KAAD-环巴胺抑制Hedgehog信号通路对人鳞状细胞癌细胞株A431生长及凋亡的影响

目的探讨Hedgehog信号转导通路的特异性抑制剂KAAD-环巴胺对人鳞状细胞癌（squamous cell carcinoma，SCC）细胞增殖及凋亡的影响。方法采用MTT法测定KAAD-环巴胺对A431细胞的增殖抑制情况，光镜下观察细胞形态，流式细胞仪检测KAAD-环巴胺对A431细胞周期的影响，用Annexin—V—FTTC／PI双染色法检测细胞凋亡率的变化。结果MTT结果显示0．5，1，2，5μmol／LKAAD-环巴胺对A431细胞的生长抑制率依次为（7．0±2.3）％，（20．6±2．8）％，（48.3±3．4）％和（61．6±3．3）％，F=49．92。P〈0．01；5μmol／LKAAD-环巴胺作用1～5d的生长抑制率分别为（18.3±2．6）％，（56．1±3．7）％，（65．4±2．8）％，（71．2±1．9）％，（75．9±3．0）％，F=16．32，P〈0．01，表明KAAD-环巴胺可显著抑制A431细胞增殖，且呈浓度和时间依赖性：r浓度=0．91，P〈0．01；r时间=0．86，P〈0．05。光镜下细胞形态明显受损。细胞周期结果显示KAAD-环巴胺作用组G1期细胞数为（76．2±1．8）％，较空白对照（51．8±2．9）％明显增加，F=26．34，P〈0．01，G1期前亚二倍体峰由空白对照组（1．7±0.3）％增至（8．7±0．2）％，F=6．32，P〈0．05，表明KAAD-环巴胺可以将A431阻滞于G1期。凋亡检测结果显示KAAD-环巴胺可以明显诱导A431细胞发生凋亡，凋亡率由空白对照（18．5±3．1）％增至（46．2±2．8）％，F=32．01，P〈0．01。阴性对照组实验结果与空白对照组比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论Hedgehog信号通路的特异性抑制剂KAAD-环巴胺能够显著抑制A431细胞增殖并诱导其凋亡。