胰腺癌反义K-ras癌基因片段的分离和克隆

目的:分离及克隆胰腺癌基因组中K-ras基因片段,构建重组反义K-ras癌基因逆转录病毒载体,并探讨其意义。方法:设计2对PCR引物,分别在上下游引物中引进BamHⅠ和EcoRⅠ位点,以胰腺癌细胞株BxPC-3基因组DNA为模板扩增K-ras基因外显子1及侧翼序列,并采用重组DNA技术将目的基因插入逆转录病毒载体LZRSpBMN-Z中,并经菌液PCR和限制性内切酸酶切鉴定。结果:K-ras基因外显子1及侧翼序列已成功地克隆入LZRSpBMN-Z中。结论:LZRSpBMN-Z是胰腺癌反义基因治疗中新型候选载体之一。应用PCR方法获取反义K-ras目的基因外显子1方便可行,可用于重组反义K-ras癌基因逆转录病毒载体的构建。

子宫内膜良恶性组织中K-ras癌基因的表达

目的:探讨Kras癌基因在子宫内膜良恶性组织中的表达及与子宫内膜癌发生、发展的关系。方法:采用抗生物蛋白链菌素标记(LSAB)法检测33例子宫内膜癌、31例子宫内膜非典型增生、39例子宫内膜单纯型增生及31例正常子宫内膜标本中Kras癌基因的表达。结果:Kras癌基因在正常子宫内膜、单纯型增生、非典型增生及子宫内膜癌中的阳性表达率分别为35.48%、35.90%、41.94%、69.70%,其阳性表达率随着病变程度的加重而升高(r=0.2853,P<0.05),正常子宫内膜及单纯型增生与非典型增生及子宫内膜癌之间差异有统计学意义(P<0.05)。低分化子宫内膜癌中Kras癌基因阳性表达率明显高于中高分化者,Ⅱ、Ⅲ期子宫内膜癌中Kras癌基因阳性表达率明显高于Ⅰ期(P均<0.05)。Kras癌基因阳性表达率与其年龄及绝经情况无关。结论:Kras癌基因在子宫内膜癌发生、发展中起重要的作用,Kras癌基因的检测对于子宫内膜癌早期诊断、估计预后有一定的意义。