番鸭VIPR1和miR-317以及MAP3K7和miR-244靶向关系的研究

试验旨在验证番鸭就巢相关miRNA与靶基因靶向关系。试验利用miRanda、PITA和RNAhybrid三个软件的交集预测miR-317和miR-244靶基因,构建VIPR1-pmirGLO/MAP3K7-pmirGLO野生型和突变型双荧光素酶重组载体,将miR-317/VIPR1-Wt和miR-244/MAP3K7-Wt分别共转染至鸭胚成纤维细胞,检测双荧光素酶活性。结果显示:与miR-NC组相比,miR-317/VIPR1-Wt共转染组相对荧光值显著降低(P<0.05);VIPR1突变后,miR-NC组与miR-317组的相对荧光值不显著(P>0.05),说明突变后完全抑制miR-317对VIPR1的结合作用,VIPR1与miR-317之间存在相互结合作用。与miR-NC组相比,miR-244/MAP3K7-Wt共转染组相对荧光值无显著性差异(P>0.05);MAP3K7突变后,miR-NC组与miR-244组的相对荧光值差异不显著(P>0.05),表明MAP3K7与miR-244之间不存在相互结合作用。研究提示,miR-317与VIPR1存在确切靶向结合位点,即VIPR1是miRNA miR-317的靶基因,而miR-244与MAP3K7不存在靶向关系。

有机盐钻井液在塔里木东河油田K7井的应用

有机盐钻井液体系由水溶性加重剂(Weigh1、Weigh2和Weigh3)、降滤失剂(Redu1和Redu2)、无荧光白沥青(NFA-25)、强包被抑制剂(IND-10)、提切剂(Visco1和Visco2)组成。有机盐钻井液具有流变性好、抑制性强、造壁性好、保护油气层效果好、对钻具无腐蚀,对环境无污染等特点。介绍了有机盐钻井液在K7井的现场应用情况。应用结果表明,钻头提出后完好无损,证明该体系能够充分清洗、冷却和保护钻头,延长钻头寿命;该井有机盐钻井液现场用浆经中国石油天然气集团公司环境监测总站检测,结果无毒。

转K7型转向架动力学性能研究

基于多体动力学理论,根据转K7型转向架的结构特点,建立了车辆系统动力学模型。对转K7型转向架副构架进行了受力分析和仿真计算,并就决定转向架轮对水平定位能力的主要参数对转向架动力学性能的影响进行了深入的研究和分析。

杂多酸K7Fe^3＋P2W17O62H2对硫醇—磷脂杂化双层膜通透性的影响

利用涂抹冷冻法制备了硫醇-磷脂杂化双层膜,采用循环伏安和交流阻抗方法,研究了硫醇-磷脂杂化双层膜与杂多酸K7Fe3+P2W17O62H2作用前后通透性的变化.发现该种杂多酸能够诱导硫醇-磷脂杂化双层膜产生一些孔洞,降低了膜电阻,增加了膜电容,也增加了探针Fe(CN)63-/4-与电极的电子传递.同时对产生该现象的机理进行了初步的探讨.

miR-125b通过靶向MAP2K7抑制三阴性乳腺癌的上皮间充质转化机制研究

目的探讨miR-125b在三阴性乳腺癌患者中的表达情况并且探讨该条件下miR-125b对MAP2K7的表达影响进而对肿瘤发生上皮间充质转化的发生产生的影响。方法利用乳腺癌患者活检的组织芯片通过原位杂交检测miR-125b的mRNA表达水平;利用划痕实验和基质胶侵袭实验检测过表达miR-125b对乳腺癌细胞的恶性表型的影响,利用RT-PCR和Western blot实验检测miR-125b对其靶基因MAP2K7和上皮间充质转化发生的分子标志物钙粘附蛋白E(E-cadherin)和钙粘附蛋白N(N-cadherin)的表达影响;利用裸鼠成瘤实验检测在体内过表达miR-125b对MAP2K7表达产生的影响。结果 miR-125b在的三阴性乳腺癌患者中显著降低,过表达miR-125b能够逆转乳腺癌细胞的侵袭迁移能力并且促进E-cadherin的表达,抑制N-cadherin的表达,能够负向调控MAP2K7的表达水平;抑制裸鼠的成瘤能力。结论 miR-125b在三阴性乳腺癌患者体内低表达并且miR-125b能够通过靶向MAP2K7抑制三阴性乳腺癌的上皮间充质转化的发生,从而抑制三阴性乳腺癌的发生发展进程。

K7M2细胞转染Runx2基因后对MC3T3细胞RANKL基因表达的影响

目的探讨转染Runx2基因后对RANKL及相关细胞因子的影响。方法将鼠骨肉瘤K7M2细胞分成3组,K7M2组,K7M2-neo组和K7M2-Runx2组,应用Westernblot方法检测转染是否成功,选择转染成功的细胞连同K7M2组,K7M2-neo组细胞,应用ELISA方法检测培养上清液中的IL-1α,IL-6,IL-11和PGE2的含量变化,并应用RT-PCR的方法检测应用K7M2组,K7M2-neo组和K7M2-Runx2组以及在K7M2-Runx2组细胞中加入IL-6抗体后的培养液来培养的MC3T3细胞RANKL基因表达的变化,并应用Westernblot方法检测K7M2细胞IL-6R蛋白的表达变化。结果转染Runx2基因后可以有效提高Runx2蛋白的表达,培养的上清液中的IL-6含量明显提高,应用K7M2-Runx2组细胞培液培养MC3T3细胞可以提高其RANKL基因表达,在K7M2-Runx2组细胞培液中加入IL-6抗体后则不会提高MC3T3细胞的RANKL基因表达。结论Runx2基因可以提高MC3T3细胞RANKL基因的表达,这种基因表达的提高是通过IL-6因子来介导的。

转染和干扰Runx2基因对K7 M2细胞的影响

目的探讨干扰和转染Runx2基因后对K7M2骨肉瘤细胞体外生物学活性的影响。方法分别将阴性对照质粒、携带Runx2和siRNA Runx2的质粒转染到K7M2细胞中。应用Western blot检测转染和干扰Runx2基因对其蛋白表达的影响,并检测细胞体外的增殖能力(MTT)、侵袭性、迁移性和黏附性的变化,并应用流式细胞仪(FCM)检测相应细胞的凋亡率和细胞周期分布的变化。结果与空白对照组比,转染Runx2和siRunx2组的K7M2细胞中Runx2蛋白表达分别明显增强和减弱,而阴性对照质粒组没有明显改变。转染siRunx2组的细胞,MTT结果显示增殖能力明显下降,迁移性、侵袭性和增殖指数(PI)也明显下降,与空白对照组比差异有统计学意义(P<0.05),黏附性和凋亡率却没有明显变化。转染Runx2组K7M2的细胞增殖能力、迁移性、侵袭性和PI明显增高,与空白对照组比差异有统计学意义(P<0.05),黏附性和凋亡率没有明显变化。阴性对照组和空白对照组比上述指标没有明显改变。结论 Runx2可以促进K7M2细胞增殖,增强细胞的侵袭、迁移能力,其机制可能是和改变细胞周期的分布,使细胞更快的进入G2/M期有关。

转K7型转向架轮对径向装置结构刚度研究

为分析转K7型转向架轮对径向装置适应产品制造误差与线路扭曲不平顺的能力以及控制轮对水平运动的能力,对其整体结构及主要组成部件———副构架和连接杆的各向刚度进行了理论研究。计算结果表明:轮对径向装置适应产品制造误差和线路扭曲不平顺的能力均较强,并可为转向架提供足够的剪切刚度;副构架和连接杆具有良好的结构振动特性,能够保证轮对径向装置有效发挥控制轮对水平运动的作用。

人源MAP3K7克隆及其GST融合蛋白的表达和鉴定

目的构建MAP3K7蛋白GST的融合表达载体,高效表达和纯化GST-MAP3K7融合蛋白,为GST Pulldown实验做准备。方法通过PCR扩增MAP3K7全长编码基因,经双酶切定向克隆至表达载体pGEX-5X-1,构建原核重组表达载体pGEX-5X-1-MAP3K7,通过酶切和测序鉴定后,导入E.coli BL21宿主菌中,IPTG诱导表达融合蛋白,经谷胱甘肽琼脂糖凝胶纯化表达产物,SDS-PAGE和Western blot分析鉴定。结果经测序鉴定成功构建了原核重组表达载体pGEX-5X-1-MAP3K7,诱导后的GST融合蛋白经SDS-PAGE和Western blot检测到分子量正确的特异性蛋白条带,经纯化后,得到了高纯度的融合蛋白。结论成功构建了MAP3K7全长的GST重组表达载体,确定了GST-MAP3K7融合蛋白表达的最佳条件,诱导成功并得到了高纯度的融合蛋白,为进一步研究MAP3K7蛋白的生物学功能奠定了基础。

转K7型转向架承载鞍结构优化及动力学性能研究

转K7型转向架是我国至今唯一投入商业运用的货车副构架式径向转向架。为进一步提高转向架的运行性能,对转K7型转向架与U形副构架铸造一体式的承载鞍系统进行了优化。分离U形副构架和承载鞍功能,设置独立的承载鞍和承载鞍弹性垫。现采用理论分析、动力学仿真计算和线路试验验证的方法对优化承载鞍系统转向架的动力学性能进行了系统研究。仿真结果表明当承载鞍弹性垫刚度在30MN/m以上时,对转向架动力学性能基本无影响,仅起定位板或磨耗板的功能;动力学试验表明承载鞍系统优化后车辆整体动力学性能得到改善。

安凯宝斯通K7批量交付青海

只有与时代并行的企业,才可能在不断变幻中保持从容。进入全域旅游时代,位移需求下的运游融合,将促进'诗和远方'在空间上的结合。这让一直敏锐的中国客车人看到了'新拐点',并迅速而坚定地迈向了下一程。

卡波氏肉瘤病毒编码的miR-K7-3p重组慢病毒载体构建及其对血管内皮细胞增殖的影响

目的:构建卡波氏肉瘤病毒(KSHV)编码的miR-K7-3p的重组慢病毒载体,并检测其对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖能力的影响。方法:将miR-K7-3p的序列及互补序列插入miR-30茎环结构,以此为模板扩增出目的片段,插入慢病毒载体mp CDH-CMV-MCS-EF1-tRFP(简写为mp CDH,tRFP基因可表达红色荧光蛋白)中,构建重组慢病毒载体mp CDH-miR-K7-3p。将构建的目的质粒mp CDH-K7-3p与包装质粒ps PAX2、包膜质粒p MD2.G共同转染人胚肾上皮细胞(293 T),包装表达miR-K7-3p的慢病毒。采用病毒梯度稀释法测定病毒滴度。用包装成功的miR-K7-3p慢病毒感染HUVECs,荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-K7-3p的表达,CCK-8及平板克隆实验检测细胞增殖力。结果:双酶切鉴定、核酸序列测定与比对结果证实重组慢病毒质粒mp CDH-miR-K7-3p构建成功。qRT-PCR检测到重组慢病毒感染的HUVECs中miR-K7-3p的表达水平升高。增殖实验结果显示,miR-K7-3p慢病毒感染后的HUVECs增殖能力明显强于对照组。结论:miR-K7-3p可以明显促进HUVECs的增殖。

AMD K7主板八大穷选择

acket A接口的K7主板当年还傍着AMD这个大款高高在上呢，一付看不起我们穷弟兄的样子，追回好，也成了明日黄花，沦落到了谯端市场，虽然姿色一点都没少，但是人家AMD喜新厌旧，所以注定要被始乱终弃。

MAP3K7CL基因在鹅肥肝形成中的表达及功能研究

免疫标记基因(如TNF-α)和内质网应激标记基因(如GRP78)在鹅肥肝形成中的表达受到抑制,而MAP3 K7CL基因与鹅肝细胞中的GRP78表达呈负相关,且参与免疫和信号传导,提示该基因可能参与鹅肥肝的形成。为探究MAP3 K7CL基因在鹅肥肝形成中的表达规律及功能,选取24只70日龄朗德公鹅,随机分为对照组和填饲组(各12只),填饲组包括填饲12和24d 2个阶段。采用qPCR技术测定MAP3 K7CL基因在不同填饲阶段朗德鹅肝脏组织中的表达水平,探究葡萄糖、胰岛素、油酸、棕榈酸等不同因子对鹅原代肝细胞中MAP3 K7CL表达的影响以及MAP3 K7CL过表达对其下游基因的影响。结果表明:与对照组相比,填饲极显著诱导肝脏中MAP3 K7CL基因表达;在鹅原代肝细胞中,葡萄糖、胰岛素和棕榈酸显著抑制MAP3 K7CL基因的表达,而油酸显著诱导MAP3 K7CL基因表达;MAP3 K7CL基因过表达后显著上调其下游的MAF1基因,显著下调EP300基因表达并有上调NDUFS3基因表达的趋势,且这些基因表达的变化模式与鹅肥肝中的情况一致。综合而言,鹅肥肝中油酸升高可能是诱导MAP3 K7CL基因表达的重要因素;而MAP3 K7CL基因可能通过影响EP300、MAF1和NDUFS3等基因的表达参与鹅肥肝的形成,与氧化还原反应、糖类脂肪蛋白质代谢以及免疫和防御反应等生物学过程有关。

转K7型转向架的研制

介绍了转K7型转向架的设计原理、主要技术特点、主要技术参数、主要结构以及试验和运用情况。

32NAT15×K7钢丝绳研制

压实股钢丝绳具有破断拉力高、使用寿命长、耐磨性能好和抗变形等特点,可代替线接触钢丝绳产品。根据用户要求,采用钢丝绳设计软件设计工艺参数,并选用优质制绳钢丝组织生产。用辊轧法生产的32NAT15×K7、强度1 770 MPa压实股钢丝绳,实测直径平均值为33.26 mm,钢丝绳拆股后1.85 mm钢丝最低抗拉强度达1 820MPa,最低扭转值25次,最低弯曲值10次,钢丝破断拉力总和1 056.3 k N,合绳后拆股试验各项技术指标均达到YB/T 5359—2010规定,满足用户要求。

转K7型转向架连接杆连接方式的探讨及改进建议

大秦线主型重载货车之一的C80BF型运煤专用敞车，装用转K7型转向架，其较为特殊的轮对径向装置，主要由左、右2个U形副构架通过2个连接杆与圆销连接而成。目前列检发现多起连接杆圆销窜出及开口销折断、丢失，对车辆运行安全构成较大隐患。探讨连接杆连接方式的优化，以提高车辆的整体运用性能。

抗虫棉K7高产栽培技术

介绍了抗虫棉K7的高产栽培技术,包括科学选地、播前准备、播种、合理密植、苗期管理、水肥管理、科学调控、病虫害防治等内容,以期为K7的推广提供参考。