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Embelin逆转K562/D细胞对柔红霉素耐药与P-gp及MDR1 mRNA无关
被引量:
3
1
作者
蒋卉男
刘卓刚
胡荣
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第5期1342-1349,共8页
目的:探讨XIAP抑制剂Embelin逆转K562/D细胞对柔红霉素(daunorubicin,DNR)耐药的机制以及与P-gp及MDR1 mRNA的关系。方法:应用MTT法检测不同浓度DNR及联合Embelin对K562及K562/D细胞增殖抑制情况的影响;应用Annexin V-FITC/PI复染流式...
目的:探讨XIAP抑制剂Embelin逆转K562/D细胞对柔红霉素(daunorubicin,DNR)耐药的机制以及与P-gp及MDR1 mRNA的关系。方法:应用MTT法检测不同浓度DNR及联合Embelin对K562及K562/D细胞增殖抑制情况的影响;应用Annexin V-FITC/PI复染流式细胞术检测细胞凋亡的改变;用Western blot方法检测XIAP、Caspase-3、P-gp、BCL-2及BAX的蛋白表达情况;用RT-PCR检测XIAP、MDR1、BCL-2及BAX的mRNA表达情况。结果:DNR作用于K562与K562/D细胞系24 h的IC_(50)值分别为2.177μg/ml和69.43μg/ml,耐药指数为31.89;分别用浓度为3、10、30、100及300μg/ml的Embelin作用于K562/D细胞系24 h,其增殖抑制率分别为2.70%±1.08%、10.92%±4.89%、28.13%±2.09%、36.56%±3.24%及43.59%±1.16%;用0.1、1、10及100μg/ml DNR联合10μg/ml Embelin作用于K562/D细胞系24 h,细胞增殖抑制率分别为31.92%±3.29%、49.57%±6.87%、55.16%±0.78%和71.94%±3.89%,其IC_(50)值为2.11μg/ml,逆转指数为32.91。用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测凋亡率。单独应用0.1μg/ml DNR作用于K562/D细胞系24 h的细胞凋亡率为12.06%±0.95%,而联合10和30μg/ml Embelin作用于K562/D细胞系24 h的细胞凋亡率分别为27.54%±0.59%和39.59%±1.57%;Western Blot结果显示,DNR联合Embelin后,Caspase-3的表达明显下降(P<0.05),且用抑制剂Z-VADFMK可以抵消药物联合应用对细胞的增殖抑制作用。同时,XIAP和BCL-2蛋白表达明显下降(P<0.05),BAX蛋白表达明显升高(P<0.05),而P-gp的表达无改变;RT-PCR结果显示,DNR联合Embelin后,XIAP和BCL-2 mRNA表达明显下调(P<0.05),BAX mRNA表达明显上调(P<0.05),MDR1 mRNA表达无明显变化(P>0.05)。结论:降低XIAP表达有助于增强DNR对K562/D细胞的作用;Embelin逆转K562/D细胞对DNR耐药机制与P-gp及MDR1 mRNA无关。
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关键词
EMBELIN
k562/d细胞
柔红霉素
P-GP
M
d
R1
MRNA
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职称材料
题名
Embelin逆转K562/D细胞对柔红霉素耐药与P-gp及MDR1 mRNA无关
被引量:
3
1
作者
蒋卉男
刘卓刚
胡荣
机构
中国医科大学附属盛京医院血液科
出处
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第5期1342-1349,共8页
文摘
目的:探讨XIAP抑制剂Embelin逆转K562/D细胞对柔红霉素(daunorubicin,DNR)耐药的机制以及与P-gp及MDR1 mRNA的关系。方法:应用MTT法检测不同浓度DNR及联合Embelin对K562及K562/D细胞增殖抑制情况的影响;应用Annexin V-FITC/PI复染流式细胞术检测细胞凋亡的改变;用Western blot方法检测XIAP、Caspase-3、P-gp、BCL-2及BAX的蛋白表达情况;用RT-PCR检测XIAP、MDR1、BCL-2及BAX的mRNA表达情况。结果:DNR作用于K562与K562/D细胞系24 h的IC_(50)值分别为2.177μg/ml和69.43μg/ml,耐药指数为31.89;分别用浓度为3、10、30、100及300μg/ml的Embelin作用于K562/D细胞系24 h,其增殖抑制率分别为2.70%±1.08%、10.92%±4.89%、28.13%±2.09%、36.56%±3.24%及43.59%±1.16%;用0.1、1、10及100μg/ml DNR联合10μg/ml Embelin作用于K562/D细胞系24 h,细胞增殖抑制率分别为31.92%±3.29%、49.57%±6.87%、55.16%±0.78%和71.94%±3.89%,其IC_(50)值为2.11μg/ml,逆转指数为32.91。用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测凋亡率。单独应用0.1μg/ml DNR作用于K562/D细胞系24 h的细胞凋亡率为12.06%±0.95%,而联合10和30μg/ml Embelin作用于K562/D细胞系24 h的细胞凋亡率分别为27.54%±0.59%和39.59%±1.57%;Western Blot结果显示,DNR联合Embelin后,Caspase-3的表达明显下降(P<0.05),且用抑制剂Z-VADFMK可以抵消药物联合应用对细胞的增殖抑制作用。同时,XIAP和BCL-2蛋白表达明显下降(P<0.05),BAX蛋白表达明显升高(P<0.05),而P-gp的表达无改变;RT-PCR结果显示,DNR联合Embelin后,XIAP和BCL-2 mRNA表达明显下调(P<0.05),BAX mRNA表达明显上调(P<0.05),MDR1 mRNA表达无明显变化(P>0.05)。结论:降低XIAP表达有助于增强DNR对K562/D细胞的作用;Embelin逆转K562/D细胞对DNR耐药机制与P-gp及MDR1 mRNA无关。
关键词
EMBELIN
k562/d细胞
柔红霉素
P-GP
M
d
R1
MRNA
Keywords
Embelin
k
562/
d
cell
d
aunorubicin
P-gp
M
d
R1 mRNA
分类号
R733.72 [医药卫生—肿瘤]
R979.1 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Embelin逆转K562/D细胞对柔红霉素耐药与P-gp及MDR1 mRNA无关
蒋卉男
刘卓刚
胡荣
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017
3
下载PDF
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