彗星电泳法和K-SDS法检测甲醛和H_2O_2对人脐静脉内皮细胞DNA的损伤

背景与目的:研究甲醛、H2O2以及两者共同作用对人脐静脉内皮细胞DNA的损伤。材料与方法:①应用彗星电泳法于荧光显微镜下观察人脐静脉内皮细胞经甲醛、H2O2、甲醛和H2O2不同浓度(0、5、10、25、50、100 μmol/L)作用20 min或25 μmol/L浓度作用不同时间(0、10、20、30 min)后的DNA损伤情况;②用K-SDS法检测甲醛、甲醛和H2O2不同浓度(0、10、50、100、500、1 000、2 000 μmol／L)或50 μmol／L、100 μmol／L浓度不同时间(0、0.5、1、1.5、2、4 h)引起的DNA-蛋白质的交联效应。结果:①彗星电泳结果:内皮细胞与不同浓度甲醛孵育20 min,5、10、25 μmol／L甲醛所致DNA损伤以断裂为主且与阴性对照有统计学意义(P<0.05);与等摩尔H2O2共同孵育时,5、10、25μmol／L浓度组均可使单独H2O2作用时的彗星尾距增加,50、100 μmol／L使单独H2O2作用时的彗星尾距减小;25μmol／L甲醛作用不同时间,尾距随时间增加而增大(P<0.05)。②交联结果:内皮细胞与不同浓度甲醛孵育1.5 h后,引起DNA-蛋白质交联(DPC)形成明显增高(P<0.05);与等摩尔H2O2共同孵育时除1 h组(P<0.05),其余各组与阴性对照无统计学差异;50 μmol／l的甲醛作用不同时间,2 h组与阴性对照有统计意义(P<0.05);100 μmol／L的甲醛、甲醛与H2O2作用不同时间,各?