目的:探讨Sirtinol联合K-ras基因RNA干扰对胰腺癌PANC-1细胞增殖和凋亡的影响.方法:用50μmol/m L的Sirtinol和50 nmol K-ras si RNA处理胰腺癌PANC-1细胞48 h,分为C组(无加药处理),K组(加K-ras si RNA处理),S组(加Sirtinol处理),(K+S)...目的:探讨Sirtinol联合K-ras基因RNA干扰对胰腺癌PANC-1细胞增殖和凋亡的影响.方法:用50μmol/m L的Sirtinol和50 nmol K-ras si RNA处理胰腺癌PANC-1细胞48 h,分为C组(无加药处理),K组(加K-ras si RNA处理),S组(加Sirtinol处理),(K+S)组(加K-ras si RNA和Sirtinol处理);Western blot检测SIRT1蛋白的表达情况,Q-PCR检测K-ras m RNA水平和周期蛋白Cyclin D1 m RNA水平,MTT检测细胞的增殖活力,流式细胞仪检测细胞的凋亡情况.结果:Western blot结果显示相对于C组和K组,S组和(K+S)组中的SIRT1蛋白的表达明显下降;Q-PCR结果显示K组和(K+S)组中的K-ras m RNA水平分别是C组的0.454±0.037、0.413±0.032倍,差异具有统计意义;MTT结果显示C组、K组、S组和(K+S)组的A值分别是0.814±0.025、0.634±0.038、0.613±0.036、0.401±0.019,相对于C组,K组、S组和(K+S)组的A值明显下降,其中(K+S)组最明显;Q-PCR结果显示K组、S组和(K+S)组中的Cyclin D1 m RNA水平分别是C组的0.693倍±0.046倍、0.634倍±0.032倍、0.400倍±0.034倍,差异具有统计学意义,其中(K+S)组下降最明显;流式细胞仪显示C组、K组、S组和(K+S)组的凋亡率分别是4.29%±0.246%、7.4 6 9%±0.4 5 7%、8.2 0 6%±0.4 9 0%、12.272%±0.675%,相对于C组,K组、S组和(K+S)组的凋亡率明显上升,其中(K+S)组最明显.结论:Sirtinol联合K-ras si RNA可以更明显的抑制胰腺癌PANC-1细胞的增殖和促进其凋亡.展开更多
目的研究中药复方桃红四物汤(Tao Hong Si Wu decoction,THSWD)治疗大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)的表达,并确定THSWD治疗MCAO大鼠可能的分子机制。方法从对照...目的研究中药复方桃红四物汤(Tao Hong Si Wu decoction,THSWD)治疗大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)的表达,并确定THSWD治疗MCAO大鼠可能的分子机制。方法从对照组、MCAO组和MCAO+THSWD组各获得3个大脑半球组织。采用RNA测序技术鉴定三组中的lncRNA基因表达。鉴定了THSWD调节的lncRNA基因,然后构建了THSWD调节的lncRNA-mRNA网络。通过MCODE插件鉴定lncRNA-mRNA网络的模块。基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书数据库(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)用于分析富集的生物功能和信号通路。鉴定了THSWD调节的lncRNA的顺式和反式调控基因。采用逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)验证lncRNA。分子对接用于验证lncRNA-mRNA网络靶点和通路相关蛋白结合能力。结果在MCAO大鼠中,THSWD共调节了302个lncRNA。生物信息学分析表明,一些核心lncRNA可能在THSWD治疗MCAO大鼠中发挥重要作用,此外,我们进一步发现THSWD可能也通过lncRNA-mRNA网络以及网络富集的补体和凝血级联反应等多通路治疗MCAO大鼠。分子对接结果表明,THSWD活性化合物没食子酸和苦杏仁苷与蛋白质靶点具有一定的结合能力。结论THSWD可以通过调节lncRNA保护MCAO大鼠脑损伤,为THSWD治疗缺血性中风提供了新见解。展开更多
文摘目的:探讨Sirtinol联合K-ras基因RNA干扰对胰腺癌PANC-1细胞增殖和凋亡的影响.方法:用50μmol/m L的Sirtinol和50 nmol K-ras si RNA处理胰腺癌PANC-1细胞48 h,分为C组(无加药处理),K组(加K-ras si RNA处理),S组(加Sirtinol处理),(K+S)组(加K-ras si RNA和Sirtinol处理);Western blot检测SIRT1蛋白的表达情况,Q-PCR检测K-ras m RNA水平和周期蛋白Cyclin D1 m RNA水平,MTT检测细胞的增殖活力,流式细胞仪检测细胞的凋亡情况.结果:Western blot结果显示相对于C组和K组,S组和(K+S)组中的SIRT1蛋白的表达明显下降;Q-PCR结果显示K组和(K+S)组中的K-ras m RNA水平分别是C组的0.454±0.037、0.413±0.032倍,差异具有统计意义;MTT结果显示C组、K组、S组和(K+S)组的A值分别是0.814±0.025、0.634±0.038、0.613±0.036、0.401±0.019,相对于C组,K组、S组和(K+S)组的A值明显下降,其中(K+S)组最明显;Q-PCR结果显示K组、S组和(K+S)组中的Cyclin D1 m RNA水平分别是C组的0.693倍±0.046倍、0.634倍±0.032倍、0.400倍±0.034倍,差异具有统计学意义,其中(K+S)组下降最明显;流式细胞仪显示C组、K组、S组和(K+S)组的凋亡率分别是4.29%±0.246%、7.4 6 9%±0.4 5 7%、8.2 0 6%±0.4 9 0%、12.272%±0.675%,相对于C组,K组、S组和(K+S)组的凋亡率明显上升,其中(K+S)组最明显.结论:Sirtinol联合K-ras si RNA可以更明显的抑制胰腺癌PANC-1细胞的增殖和促进其凋亡.
文摘目的研究中药复方桃红四物汤(Tao Hong Si Wu decoction,THSWD)治疗大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)的表达,并确定THSWD治疗MCAO大鼠可能的分子机制。方法从对照组、MCAO组和MCAO+THSWD组各获得3个大脑半球组织。采用RNA测序技术鉴定三组中的lncRNA基因表达。鉴定了THSWD调节的lncRNA基因,然后构建了THSWD调节的lncRNA-mRNA网络。通过MCODE插件鉴定lncRNA-mRNA网络的模块。基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书数据库(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)用于分析富集的生物功能和信号通路。鉴定了THSWD调节的lncRNA的顺式和反式调控基因。采用逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)验证lncRNA。分子对接用于验证lncRNA-mRNA网络靶点和通路相关蛋白结合能力。结果在MCAO大鼠中,THSWD共调节了302个lncRNA。生物信息学分析表明,一些核心lncRNA可能在THSWD治疗MCAO大鼠中发挥重要作用,此外,我们进一步发现THSWD可能也通过lncRNA-mRNA网络以及网络富集的补体和凝血级联反应等多通路治疗MCAO大鼠。分子对接结果表明,THSWD活性化合物没食子酸和苦杏仁苷与蛋白质靶点具有一定的结合能力。结论THSWD可以通过调节lncRNA保护MCAO大鼠脑损伤,为THSWD治疗缺血性中风提供了新见解。
