Junctophilin2蛋白介导的心衰细胞钙致钙释放耦联的基础结构变化分析

心衰是威胁人类生命的重大疾病之一。在心衰的细胞中,钙致钙释放"脱耦联",病人最终因泵血能力不足而死亡。尽管上述过程在细胞水平已有很多研究。

Junctophilin 2功能异常与心脏疾病的研究进展

耦联膜复合物(Junctional membrane complexes,JMCs)是20世纪50年代中期首先在肌细胞中发现的[1]。JMCs存在于所有可兴奋细胞质膜(plasma membrane,PM)和内质网/肌浆网(endoplasmic/sarcoplasmic reticulum,ER/SR)之间,是实现PM与ER/SR间信号交互的一种特殊亚细胞结构域。Junctophilin(JP, JPH)蛋白是2000年[2]由日本东京大学Takeshima研究小组发现并鉴定的,JPH蛋白是参与耦联膜复合物(JMCs)形成和维持的关键性结构蛋白家族。目前已发现该蛋白家族包括JPH1、JPH2、JPH3和JPH4四种亚型,它们分别分布于不同组织中,JPH1和JPH2主要存在于骨骼肌细胞、心肌细胞及平滑肌细胞,而JPH3和JPH4主要存在于中枢神经系统。Junctophilin 2(JPH2)在心脏中广泛表达,是心肌细胞内参与耦联膜复合物JMCs形成和维持的关键结构蛋白。当JPH2出现基因突变、表达下调以及内部空间分布紊乱等功能异常时,可导致一系列的心脏疾病。

心肌细胞横管系统与钙离子稳态相关性的研究进展

心脏缺血缺氧导致的T管重构是引起胞内Ca^(2+)紊乱的重要机制。主要就T管系统以及桥接整合因子1 (BIN1)、2型junctophilin蛋白(JP-2)、窖蛋白-3(caveolin-3)等T管重构相关蛋白对心肌细胞Ca^(2+)调节的研究进展进行综述。

JP2敲减抑制H9c2心肌细胞Caveolin-1膜蛋白的表达

目的 探讨JP2敲减对H9c2心肌细胞Caveolin-1表达的影响.方法 构建靶向大鼠JP2基因的siRNA重组腺病毒载体(Ad-JP2-siRNA)和对照腺病毒载体(Ad-NC-siRNA),分别感染H9c2细胞.Real-Time PCR检测各组细胞JP2 mRNA水平,Western blotting结合表面生物素检测JP2蛋白和Caveolin-1总蛋白及膜蛋白的表达,免疫细胞化学检测Caveolin-1在H9c2细胞中的亚细胞定位.结果 与control组相比,转染Ad-JP2-siRNA 48 h后H9c2细胞中JP2 mRNA(1.000±0.000 vs 0.2939±0.0796,P<0.05)及蛋白(0.806±0.144 vs 0.233±0.101,P<0.05)的表达水平显著下降.Caveolin-1总蛋白表达水平无显著改变(1.797±0.082 vs 1.157±0.134,P>0.05),膜蛋白表达显著降低(1.156±0.132 vs 0.196±0.059,P<0.05).Caveolin-1主要分布于H9c2细胞膜,与转染Ad-JP2-siRNA细胞比较,Caveolin-1的膜分布明显减弱.结论 敲减JP2抑制H9c2细胞Caveolin-1蛋白表达.