肺组织细胞发生过度的内质网应激,损伤肺组织。Cur能减轻肺缺血/再灌注损伤,其机制可能与抑制JNK信号通路的过度活化有关。