K-ras基因突变与胃癌组织病理特征及预后的相关性分析

目的 探讨与分析K-ras基因突变与胃癌组织病理特征及预后的相关性。方法 选取100例胃癌患者作为胃癌组,选择同期在本院体检的健康人群100例作为对照组,检测所有对象的外周血K-ras基因突变情况。调查胃癌患者的组织病理特征,随访患者的预后并进行相关性分析。结果 胃癌组的K-ras基因突变率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。在胃癌组中,不同胃癌组织病理特征(病灶直径、组织学分化、临床分期、淋巴结转移)患者的K-ras基因突变率对比差异均有统计学意义(P<0.05)。胃癌患者平均随访时间(35.59±1.19)月,其中死亡18例,死亡患者的K-ras基因突变率显著高于生存患者,差异有统计学意义(P<0.05)。在胃癌组中,Spearman分析显示K-ras基因突变率与病灶直径、组织学分化、临床分期、淋巴结转移、预后死亡等存在正相关性(P<0.05)。结论 胃癌患者多伴随有血清K-ras基因突变,与患者的临床病理特征与预后死亡存在相关性,K-ras基因突变具有重要的临床应用价值。

人恶性胸膜间皮瘤组织中K-ras基因点突变的研究

目的:探究云南省大姚县青石棉污染区恶性胸膜间皮瘤(MPM)患者组织K-ras基因点突变。方法:应用聚合酶链式反应(PCR)-单链构象多态性分析和PCR-DNA测序技术联合检测59例MPM患者和13例非MPM患者胸膜间皮组织中K-ras基因密码子12、13和61的点突变情况。结果:59例MPM患者和13例非MPM患者胸膜间皮组织中均没有发生K-ras基因点突变,K-ras基因点突变的检出率为0.0%。结论:云南省大姚县青石棉污染区MPM患者组织K-ras基因突变型的比例较低,提示K-ras原癌基因点突变在此地区MPM的诱导发生中并不发挥关键作用。

胰腺癌正反义K-ras基因片段的分离和定向克隆

目的 分离及克隆胰腺癌基因组中 K- ras基因片段 ,构建重组正反义 K- ras基因逆转录病毒载体并探讨其临床意义。方法 设计两对 PCR引物 ,分别在上下游引物中引进 Bam H1和 Eco R1位点 ,以胰腺癌细胞基因组 DNA为模板扩增 K- ras基因外显子 4 B及侧翼序列 ,并采用重组 DNA技术将目的基因分别定向插入逆转录病毒载体 L ZRSp BMN- Z中。重组克隆通过菌液 PCR和重组质粒限制性内切酶酶切鉴定。结果 正反义 K- ras基因外显子 4 B及侧翼序列成功地克隆入 L ZRSp BMN- Z中。结论 L ZRSp BMN- Z是胰腺癌反义基因治疗中新型候选载体之一。应用 PCR方法获取反义 K- ras基因方便可行 ,可用于重组反义 K- ras基因逆转录病毒载体的构建。

结直肠癌中K-ras基因突变的检测及其临床病理学意义

目的 K-ras基因在结直肠癌发生、发展中均有重要作用。K-ras野生型的患者对西妥昔单抗(Cetuximab,C225)敏感,而突变型者不敏感。文中探讨结直肠癌中K-ras基因突变情况及其临床病理学意义。方法从结直肠癌石蜡标本中提取基因组DNA,采用焦磷酸测序(pyrosequencing)法检测67例结直肠癌中K-ras基因的突变情况。结果 K-ras基因突变率为38.8%(26/67),发现6种突变类型,即第12密码子(GGT→GAT、GGT→GTT、GGT→TGT、GGT→AGT、GGT→GCT)突变和第13密码子(GGC→GAC)突变。K-ras基因突变57.7%发生在第12密码子的第2位碱基,最多见突变类型为(GGT→GAT)。女性患者K-ras基因突变率(57.7%)高于男性患者(26.8%),差异有统计学意义(P<0.05)。有淋巴结转移组K-ras基因突变率(58.8%)高于无淋巴结转移组(32.0%),差异有统计学意义(P<0.05)。K-ras基因突变与患者年龄、肿瘤位置、浸润深度、组织学类型及Dukes'分期无显著相关性(P>0.05)。结论焦磷酸测序可用于K-ras基因突变的快速检测;K-ras基因突变在女性结直肠癌患者及有淋巴结转移的患者中多见,可望成为判断结直肠癌预后的重要指标。

k-ras基因在中国结直肠癌患者中的突变状态

目的:评价中国结直肠癌患者中k-ras基因突变状态及其与临床病理参数的关系.方法:收集2008-01/2009-12在中国人民解放军南京军区福州总医院手术切除的临床资料完整的结直肠癌石蜡包埋组织280例,分别应用实时荧光定量PCR和直接测序法检测结直肠癌中k-ras基因外显子2中第12、13编码子上最常见的7种突变类型,即第12编码子的35G>A、35G>T、35G>C、34G>A、34G>T、34G>C及第13编码子的38G>A,同时将两种检测结果进行比对分析.结果:(1)经直接基因测序,确认在280例结直肠癌中,k-ras基因测序阳性(基因突变型)94例,阳性率33.57%(94/280),其中第12编码子的35G>A、35G>T、35G>C、34G>A、34G>T及34G>C的突变率分别为14.64%(41/280)、4.29%(12/280)、0.36%(1/280)、2.86%(8/280)、3.57%(10/280)、0.36%(1/280),第13编码子的38G>A的突变率为7.5%(21/280);(2)94例k-ras基因测序阳性(基因突变型)病例中,实时荧光定量PCR阳性91例[灵敏度96.8%(91/94)],阴性3例;186例基因测序阴性(野生型)中,实时荧光定量PCR阴性184例[特异性98.9%(184/186)],阳性2例;实时荧光定量PCR法与直接基因测序法符合率为98.2%[(91+184)/280];(3)k-ras基因突变与患者性别、年龄相关(均P<0.05),而与肿瘤部位、分化程度、浸润深度、TNM分期、淋巴结转移及远处转移无相关性(均P>0.05).结论:(1)中国结直肠癌患者中存在较大比例的k-ras基因突变(33.57%),在临床选取表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂和抗EGFR单抗靶向药物治疗结直肠癌患者之前均应常规检测k-ras基因突变状态,从而为靶向治疗提供可靠的参考依据;(2)实时荧光定量PCR检测结果与基因测序检测结果高度一致,实时荧光定量PCR能够准确、快速、简便的检测出结直肠癌k-ras基因突变位点,可用于结直肠癌k-ras基因突变的检测;(3)k-ras基因突变与结直肠癌的生物学行为无明显相关性,但在≥60岁的女性人群中k-ras基因突变率较高.

K-ras基因突变通过调节E-cadherin/β-catenin/p120蛋白复合体形成和RhoA蛋白活性对结肠癌细胞株Caco-2转移的影响

目的观察K-ras基因突变通过调节E-cadherin/β-catenin/p120蛋白复合体形成和RhoA蛋白活性对结肠癌细胞株Caco-2转移的影响,探讨其促进结肠癌转移的相关机制。方法将培养的结肠癌细胞株Caco-2分别给予空白质粒phr-GFP转染(对照组)、K-ras基因突变型质粒phr-K-ras(Val12)转染(转染组)、phr-K-ras(Val12)质粒转染+丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径特异性抑制剂PD98059处理(MAPK抑制组)和phr-K-ras(Val12)质粒转染+磷脂酰肌醇3激酶(PI-3K)途径特异性抑制剂LY294002处理(PI-3K抑制组),Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移率,细胞免疫荧光检测E-cadherin、β-catenin蛋白表达及其在细胞内定位,Western blot检测细胞内p120蛋白的表达,免疫沉淀检测与E-cadherin结合的β-catenin蛋白水平,Pull-down实验检测RhoA蛋白活性。结果转染组Caco-2细胞的迁移率为(19.8±5.6)%,明显高于对照组的(14.0±4.2)%(P=0.001)和MAPK抑制组的(15.8±1.2)%(P=0.044),但与PI-3K抑制组的(17.5±2.8)%差异无统计学意义(P=0.095)。细胞免疫荧光检测结果显示,转染组细胞膜上的E-cadherin和β-catenin蛋白表达减少。Western blot检测结果显示,转染组和PI-3K抑制组细胞内p120总蛋白表达减少。免疫沉淀检测结果显示,转染组和PI-3K抑制组细胞内与E-cadhenn结合的β-catenin蛋白水平下降。Pulldown实验检测结果显示,转染组细胞内的RhoA蛋白活性增加。结论K-ras基因突变可以促进结肠癌细胞株Caco-2的转移,其可能是通过MAPK途径减少E-cadherin/β-catenin/p120蛋白复合体形成,增强RhoA蛋白活性来实现的。

XELOX和OLF化疗方案治疗K-ras基因突变型老年晚期大肠癌的疗效分析

目的比较分析K-ras基因突变型老年晚期大肠癌患者接受奥沙利铂联合卡培他滨(XELOX)和奥沙利铂联合氟尿嘧啶(OLF)化疗方案的疗效。方法分析2009年1月-2012年8月该院收治的经基因分析确诊为K-ras基因突变型晚期大肠癌病例,共106例。其中接受XELOX化疗者56例,接受OLF化疗者50例,并比较分析两组接受化疗后发生毒副反应、客观缓解率、疾病控制率、无进展生存期、总生存期的差异。结果O LF组骨髓抑制、恶心呕吐、静脉炎、心脏毒性的发生率高于XELO X组,而腹泻的发生率XELO X组要明显高于OLF组,在口腔炎及神经毒性的发生率上,两组差异无统计学意义。两组客观缓解率、疾病控制率、无进展生存期和总生存期差异无统计学意义。结论 XELOX治疗K-ras基因突变型老年晚期结肠癌具一定疗效,相对安全,可提高患者的生存质量。

胃粘膜肠化生组织中p53、APC、K-ras基因突变的研究

目的:探讨p53、APC及K-ras基因突变在不同类型肠化生癌变中的作用。方法:用PCR-SSCP及PCR-RFLP技术检测了47例肠化生组织中p53基因5-8外显子及APC基因15-6外星子、K-ras基因第12位点突变。结果:47例杨化生组织中p53突变14例，占29.8％，APC及K-ras基因突变各3例，分别占68％。场化生中Ⅰ、Ⅱ型肺化33例，Ⅲ型肠化14例（其中3例与Ⅱ型历化并存），Ⅲ型历化中p53突变率为57.1％（8／14），显著高于Ⅰ、Ⅱ型场化（18.2％，6／33，P＜0.05），而APC，K-ras基因在Ⅲ型肠化中的突变率（均为14.3％）虽也高于Ⅰ、Ⅱ型肠化（均为3.0％），但统计学检验无显著意义（P＞0.05）。1例Ⅲ型场化同时检出p53及K-ras突变.结论:不同类型历化生共分子改变机制有所不同，p53基因与Ⅲ型场化生的发生及癌变可能密切相关，并可能成为胃癌早期诊断的分子标志。

应用肽核酸钳制PCR技术检测胰腺癌K-ras基因突变

目的:应用肽核酸钳制PCR技术检测胰腺癌K-ras基因突变,探讨其诊断价值。方法:结合特异性肽核酸(针对野生型序列)与实时定量PCR技术建立一步K-ras基因检测法,与传统限制性片段长度多态性PCR法检测结果进行比较,评价新方法的诊断价值。结果:肽核酸钳制PCR法可同时对胰腺癌标本中K-ras基因的第12、13密码子突变情况进行检测,操作简便;可在105倍的野生型K-ras基因背景下检测出突变,灵敏度为0.001%,可检测突变基因最低限为102拷贝;该方法可同时进行较大规模的样品检测,单次检测时间仅需1h。而传统方法可检测的突变基因最低限为103拷贝,检测灵敏度为0.01%;需花费约2d完成同样数量的样本检测。结论:肽核酸钳制实时定量PCR法较限制性片段长度多态性PCR法有明显优势,适用于胰腺癌大规模临床样本的K-ras基因突变检测,可作为胰腺癌筛查的有效手段。

含奥沙利铂方案与FOLFIRI方案一线化疗对K-ras基因不同状态晚期大肠癌患者的疗效及预后影响比较

目的探究含奥沙利铂方案与FOLFIRI方案对Ⅳ期结直肠癌化疗疗效及预后影响的差别与K-ras基因状态的关系。方法收集2010年1月至2012年1月的118例接受含奥沙利铂方案或FOLFIRI方案化疗的Ⅳ期结直肠癌患者临床资料,统计患者的治疗有效率(ORR)、疾病控制率(DCR)、无进展生存时间(PFS)和总生存期(OS)。采用χ2检验比较各组临床因素差别和两种治疗方案的有效率及疾病控制率,采用Kaplan-Meier法比较无进展生存时间以及总生存期。结果 118例患者中,接受含奥沙利铂方案化疗的K-ras突变型患者PFS及OS较接受FOLFIRI方案化疗患者延长(P=0.048;P=0.037),ORR及DCR较接受FOLFIRI方案化疗患者无明显差别(P=0.961;P=0.931)。接受含奥沙利铂方案化疗的K-ras野生型患者ORR、DCR、PFS及OS较接受FOLFIRI方案化疗患者无明显差别(P=0.900;P=0.802;P=0.738;P=0.904)。结论采用含奥沙利铂方案一线化疗较FOLFIRI方案对K-ras突变型Ⅳ期结直肠癌患者更有优势,而对于K-ras野生型Ⅳ期结直肠癌患者,含奥沙利铂方案与FOLFIRI方案疗效及预后情况相当。

毛细管电泳-单链构象多态性分析检测K-ras基因突变

K ras癌基因的点突变在结直肠癌的发生起重要作用。以异丙醇为聚合反应链转移剂,水相法合成 特性粘度为0.70×10-3m3/kg,分子量为6.5×104的低粘度短链线性聚丙烯酰胺。以6%线性聚丙烯酰胺为 筛分介质,分离温度27℃,分离电压9kV为电泳条件,建立了检测K ras基因突变的毛细管电泳 单链构象多 态性方法。利用该方法检测36例结直肠癌患者肿瘤组织,发现12例K ras基因突变。结果表明:该方法具有 快速、高灵敏的优点,为大规模进行结直肠肿瘤的早期诊断提供了可靠方法。

结直肠癌组织中K-ras基因突变情况及其临床意义

目的观察K-ras基因在结直肠癌组织中的突变情况,为临床开展结直肠癌个体化治疗提供依据。方法收集156份结直肠癌组织手术标本作为观察组,20份正常肠黏膜标本作为对照组。提取组织DNA,采用实时荧光定量PCR法检测K-ras基因突变情况。分析K-ras基因突变率及第12、13位密码子突变与结直肠癌患者临床病理特征的关系。结果对照组未检测出K-ras基因突变,观察组K-ras基因突变率为40.4%(63/156),两组基因突变率比较,P<0.05。K-ras基因突变率与结直肠癌患者性别、肿瘤部位、分化程度、病理分期、淋巴结转移及远处转移无关(P均>0.05),与年龄有关(P<0.05)。观察组K-ras基因第12、13位密码子突变率分别为76.2%(48/63)和27.0%(17/63),二者比较P<0.05。观察组K-ras基因第12、13位密码子突变与结直肠癌患者肿瘤分化程度相关(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤部位、病理分期、淋巴结转移及远处转移无关(P均>0.05)。结论结直肠癌组织中K-ras基因突变率为40.4%,第12位密码子(GGT^GAT)突变是最常见类型。检测K-ras基因突变情况有助于指导临床开展结直肠癌个体化治疗。

结直肠癌BRAF和K-ras基因状态及其病理意义

目的观察结直肠癌BRAF和K-ras基因突变状态,探讨两者间的关系及其与临床病理特征的相关性。方法应用PCR扩增、DNA直接测序法检测210例结直肠癌组织中BRAF基因15外显子600密码子和K-ras基因12、13、61密码子突变,分析其与临床病理特征的相关性。结果 K-ras基因突变72例,突变率为34.3%。12密码子突变59例,突变率为28.1%,其中GGT→GAT(G12A)突变17例,突变率为8.1%;GGT→GCT(G12A)突变2例,突变率为0.91%;GGT→GTT(G12V)突变16例,突变率为7.62%;GGT→TGT(G12C)突变8例,突变率为3.8%;GGT→AGT(G12S)突变16例,突变率为7.62%。13密码子GGC→GAC(G13A)突变13例,突变率为6.2%。在肝转移和淋巴结转移阳性组中,K-ras基因突变率分别为54.1%(20/37)和50.6%(39/77),明显高于无肝转移和无淋巴结转移组30.1%(52/173)和24.8%(33/133),差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ+Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期患者K-ras基因突变率分为19.1%(20/105)、50.9%(29/57)、47.9%(23/48),随着患者TNM分期增高,K-ras基因突变率显著升高,Ⅲ期患者当中K-ras基因突变率最高,显著高于Ⅰ期患者,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。BRAF基因突变4例,突变率仅为1.9%。4例均为K-ras基因野生型。结论 K-ras基因突变是结直肠癌的常见事件,K-ras基因突变与淋巴结转移、肝转移以及肿瘤进展相关;BRAF基因突变在结直肠癌中很少见,联合检测BRAF和K-ras基因对指导患者治疗有重要意义。

癌性胸腔积液K-ras基因突变检测及临床应用

目的：探讨Ｋ－ｒａｓ 基因突变检测用于癌性胸腔积液的诊断价值。方法：采用ＰＣＲ－ ＳＳＣＰ技术对５８ 例癌性及３０ 例结核性胸腔积液进行Ｋ－ｒａｓ 基因突变分析。结果：结核性胸液未发现突变，癌性胸液有１７ 例突变阳性，突变率２９－３ ％ ，其中腺癌所致胸腔积液突变率为３４－１％ （１４／２１），鳞癌１６－７ ％（２／１２）。１７ 例Ｋ－ｒａｓ 基因突变阳性的胸液中，１４ 例为肉眼血性，明显高于非血性胸液组，Ｐ＜ ０－０５。１８ 例未找到原发病灶的胸液中４４－４％ Ｋ－ ｒａｓ 基因突变阳性。４９ 例患者随访１０ 个月，Ｋ－ｒａｓ 基因突变阳性者死亡率高达８０－０ ％ ，而无Ｋ－ｒａｓ 基因突变者死亡率明显降低，为２６－５ ％ ，Ｐ＜ ０－０５ 。结论：Ｋ－ｒａｓ 基因突变检测是诊断癌性胸腔积液的又一有效手段，在某些情况下显示出特有的优势，并且对预后的判断有一定价值。

痰P16基因甲基化及K-ras基因突变联合检测对周围型肺癌的诊断价值

目的探讨痰脱落细胞P16基因甲基化及K-ras基因突变联合检测对周围型肺癌的诊断价值。方法选择49例周围型肺结节患者的痰液及术后病理标本作为研究对象,同时以15例正常人作为对照组,应用甲基化特异性PC R(m ethylation-specific PC R,M SP)和PC R-测序法检测其P16基因甲基化及K-ras基因突变情况。结果痰脱落细胞及肿瘤标本P16 M SP阳性率分别为51.2%(21/41)和58.5%(24/41),两者比较差异无统计学意义(χ2=0.4432,P>0.05),但明显高于良性肺结节及正常人(χ2分别为4.056、6.513及5.677,P<0.05);痰脱落细胞及肿瘤标本K-ras基因突变率为17.1%(7/41)和22.0%(9/41),两者比较差异无统计学意义(χ2=0.0038,P>0.05),而良性肺结节及正常人痰脱落细胞和肿瘤标本未检测到K-ras基因突变。如果以痰脱落细胞P16M SP阳性和K-ras基因突变分别作为筛选肺癌的标准,则对周围型肺癌诊断的敏感度和阴性预测值P16 M SP阳性为51.2%和25.9%,K-ras基因突变为17.1%和19.0%;而P16 M SP阳性及K-ras基因突变联合检测对肺癌的敏感度和阴性预测值分别上升为61.0%和30.4%。结论痰脱落细胞P16基因甲基化及K-ras基因突变联合检测可以提高周围型肺癌的诊断效率,对周围型肺癌的诊断具有一定价值。

结直肠癌中K-ras基因突变研究

目的研究K-ras基因突变表达与结直肠癌的相关性。方法采用实时荧光定量PCR方法检测89例患者结直肠癌组织中K-ras基因2号外显子12与13编码子突变情况,并结合病理资料进行分析。结果 89例患者结直肠癌组织中K-ras基因突变者为37例,突变率为41.6%。其中12编码子突变为29例,突变率为32.6%。13编码子突变为8例,突变率为9.0%。K-ras基因突变与肿瘤位置、分化程度无明显相关性(P>0.05),与浸润深度、淋巴结转移、肝转移有相关性(P<0.05)。淋巴结转移越多K-ras基因突变率越高,有肝转移者K-ras基因突变率高。结论 K-ras基因突变在结直肠癌的发生、发展中起重要作用,与浸润深度、淋巴结转移和肝转移密切相关。

干扰素诱导蛋白16在结直肠癌中的表达及其与K-ras基因突变的相关性研究

背景与目的:结直肠腺瘤-癌序列是目前公认的结直肠癌演变过程,该过程伴随一系列基因突变及蛋白的异常表达和积累。本研究旨在探讨结直肠癌发生、发展过程中干扰素诱导蛋白16(interferon induced 16,IFI16)表达及其与K-ras基因突变之间的相关性。方法:收集云南省第一人民医院病理科2008—2009年门诊及手术的结直肠正常黏膜组织、腺瘤和腺癌各发展阶段标本,应用免疫组化SP法检测IFI16表达情况;应用PCR-RFLP法对结直肠癌标本K-ras基因12密码子进行检测,并与IFI16进行相关性分析。结果:IFI16在结直肠腺癌与腺瘤、腺瘤与正常结直肠黏膜组织中蛋白表达差异均有统计学意义(49.2%vs 25%,P<0.05;25%vs 0%,P<0.05)。结直肠癌患者K-ras基因突变率为38.3%;K-ras基因变异与IFI16表达无相关性(55.2%vs 44.4%,P>0.05),但与IFI16异位表达差异有统计学意义(13.8%vs 72.2%,P<0.05),两者之间呈显著相关(r=0.635,P<0.01)。结论:IFI16参与了结直肠癌的发生、发展过程,K-ras基因突变与IFI16异位在结直肠癌的发生、发展过程中起重要作用。

肺癌患者组织和痰液中p53基因、K-ras基因突变

目的 探讨p53、K ras基因在肺癌患者癌组织及相应痰液中改变情况及其联合检测在肺癌早期诊断中的价值。方法 对 59例肺癌组织和 14例肺部良性组织及相应痰液 ,应用PCR SSCP 银染法检测了p53基因第 5～ 8外显子突变情况 ;应用PCR RFLP法对K ras基因突变进行了检测。结果 p53基因在肺癌组织中突变率为 37 3% ,K ras基因在肺腺癌突变率为 4 8 0 % ,其它类型肺癌突变率仅为 8 8%。相应痰液中两基因突变率分别为 33 8%和 4 4 0 % ,与组织中的突变率无明显差异 ,P <0 0 1。良性组织及相应痰液中两基因均无突变。吸烟患者的突变率 (4 8 7% ,6 8 5% )明显高于非吸烟患者的突变率 (15 0 % ,11 1% ) ,P <0 0 1;两基因的联合检测在肺癌的早期诊断中的价值 (54 2 % )明显优于单基因的检测 ,P <0 0 5。结论 痰液和组织中的基因突变率基本相似 ,即痰液中脱落细胞的分子遗传学改变能反映肺组织情况。因此以痰液为目标多基因的联合检测可能有助于肺癌的诊断。

p53和k-ras基因突变在大肠癌发病中的作用

目的 :探讨 p5 3和 k- ras基因突变在大肠癌中的临床意义。方法 :采用 PCR- SSCP方法检测 64例大肠癌患者癌组织及癌旁正常粘膜组织的 p5 3和 k- ras基因。结果 :64例大肠癌患者中发生 p5 3基因突变 2 8例 ( 4 3.8% ) ,发生 k- ras基因突变 2 6例 ( 4 0 .6% ) ,出现 p5 3和 kras基因协同突变 1 1例 ( 1 7.2 % )。p5 3和 k- ras基因突变与病人性别、肿块部位、大小、浸润深度及 Dukes分期无关 ;k- ras基因突变组年龄略高于非突变组 ;p5 3或 k- ras基因单一突变组易出现淋巴结转移 ,但无统计学意义 ;p5 3和 k- ras基因协同突变组淋巴结转移率 ( 1 0 /1 1、90 .9% )明显高于两者均无突变组( 7/2 1、33.3% ,P<0 .0 5 )。结论 :p5 3和 k- ras基因协同突变可能直接或间接促进了大肠癌的进一步发展。