SLE、RA患者血清k、λ轻链、k／λratio测定的实验分析

本文对２８例ＳＬＥ，１２例ＢＡ患者的免疫球蛋白、轻链组成中的Ｋ、λ含量及Ｋ／λ比率及补体、ＡＮＡ、ｄｓＤＮＡ等项目进行了检测分析。结果，ＳＬＥ和ＲＡ患者自身抗体的阳性检出率各不相同，低补体血症在ＳＬＥ患者中占６３，１６％，而在ＲＡ患者中却不明显，高λ血症的检出率分别为６４．２９％，８３．３３％。其Ｋ、λ轻链的增加分别为８２．１４％、１００％，且轻链的增加明显高于重链的增加。值得注意的是，ＳＬＥ和ＲＡ患者间均有一共同的特点，即λ型轻链的异常增高较Ｋ型轻链活跃。在这二类患者中由于λ轻链增高的比例大于Ｋ链，从而导致了Ｋ／λｒａｔｉｏ的下降（正常人为２．０２，ＳＬＥ为１．３９９，ＲＡ为１．５１）。此结果尚未见国内外学者报道。

抗结肠癌单抗k轻链基因克隆和序列分析

由于杂交瘤技术的局限性,使得目前临床应用的单克隆抗体大都来源于鼠类,在进行体内诊断和治疗时,易引起人体对异源蛋白的免疫排斥反应。而人源单克隆抗体,尽管经过了十年的努力,至今尚未取得重大突破。随着分子生物学的飞速发展,抗体生物工程的出现,给解抗体的免疫原性和大规模生产等问题提供了必要的技术途径。近年来这方面的研究十分活并取得了长足的发展。

血清中游离K、λ轻链水平测定

目的 :为了评价结缔组织性皮肤病患者血清中免疫球蛋白游离K、λ轻链水平测定的临床意义。方法 :速率散射比浊法进行检测。结果 :4 3例结缔组织性皮肤病患者血清中K、λ轻链水平测定均值分别是 17.99g/L、10 .35g/L ;4 0位健康对照组血清中K、λ轻链水平测定均值分别是 9.95g/L、5 .35g/L。两者比较P <0 .0 1,有显著性差异。k/λ比例下降。结论 :检测结缔组织性皮肤病患者血清中K、λ轻链的水平、K/λ比例下降 ,有助于该组疾病的早期诊断、早期治疗 ;有助于该组疾病病期的诊断和疗效观察。

免疫速率散射比浊法测定血清k／λ轻链比值诊断多发性骨髓瘤探讨

目的探讨免疫速率散射比浊法测定血清k/λ比值及观察其在多发性骨髓瘤的临床价值。方法以25例多发性骨髓瘤、28例良性M蛋白病及120例健康人为研究对象，采用Immage特定蛋白仪测定血清k/λ比值并分析三组检测结果的差异。结果以k/λ>2．4为阳性判断标准，有0．8％正常人为阳性，k/λ型良性M蛋白病阳性检出率分别是23．1％和26．7％，k/λ型多发性骨髓瘤阳性检出率分别是92.3％和100％。结论应用免疫速率散射比浊法采用Immage特定蛋白仪测定k/λ轻链的灵敏度和稳定性均较高，k/λ比值预测多发性骨髓瘤具有较高的准确性。

扩增鼠源性mAb和人源性抗体κ轻链基因中引物的作用

目的比较扩增鼠源性mAb和人源性抗体Vκ基因中引物的作用。方法从5株抗HFRS病毒鼠源性mAb杂交瘤细胞系和人PBL中提取细胞总RNA。逆转录后,用不同的引物进行PCR扩增,克隆后测定核苷酸序列并比较不同引物的作用。结果5株mAb杂交瘤细胞的Vκ基因及人源性抗体的Vκ基因,需采用不同的引物组合才可得到。结论5'端引物在PCR扩增抗体Vκ基因中起重要作用。

核转录因子NF-kB与危重症的关系

NF—kB最初是由Sen和Baltimore等于1986年在B淋巴细胞提取物中检测到的一种核蛋白．它能与免疫球蛋白K轻链基因的增强kB序列（5’-GGGACTTTCC-3’）特异结合，并能促进K链基因表达，故命名为核转录因子kB。进一步研究表明，NF—kB是一种重要的核转录因子．由一个复杂的体系组成．它不仅存在于B细胞中。而且也存在于T细胞、胸腺细胞、树突状细胞、巨噬细胞等多种细胞中。可与多种细胞因子、粘附分子等基因启动子或增强子kB位点特异结合，启动和调节这些基因的转录，在机体免疫应答、炎性反应和细胞生长、发育、调控等方面发挥重要作用。近年来，研究发现NF—kB在危重症的发生、发展过程中起着重要作用，成为危重症治疗的新靶点。

112例淋巴结病变免疫球蛋白轻链限制性的检测

目的:比较原位杂交技术(Insuithybridization,ISH)和免疫组织化学方法(Immunohischemical,IHC)检测B细胞性淋巴瘤(B-celllymphoma)和反应性增生病变(Reactivehyperplasia,RH)中免疫球蛋白轻链限制性的灵敏度和精确度。方法:收集112例淋巴结病变[B-celllymphom(an=62)和RH(n=50)],用ISH和IHC法检测免疫球蛋白轻链κ、λ的限制性。结果:ISH法,62例B细胞性淋巴瘤轻链有限制性45例(72.58%),50例淋巴结反应性增生病变没有限制性表达。IHC法,62例淋巴瘤有轻链限制性29例(46.77%),50例反应性增生病例6例有限制性表达(12%)。统计检验两种方法检测的结果显示表达有显著性差异(χ2=8.9338,P<0.05)两种方法差异有显著性。结论:在诊断与鉴别诊断B细胞性淋巴瘤和反应性增生病变中,用ISH法检测轻链κ、λmRNA的基因序列,比用IHC法检测免疫球蛋白轻链蛋白κ、λ限制性更灵敏和精确。

29例轻链型多发性骨髓瘤鉴定与结果分析

为提高轻链型多发性骨髓瘤的检出率和敏感性 ,从多发性骨髓瘤 ( MM)标本中收集了确诊的 2 9例轻链型多发性骨髓瘤标本 (其中 k型 10例 ,λ型 19例 ) ,通过具体实验做该种病例的血清蛋白电泳、免疫球蛋白定量 ,k、λ定量及尿本周氏蛋白 ( k、λ)定性及定量、k/λ比值 ,蛋白电泳、免疫固定电泳 ,并结合骨髓浆细胞百分比及形态做出实验诊断。结果显示 ,血。

抗结肠癌单抗κ轻链基因的克隆和序列分析

小鼠抗结肠癌单抗ＣＬ－３经体内、外研究证实它对结肠癌细胞具有很高的特异性。为了使该单抗能够应用于肿瘤导向治疗，我们采用基因工程技术，从ＣＬ－３杂交瘤细胞系中克隆出了ＣＬ－３单抗κ轻链基因，并对该基因的全部核苷酸序列进行了测定。

抗结肠癌抗体重链可变区和κ轻链基因的克隆

目的：从一株抗结肠癌细胞系ＬＳ１７４Ｔ的单抗细胞株ＣＬ－４中克隆出抗结肠癌抗体重链可变区和κ轻链基因。方法：用一步法提取总ＲＮＡ，逆转录形成ｃＤＮＡ，设计并合成一套扩增小鼠抗体重链可变区和完整κ轻链的通用引物，通过ＰＣＲ扩增基因，分别克隆入ｐＵＣ１９，作核苷酸序列分析。结果：用重链引物扩增获得长约３６０ｂｐ的片段；用轻链引物扩增获得约６４０ｂｐ的片段，序列测定获得它们的ＤＮＡ序列。结论：克隆的重链可变区基因长度为３６０ｂｐ，属于小鼠重链可变区Ｉ（Ｂ）亚族；κ轻链长度为６４２ｂｐ，其中可变区为３２１ｂｐ，属于小鼠κ轻链Ⅴ亚族。

NF-kappaB信号通路与牙周炎关系的研究进展

NF-kappaB是一种多向性真核细胞转录因子。最早Sen[1,2]等人于1986年在成熟的B淋巴细胞和浆细胞核提取物中发现,是一种与免疫球蛋白k轻链基因内含增强子的特异序列相结合的核蛋白因子,可促进k链基因表达,故又被称为NF-kappaB。

Capn4通过黏着斑激酶磷酸化激活核转录因子-κB信号调控人肾癌细胞增殖

目的探讨钙蛋白酶小亚基1（Capn4）的表达对肾透明细胞癌（ccRCC）增殖、迁移、侵袭的影响及其分子作用机制。方法选取Capn4高表达ccRCC细胞株786-0和低表达的Caki-1细胞株，采用慢病毒转染技术构建Capn4稳定低表达的786-0细胞株（786-0-shCapn4）和稳定过表达Capn4的Caki-1细胞株（Caki-1-Capn4），通过荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）验证Capn4在转染肾细胞癌（RCC）细胞株中的表达。通过细胞增殖实验、划痕实验及Transwell实验观察Capn4对肾癌细胞增殖、侵袭迁移能力的影响。通过Westernblot法验证黏着斑激酶（FAK）、磷酸化FAK、核转录因子-κB（NF-κB）和磷酸化NF-κB的表达。结果细胞计数试剂盒（CCK-8）结果显示，Capn4过表达后细胞增殖能力过表达组高于对照组（P=0．010），而转染Capn4短发卡RNA（shRNA）后细胞增殖能力下调组低于对照组（P=0．010）；划痕实验结果表明，24hCakil-Capn4细胞的迁移距离过表达组高于对照组（P=0．001），786-O-shCapn4细胞的迁移距离下调组低于对照组（P=0．001）；Transwell结果表明，24hCakil-Capn4细胞的侵袭细胞数量过表达组高于对照组（P=0．001），786-0-shCapn4细胞的迁移距离下调组低于对照组（P=0．001）；Westernblot结果显示：Cakil-Capn4组FAK及NF-κB磷酸化水平较各自对照组上调（P=0．010），而786-0-shCapn4组FAK及NF-κB磷酸化水平较各自对照组下调（P=0．010）；FAK特异性抑制剂（PF573228）或者NF-κB抑制剂QNZ均可抑制由Capn4过表达引起的癌细胞生长速度的增加。结论Capn4通过激活FAK和下游信号通路，从而激活NF-κB，进而促进RCC细胞生长。

中枢神经系统浸润多发性骨髓瘤一例并文献复习

目的探讨中枢神经系统（CNS）浸润的多发性骨髓瘤（MM）的临床特征、诊断及效果。方法报道1例CNS浸润的MM，并对其发病机制、临床特点、诊断、治疗等进行文献复习。结果CNS浸润的MM发病率低，MM一旦出现CNS浸润其临床特点无明显特异性，诊断有赖于病理活组织检查，无标准治疗方案。结论发生CNS浸润的MM发病率低，预后不良。

肉桂多酚对大鼠骨关节炎软骨细胞的保护作用

目的探讨肉桂多酚( cinnamon polyphenols, CP)对白介素-1β( IL-1β)诱导的大鼠骨关节炎软骨细胞凋亡、炎症及氧化应激的影响及机制.方法原代培养大鼠软骨细胞;分对照组、模型组和IL-1β+CP (5, 10, 20 μg/ml)组;检测细胞凋亡率、炎性因子表达、氧化应激因子含量、核因子活化B细胞轻链增强子(NF-κB) p65入核和相关蛋白表达水平.结果与模型组相比, CP降低软骨细胞凋亡率及Caspase-3、 Caspase-9表达(P<0. 01);减少IL-6、 iNOS,增加IL-10 含量(P<0. 01);增加SOD、 GSH,降低MDA、 LDH表达(P<0. 01);降低NF-B p65入核量、磷酸化及TNF-α表达水平(P<0. 01).结论CP能降低IL-1β诱导的大鼠骨关节炎软骨细胞凋亡、炎症和氧化应激,与抑制NF-kB p65信号通路有关。