X荧光光谱法测定K13钢中镍铬钨钛铝

能量色散型 X 荧光光谱分析(EDXRF)是七十年代以后发展起来的一种新型的光谱分析方法,其分析特点是快速、无损、检测范围广。我所重新冶炼的 K13高温合金钢是能源、交通工业所需要的重要材料,其中镍铬钨钛铝的浓度均在1%以上(镍34%～38%,铬14%～16%,钨4%～7%,钛3%～4%,铝1.5%～2.0%)。本文在用 EDXRF

HHV-8 K13基因编码蛋白在人血管内皮细胞和前列腺癌细胞系中的表达及其对细胞增殖影响的初探

目的:研究人类疱疹病毒8型(HHV-8)K13(v-FLIP)基因编码蛋白分别在人血管内皮细胞和前列腺癌细胞中的表达及其对上述两种细胞增殖能力的影响。方法:将PEF-K13-Flag-IRES/Puro重组质粒瞬时转染人血管内皮细胞系EA.HY926细胞和前列腺癌细胞系PC-3细胞,采用Western blot方法检测K13基因编码蛋白表达情况;分别运用流式细胞术和MTT方法检测K13基因编码蛋白对这两种细胞增殖的影响。结果:HHV-8 K13基因编码蛋白能够在人血管内皮细胞和前列腺癌细胞中表达,流式细胞分析和MTT结果显示,HHV-8 K13基因编码蛋白对上述两种细胞的增殖均有明显的抑制作用(P<0.05)。结论:HHV-8 K13基因编码蛋白可以明显抑制人血管内皮细胞和前列腺癌细胞的增殖。

放线菌K13最适培养条件及其对草莓灰霉病菌的抑制作用

为实现对草莓灰霉病的生态防控,利用对峙培养法,从土壤中分离得到1株对草莓灰霉病菌具有强拮抗活性的放线菌K13,该菌对多种植物病原菌生长具有抑制作用。K13菌株产生抗菌物质的最佳条件为:在初始p H值8.0的高氏一号培养液中,28℃下持续振荡培养6 d。K13能显著抑制草莓灰霉病菌菌丝的生长,采用菌落直径法测定抑制率为55.93%;其还能够抑制草莓灰霉病菌产孢、孢子萌发和芽管伸长,培养滤液2倍稀释时抑制率分别可达72.53%、65.43%和59.83%。显微观察显示,该拮抗放线菌可引起草莓灰霉病菌菌丝扭曲、畸形、断裂,甚至解离。以上结果表明,放线菌K13对草莓灰霉病菌的生长发育具有较强的抑制作用,可用于生防菌剂的研发。

高温合金K13渗硼及应用

炼油设备中要求耐高温、耐磨损、耐腐蚀的零件,常采用高温合金并进行渗硼处理。高温合金有GH130、GH132和K13等,其中K13应用最多。本文就K13合金的渗硼及其应用情况介绍如下。

K13兼容通用且经济的多功能绝缘系统

K-13是一种定制的喷涂式绝缘系统,可以满足用户特定项目对隔热(R值)、降噪(NRC)、色彩、耐用、冷凝控制、质地、美学等功能或性质的需要。文章对该系统进行介绍。

关于K13型碴石车车门修整的建议

K13型碴石车辆在铁路工务养护中频繁的运用,但在运用中由于车门木质结构容易出现车门脱落的现象,为防止此类现象的发生,从个人角度出发,建议对K13型车车门在修整时采取措施来加固。

既有K13NK型石砟漏斗车换装高摩闸瓦组合式制动梁改造

分析了目前在铁路线上运营的装用低摩闸瓦的既有K13NK型石砟漏斗车进行换装高摩闸瓦组合式制动梁改造的意义，对改造总体要求、改造方案及改造内容进行了阐述和探讨，并介绍该改造方案在试改样车上得到了验证，表明了该改造方案完全合理，且经济可行。

K13型矿石底漏斗车制造工艺研究

通过对K13型矿石底漏斗车结构进行分析,找出制造工艺难点,并制定相应的应对措施。

玉柴YC6K13N气体发动机

搭载广西玉柴机器集团有限公司13L气体发动机的联合卡车K金版重卡首批产品下线。

恶性疟原虫青蒿素抗性相关k13基因及其C-末端功能域的克隆及表达

目的探索在大肠埃希菌中表达恶性疟原虫青蒿素抗性相关基因k13及其C-末端propeller结构域,为后续蛋白结构分析及青蒿素抗性机制等功能研究奠定基础。方法以恶性疟原虫基因组DNA为模板、PCR扩增k13及其C-末端基因片段并分别克隆至pET-28a载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-dthiogalactoside,IPTG)诱导,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和Western blot检测重组蛋白的表达。再分别用恶性疟和间日疟患者血清进行重组蛋白rK13和rK13-propeller的Western blot检测。结果 PCR扩增得到全长k13基因和k13-propeller片段,并构建了重组质粒pET-28a-k13和pET-28a-k13-propeller。SDS-PAGE电泳和Western blot检测表明,两重组蛋白均表达,且重组蛋白rK13可与恶性疟患者血清反应,rK13-propeller既可与恶性疟又可与间日疟患者血清反应。结论利用原核表达系统成功表达重组蛋白rK13和rK13-propeller,两重组蛋白能够与疟疾患者血清反应,且与不同种疟疾的患者血清反应的特异性有所不同。

河南省输入性恶性疟原虫多药抗性基因1和K13基因的突变分析

目的对河南省2013-2015年输入性恶性疟原虫多药抗性基因1(Pfmdr1)和K13基因进行检测,分析其基因突变情况。方法采集河南省2013-2015年自非洲返乡的被确诊为输入性恶性疟患者的血样,并收集病例的相关信息。提取患者血样中疟原虫基因组DNA,巢式PCR扩增Pfmdr1和K13基因,对扩增序列进行测序、比对,分析基因的突变情况。结果386例输入性恶性疟患者以男性青壮年为主,自26个非洲国家返乡,其中病例数居前3位的输入来源国为安哥拉、赤道几内亚和尼日利亚,其病例数分别占总病例数的22.5%(87/386)、13.7%(53/386)和13.2%(51/386)。386份血样均成功扩增出Pfmdr1和K13基因。测序结果显示,Pfmdr1的86和1246位点的突变率分别为23.6%(91/386)和3.1%(12/386),K13基因的突变率为5.4%(21/386)。21份K13基因突变的血样来自于安哥拉、赤道几内亚和尼日利亚等10个国家,未发现C580Y突变。在来自安哥拉和赤道几内亚的血样中检测到2个与青蒿素抗性相关的突变,分别为R539T和P574L,突变率均为0.3%(1/386)。2013-2015年,Pfmdr1的86位点的突变率分别为28.8%(36/125)、23.4%(32/137)和18.6%(23/124),各年份突变率的差异有统计学意义(χ~2=6.438,P<0.05);1246位点突变率分别为4.0%(5/125)、3.7%(5/137)和1.6%(2/124),各年份突变率的差异无统计学意义(χ~2=1.384,P>0.05);K13基因的突变率分别为3.2%(4/125)、8.8%(12/137)和4.0%(5/124),各年份突变率的差异无统计学意义(χ~2=4.631,P>0.05)。结论Pfmdr1的86和1246位点的突变率分别为23.6%(91/386)和3.1%(12/386),K13基因的突变率为5.4%(21/386),发现了与青蒿素抗性相关的R539T和P574L位点突变。

GeXP系统在恶性疟耐青蒿素基因K13SNP检测中的应用

目的探讨GeXP系统在恶性疟耐青蒿素基因K13SNP检测中的应用价值。方法根据4种SNP的序列特征制备标准品质粒。收集2016-2018年出入境人群中检出的28例临床标本,利用GenBank下载4种SNP的核苷酸序列,利用GeXPexpressProfiler设计特异性引物,优化条件采用GeXP系统结合多重PCR检测对应SNP及28份临床标本。结果优化的引物能特异性检测4种K13SNP位点,无交叉反应,灵敏度为100%,特异性为99.81%,检测效能为99.15%,检出限为5×103copies/μl,应用于临床标本检测,结果与测序法的一致性为99.32%。结论GeXP方法检测恶性疟耐青蒿素基因4种K13SNP位点快速、准确可用于输入性恶性疟的检测。

NLRP3炎性小体激活对VCI海马组织凋亡及自噬的影响研究

目的 探究NOD样受体蛋白3 (NLRP3)炎性小体激活对血管性认知功能障碍(VCI)海马组织凋亡及自噬的影响。方法 SPF级SD大鼠采用四血管阻断法复制VCI模型构建,根据研究目的分为正常对照组、假手术组、模型组、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)组。分别在造模前、造模后、给药后进行Morris水迷宫实验;同时取海马组织进行苏木精-伊红染色、TUNEL细胞凋亡、qRT-PCR检测磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B (Akt)、mTOR、NLRP3的表达水平、Western blot检测凋亡蛋白表达水平。结果 大鼠迷宫实验鉴定结果显示,造模后迷宫逃逸时间显著大于造模前,给药后模型组迷宫逃逸时间显著高于mTOR组和假手术组,差异有统计学意义(P<0.05)。苏木精-伊红染色结果显示,空白对照组无明显病变、假手术组稍有水肿,模型组海马组织局部有坏死灶,mTOR组仅有水肿。TUNEL染色结果显示,模型组海马组织中细胞凋亡相比其他组相对多,假手术组和mTOR组组织中细胞凋亡不明显,但各组间比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。qRT-PCR结果显示,模型组Akt、mTOR、NLRP3表达水平与正常对照组相比均有上升趋势,PI3K有降低趋势,但差异均无统计学意义(P>0.05)。Western blot检测结果显示,p62、caspase-1、LC3-B、Bax蛋白在模型组与正常对照组、假手术组相比有上升趋势,与mTOR组相比有下降趋势;其中mTOR组LC3-B蛋白表达量与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论NLRP3可能通过调控降低PI3K、升高Akt和mTOR水平促进海马神经元的凋亡而导致VCI的发生。

非洲输入性卵形疟病例的疟原虫k13基因螺旋浆区序列多样性分析

目的为了解非洲输入性卵形疟原虫的二态性,对杭州市确诊的卵形疟病例感染疟原虫的k13基因多态性进行了分析。方法收集2014年2月—2021年6月杭州市诊断、报告的卵形疟现症病例血样22份,根据流行病学确认虫株感染地。提取疟原虫DNA,巢式PCR扩增、测序卵形疟原虫k13基因螺旋浆区206 aa~725 aa的编码区。测序序列与参比序列比对、整理获得cDNA序列,分析cDNA序列的单倍体类型和突变位点。结果卵形疟现症病例血样22份,90.9%(20/22)扩增到卵形疟原虫k13基因224 aa~725 aa编码区的DNA,测序、整理获得cDNA序列16条,存在3种单倍型,Curtisi单倍型、Wallikeri单倍型、突变型的占比分别为31.2%(5/16)、62.5%(10/16)和6.3%(1/16)。Curtisi型与Wallikeri型的序列之间存在c.711等38个碱基替换位点,突变型序列较之Wallikeri型,在c.1998位点出现T>A的同义突变。结论非洲输入杭州的卵形疟原虫以Wallikeri型为主,且突变型与Wallikeri型同源性更高。

中缅边境及泰国东南地区恶性疟原虫K13基因侧翼微卫星多态性研究

目的研究中缅边境拉咱地区和泰国东南Srisaket、Trat和Ranong等3个地区恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)K13基因侧翼微卫星的多态性。方法取前期经基因型研究的恶性疟原虫样品42份,其中中缅边境拉咱地区22份(K13基因R539T突变型和野生型各11份),泰国3个地区20份(K13基因R539T突变型9份和野生型11份),对上述样品K13基因上游31 900、6 360、150 bp和下游1 700、11 000、31 500 bp共6个位点的微卫星片段进行PCR扩增,PCR产物经毛细管电泳仪检测片段长度,并采用Bio Calculator软件进行数据分析,Gen ALEx软件计算等位基因频率和期望杂合度(He)。结果中缅边境拉咱地区和泰国3个地区恶性疟原虫虫株K13基因两侧的6个微卫星位点共检测到46个等位基因,在上游6 360 bp位点的等位基因长度分别集中在286和278 bp,等位基因频率为73%和67%。上游31 900 bp位点等位基因长度分别集中在211和205 bp,等位基因频率为55%和44%。上游150 bp及下游1 700 bp位点等位基因长度主要集中在195和209 bp,其他两个位点未出现集中分布的情况。中缅边境拉咱地区虫株的单倍体型为H1至H4型,泰国3个地区虫株除了2株H2单体型外,其余均为H5和H6型。42份样品的6个微卫星位点的平均He分别为0.49±0.23、0.42±0.33和0.72±0.12、0.67±0.11。R539T突变的虫株在毗邻K13基因的微卫星位点处He明显降低,在上游150 bp处分别为0.17和0,在下游1 700 bp处分别为0.3和0。结论中缅边境拉咱地区及泰国3个地区K13基因为R539T突变型的恶性疟原虫虫株均受到青蒿素选择压力,等位基因型在上游6 360和31 900 bp两个位点上具有明显的差异。

基于PI3K/AKT信号通路探讨PRDX4对食管鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:分析过氧化物还原酶4(peroxiredoxin4,PRDX4)对食管鳞状细胞癌(esophagealcarcinoma,ESCC)细胞增殖和凋亡能力的调控作用及相关蛋白表达。方法:结合UALCAN、GEPIA和TCGA数据库预测PRDX4在ESCC中的表达及与病理特征及预后的关系。选取2010年8月至2023年8月潍坊医学院附属医院行食管癌(esophagealcarcinoma,EC)根治术治疗的60例ESCC患者的癌组织及癌旁组织为研究样本,分析组织样本中的PRDX4的表达水平。通过实时荧光定量PCR和免疫印迹法分析ESCC细胞中PRDX4的mRNA和相关信号分子蛋白的表达水平;此外,结合CCK-8实验、流式细胞术实验分析PRDX4对细胞的增殖和凋亡活动的影响。最终将体外实验结果通过裸鼠皮下瘤模型进行验证。结果:GEPIA和UALCAN数据库的数据表明,PRDX4在ESCC中表达异常增高,且与病理分期、分级和患者的生存率等有关。对ESCC细胞系PRDX4进行敲低和过表达后,PRDX4、p-PI3K、p-AKT、Cyclin D1、Survivin蛋白表达分别表达降低和增高,细胞增殖和凋亡能力均受正相关调控;相较于sh-NC组、sh-PRDX4组裸鼠肿瘤的体积和质量降低。结论:PRDX4可基于P13K/AKT信号通路的激活对ESCC细胞的增殖和凋亡能力进行调控。

中缅边境地区恶性疟原虫K13基因的多态性分析

目的通过检测中缅边境地区恶性疟原虫Kelch 13螺旋体蛋白基因(Kelch 13-propeller, K13)突变的动态变化情况,为当地恶性疟治疗策略的制定提供科学依据。方法收集以往中缅边境地区中国云南省西双版纳州景洪市、缅甸克钦邦拉咱市和佤邦第二特区勐冒县恶性疟病例滤纸血标本175份,采用巢式PCR法扩增K13基因第426~676位点片段,对扩增产物测序并进行统计分析。结果 2001年西双版纳州景洪市30份滤纸血中仅1份检出恶性疟原虫K13基因F446I突变;2006年标本未检测到突变。缅甸拉咱市恶性疟原虫K13基因共检测到5种突变(F446I、C469Y、Y511H、E556D和P574L),其中以F446I突变为主,突变率由2001年的45%(9/20)降低至2012年的25%(10/40);勐冒县2009年标本中未检测到K13基因突变。结论中缅边境地区缅甸拉咱市恶性疟原虫K13基因存在较多类型的突变,以F446I突变为主,提示该地区恶性疟原虫可能存在青蒿素抗性,建议加强对中缅边境地区恶性疟原虫药物抗性监测。

卵形疟原虫非洲分离株K13基因的多态性分析

目的分析卵形疟原虫柯氏亚种(Plasmodium ovale curtisi)和沃氏亚种(P. ovale wallikeri)非洲分离株K13蛋白编码基因的多态性,为卵形疟原虫青蒿素抗性监测提供科学依据。方法收集江苏省2012-2016年卵形疟患者血样,经流行病学调查确认为非洲输入性卵形疟病例。提取血样DNA,通过实时荧光PCR探针法鉴别卵形疟原虫柯氏亚种和沃氏亚种。采用巢式PCR扩增K13基因的结构域并送测序,以卵形疟原虫柯氏亚种参考序列(PlasmoDB登录号:PocGH01_12019400)和沃氏亚种参考序列(GenBank登录号:LT594516.1)为模板,应用BioEdit软件对测序序列进行比对,应用DNAstar软件分析序列的突变情况,用DnaSP软件分析序列多态性,用MEGA软件构建系统进化树。结果 2012-2016年共收集168例卵形疟患者的血样,感染来源地为中非(95例)、南非(37例)、西非(34例)、东非(1例)和北非(1例);卵形疟原虫柯氏亚种和沃氏亚种各84例。168例血样K13基因巢式PCR均扩增获得1 500 bp的条带且均测序成功。卵形疟原虫K13基因核苷酸多样性指数π为0.000 02,单体型多样性指数Hd为0.024, 2个亚种K13基因分别含有2个单体型,分别发现1个单核苷酸多态性位点,各有1例样本检出卵形疟原虫核苷酸碱基突变,柯氏亚种在核苷酸717 bp (氨基酸239E)位点处存在A/G突变,沃氏亚种在核苷酸1998 bp (氨基酸666P)位点处存在T/A突变,均为同义突变,与卵形疟原虫青蒿素耐药性无关。本研究患者血样卵形疟原虫2个亚种K13基因序列中性检验统计结果无明显差异,符合中性进化模型。系统进化树显示,卵形疟原虫柯氏亚种2个单体型聚为一支,沃氏亚种2个单体型聚为另一支。结论卵形疟原虫非洲分离株柯氏亚种和沃氏亚种K13基因未发现非同义突变,其基因多态性水平较低,无青蒿素耐药性相关的基因突变。

白色海绵状斑痣患者角蛋白k4、k13基因突变

白色海绵状斑痣是一种罕见的常染色体显性遗传性疾病。目前研究表明,角蛋白K4、K13基因相关位点的突变是导致该病发生的原因,但具体的突变位点与突变方式尚在研究之中。本文对近几十年来报道的有关白色海绵状斑痣的研究进展、基因突变的位点与方式进行综述。

K13N型石碴漏斗车给风调整阀、操纵阀微机检测系统的设计与实现

本文介绍了石碴漏斗车给风调整阀、操纵阀的微机检测系统,通过系统原理分析,系统结构分析,以及系统软件的设计与实现,降低了车辆检修人员的劳动强度,为阀体的性能测试提供了一种高效率与高精度的测试手段。