KSHV K15P及其突变体的慢病毒包装与稳定细胞株的筛选及其对内皮细胞增殖迁移的影响

目的包装包含卡波肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)K15P及其突变体K15P(YF)基因的慢病毒颗粒,并对此基因在EA.hy926细胞内稳定表达进行研究。方法通过PCR方法扩增获得KSHV K15P、K15P(YF)基因片段,使用限制性内切酶Not I与BamH I酶切和TA克隆法构建T载体与慢病毒表达载体pHAGE-CMV-MCS-K15P-Puro、pHAGE-CMV-MCS-K15P(YF)-Puro,通过lip2000将构建好的慢病毒表达载体与两种辅助包装质粒PSPAX2和pMD2.g共转染HEK 293T细胞,48 h后收集慢病毒。慢病毒感染EA.hy926细胞并通过嘌呤霉素筛选稳定表达株,Western blot检测K15P与K15P(YF)蛋白的表达。Transwell与CCK8实验检测K15P对内皮细胞的增殖迁移影响。结果成功构建慢病毒表达载体,筛选出稳定表达K15P、K15P(YF)蛋白的EA.hy926细胞。在EA.hy926细胞Transwell迁移实验中,与空载体组和K15P突变体组(0.98±0.23)比较,K15P组(2.25±0.15)的EA.hy926细胞的迁移能力明显增强(P<0.01),三组细胞迁移量差异有统计学意义(F=113.5,P<0.01);CCK8增殖活性实验中,与空载体组和K15P(YF)组(109.23±12.58)比较,K15P组(138.69±7.47)的EA.hy926细胞的增殖能力明显增强(P<0.01),三组细胞增殖活性差异有统计学意义(F=40.78,P<0.01)。结论K15P蛋白增强了内皮细胞的增殖与迁移,而K15P(YF)突变体的促进细胞增殖迁移能力减弱,提示K15P蛋白可能在KS的发生发展中参与重要作用。

KSHV K15P慢病毒载体的构建及其滴度测定

目的构建含卡波肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)ORF K15P基因的慢病毒载体,并对其在293T细胞内的表达进行研究。方法 PCR法扩增获得KSHV K15P基因,限制性内切酶Nhe I酶切和无缝克隆法构建重组慢病毒载体p CDHCMV-K15P-GFP,通过脂质体转染试剂将重组慢病毒载体与3种辅助质粒p MDL-PRRE、pRSV-Rev和p MD2.g共转染HEK 293T细胞包装产生慢病毒,Western blot法检测K15P蛋白的表达。结果经酶切及测序鉴定,成功构建慢病毒载体,重组慢病毒质粒与辅助质粒共转染HEK 293T细胞可见有荧光表达,说明K15P基因在细胞内有表达并且96 h后产生4×106TU/ml滴度为慢病毒。结论成功构建了KSHV K15P慢病毒表达载体p CDH-CMV-K15P-GFP,获得高效表达K15P基因的慢病毒颗粒,为后续其在细胞内的功能研究奠定实验基础。

XSX-8树脂与K15颗粒炭脱色效果比较的研究

对于味精行业，精制脱色工序一般采用的脱色除铁原料总体分为三类，一是粉状活性炭，二是树脂，三是颗粒炭。一般粉状活性炭经过中和液一遍、二遍脱色，颗粒炭、树脂进行第三遍脱色、除铁。针对这三种脱色原料，粉状活性炭颗粒小、脱色吸附表面积大，吸附能力强，它对焦化、有机酸盐等形成的色素及溶性杂质较为有效，但是对硫酸盐、溶解性杂质几乎没有吸附作用。对于树脂，不同的型号除铁、脱色效果不同，112#或331#交换树脂脱色除铁可同时进行，但是强度差、易破碎流失，通用型号树脂耐磨能力差，消耗高、成本高，都可以再生使用。

KSHV K15蛋白多克隆抗体的制备及其初步鉴定

目的制备卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)K15蛋白多克隆抗体,并将其应用于细胞内K15蛋白的检测。方法选择K15基因第8个外显子(K15P_(ex8))序列做为模板,构建K15P_(ex8)的表达载体p QE-80L-K15P_(ex8)。诱导重组菌蛋白表达,免疫新西兰兔,制备抗K15P_(ex8)多克隆抗体,并用间接ELISA法测定抗体效价。将p FJ和p FJ-K15P两种重组质粒分别转入HEK 293T细胞,用Western blot法检测抗K15P_(ex8)多克隆抗体对K15P-Flag蛋白的识别。结果由K15P_(ex8)制备的抗K15P_(ex8)多克隆抗体效价大于1∶6 400,能特异性识别重组质粒p FJ-K15P转染293T细胞产生的K15P-Flag融合蛋白。结论初步证明K15P_(ex8)蛋白有免疫反应性,该多克隆抗体可用于重组的K15P-Flag融合蛋白的检测。

KSHV信号膜蛋白K15的致病机制

人类疱疹病毒-8(HHV-8)是卡波西肉瘤(KS)的致病因子,又被称为卡波西肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)。KSHV编码的信号膜蛋白K15通过与宿主细胞蛋白的相互作用激活多种细胞内信号通路,诱导血管生成和炎症反应。对K15蛋白的基本作用机制,包括其直接和间接介导的细胞信号通路的研究有助于深入了解K15蛋白在KS发病机制中的潜在作用,也对该病的靶向治疗有重要的参考价值。

HT300高强度K15缸体材料的试制

详细分析了影响HT300高强度K15缸体铁液质量的各种因素。对几种试验情况及试验结果进行了详细分析。认为通过减少生铁、增加废钢加入量可提高铸件性能;在较高碳、硅含量条件下生产高强度灰铸铁,须设法增加熔炼过程中的石墨晶核,加强孕育以达到均匀石墨、细化石墨、改善石墨形状从而提高铸件性能的目的;适当的合金化可进一步提高基体强度;延迟开箱时间使铸件在砂箱中缓慢冷却可以消除铸造应力,为生产优质铸件提供保证。

冶炼方法对高矫顽力合金X30K15M3T磁性和组织的影响

在本文工作中，对大气和氩气氛感应炉中冶炼的塑性变形高矫元力合金Ｘ３０Ｋ１５Ｍ３Ｔ的磁性和组织进行了比较。冶炼炉的原料采用Ｋ１级钴、Ｘ００级铬、ＢＴ１级钛、烧结钼及阿姆可铁。大气冶炼（炉次１）和氩气氛冶炼（炉次２）的每炉重量分别为２０和５ｋｇ。所得锭子...

正夫人电磁炉K15

特征：德国S．T．黑晶板，耐高温。

泰克最新推出K15协议测试平台和应用软件

泰克日前最新推出K15协议测试平台和应用软件,其具有实时第三代(3G)移动通信检修功能,可以自动配置检测参数,关联来自多个接口的数据,更迅速地定位故障根源。同时,可保持无可比拟的业务流到磁盘的告诉数据捕获速率(高达10Mbit/s)。 K15的多接口呼叫跟踪功能支持:通用移动通信系统(UMTS);码分多址(cdmaOne和cdma2000);通用分组无线服务(GPRS);

泰克为3G网络提供业界第一套整合视频测试——MTS4EA视频元素流（ES）分析仪同K152．1版的整合为H．324视频电话提供了视频质量分析应用方案

【2005年2月8日讯】比弗顿，俄勒冈州，全球领先的网络管理与诊断产品厂商泰克公司日前宣布其业界领先的无线网络监测平台K15的最新21版本将通过检测UMTS核心网络的IU—CS接口而具备分析H．324视频电话服务质量的能力。通过与泰克MTS4EA基础流分析仪共享视频文件，用户可以查看以及分析视频压缩数据从而完成更深入的视频质量分析。

韩国K15轻机枪

图为韩国陆军第22步兵师士兵正在使用新配发的K15轻机枪进行射击训练。2022年12月底,韩国枪械厂商SNT Motiv向韩国陆军交付了首批K15轻机枪。该枪是现役K3轻机枪的大幅升级版,性能指标基本趋同,重量上略有增加,但在射击精度、可靠性、人体工程学和操作便利性(比如增加的前握把、枪托和两脚架可自由调节)等方面得到了大幅提升。

Kaposi肉瘤组织内人类疱疹病毒8型的K15基因型研究

目的了解Kaposi肉瘤组织中人类疱疹病毒8型(HHV-8)K15等位基因型分布情况,并初步探讨Kaposi肉瘤不同临床分型及临床表现与不同HHV-8 K15等位基因型的相关性。方法采用酚-氯仿-异戊醇法对收集的27例Kaposi肉瘤石蜡包埋组织标本进行病毒DNA抽提,并使用巢式PCR扩增K15基因片段,然后测序并确定其等位基因型。结果27例Kaposi肉瘤中有22例HHV-8感染为阳性,阳性率为81.48%,其中4例艾滋病-Kaposi肉瘤患者HHV-8感染均为阳性,感染率100%;在分析的22例HHV-8病毒株中,20例为P型,2例为M型;4例艾滋病-Kaposi肉瘤患者感染的均为P型HHV- 8,2例M型感染者均为经典型Kaposi肉瘤患者。结论Kaposi肉瘤组织内HHV-8的K15等位基因型主要是P型,也存在部分M型HHV-8感染者。4例艾滋病-Kaposi肉瘤患者感染的HHV-8均为P型。

人类疱疹病毒8型K1和K15基因致病机制的研究进展

人类疱疹病毒8型K1和K15是HHV-8基因组所特有的基因,K1和K15基因结构的独特性决定了其在疾病的致病机制中发挥着一定的作用;近年来有关K1和K15基因致病机制的研究较多,本文结合近几年的文献将对K1和K15基因致病机制做一综述。

鳞状细胞癌组织中HHV-8 K15等位基因型研究

目的探讨皮肤鳞状细胞癌和食道鳞状细胞癌患者癌组织中人类疱疹病毒8型（HHV-8）K15等位基因型与肿瘤的发病关系。方法序列特异性引物-巢式PCR技术检测40例皮肤鳞状细胞癌、40例食道鳞状细胞癌石蜡包埋组织中HHV-8K15基因，并确定HHV-8K15等位基因型，运用x2检验对结果进行统计学分析。结果9例皮肤鳞状细胞癌（22．5％）石蜡包埋组织中检测到HHV-8K15P型，8例食道鳞状细胞癌（20％）石蜡包埋组织中检测到HHV-8K15P型，两种肿瘤均未检测出K15M基因型。HHV-8在皮肤鳞状细胞癌与食道鳞状细胞癌感染率组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论鳞状细胞癌中感染HHV-8K15P基因为K15P等位基因型，其发生发展可能与HHV-8的感染有-定的关系。

重庆市南岸区由ETEC O6:K15引起食物中毒的实验室检验和分析

目的快速准确的检出食物中毒的病原体,为食品药品监督部门处理食品安全事件、医疗部门开展临床治疗和疾病预防控制部门进行卫生学调查、处理提供科学依据。方法细菌鉴定采用VITEK 2全自动细菌鉴定仪,细菌分型采用血清学方法,药敏实验采用K-B法,噬菌体分型采用大肠埃希菌分型噬菌体。结果 3次食物中毒采集患者粪便,剩余食物共计22件:检出肠道产肠毒素大肠埃希菌(ETEC O6:K15)共9株,其中粪便检出7株,剩余食物检出2株;环丙沙星,头孢噻肟,头孢他啶,痢特灵,新霉素,多粘菌素敏感;复方新诺明,阿莫西林,氨苄西林,四环素,链霉素,甲氧苄胺嘧啶,红霉素,吡哌酸耐药。各次食物中毒检出ETEC O6:K15之间药敏结果存在差异,而每次食物中毒内部检出的ETEC O6:K15之间药敏结果几乎一致,抑菌环大小非常接近。经大肠埃希氏菌分型噬菌体测试,20130726株为14/12型,20130818株为12/10型,20140126株为14/10型。结论 3次食物中毒是由ETEC O6:K15引起,卫生部门应引起重视,大力开展食品中ETEC的风险监测并开展评估工作,提高此类病原菌的检验能力和开展从业人员健康教育工作,食品药品监督部门应大力加强食品卫生监督工作,预防此类食物中毒的发生。

印度“歼敌者”型潜艇和K15潜射导弹

2013年8月14日，印度海军“辛杜拉克沙克”号常规潜艇在南部港口城市孟买停泊时，因操作失误导致导弹爆炸，造成潜艇损毁沉没。这再次引起人们对印度大量武器由海外引进的关注。实际上印度早已意识到这一问题，很早就致力于自主装备的开发，其中“歼敌者”型弹道导弹核潜艇和其配备的K15潜射弹道导弹，就被印度认为是与中国对抗的“高品质”武器。那么，这些武器对我国会带来怎样的威胁呢？

基于ZigBee和NB-IoT融合网络的智慧农业大棚监控系统设计与实现

农业大棚已成为现代农业发展的重要方向,但对于大棚内农作物生长环境的监控大多还是采用人工的方式,传统的管理模式浪费大量的人力物力,智能化、信息化、数字化程度不高。基于ZigBee和NB-IoT技术构建了一套融合无线传感网络,以STC15F2K6032为核心处理单元,在大棚内部署各类传感器,实时采集各项环境参数,通过构建的网络传输至云平台。通过手机App和PC端实现大棚环境的可视化管理,通过手动和自动的方式实现对大棚环境的控制,为农作物的生长提供最佳环境。有效减少资源的浪费,提高农业生产效率,拓展了无线传感网和物联网技术在现代农业领域中的发展和应用。