KAI1基因对宫颈癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的探讨肿瘤转移抑制基因KAI1对宫颈癌CaSki细胞体外增殖和侵袭能力的影响。方法通过脂质体转染技术,将真核表达质粒pCMV-KAI1导入低表达的宫颈癌CaSki细胞,免疫组化及实时荧光定量RT-PCR法检测转染前后细胞内KAI1蛋白和mRNA的表达,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及Transwell侵袭力小室测定KAI1基因对细胞增殖能力及侵袭能力的影响。结果转染目的基因的CaSki细胞中KAI1 mRNA水平及蛋白表达明显增强(P<0.05),细胞体外增殖能力明显弱于未转染组和转染空载体组(P<0.05),细胞穿膜数量明显少于未转染组和转染空载体组(P<0.05)。结论肿瘤转移抑制基因KAI1对宫颈癌细胞体外增殖及侵袭能力有一定抑制作用。

KAI1基因在胰腺癌中抗转移作用的研究

癌症患者死亡的主要原因之一是癌细胞的转移所致,而转移更是胰腺癌的主要特点.高转移率、高死亡率为此癌的突出特征,手术切除率较低,故给治疗带来困难,因此积极开展抑制胰腺癌转移的基因诊断和治疗的研究,既具有重要的理论意义,亦有临床应用的价值.KAI1基因是近年来发现的一种与肿瘤转移抑制有关的基因,编码分子量为29.61 kD的细胞膜糖蛋白,属于TM4SF家族成员之一.该基因的功能日益受到学者们的广泛关注,本文主要对该基因的结构、功能,以及在抑制胰腺癌转移中的作用研究作一综述.

KAI1基因对人鼻咽癌细胞株HNE-1增殖、侵袭及转移能力的影响

目的:研究转移抑制基因KAI1对人鼻咽癌细胞体外增殖、侵袭及转移能力等生物学效应的影响。方法:通过腺病毒载体将KAI1基因转染人鼻咽癌细胞株HNE-1,RT-PCR法检测转染效果;MTT法检测鼻咽癌细胞转染KAI1基因后体外增殖能力的变化;FCM法检测细胞生长周期分布;Transwell侵袭小室检测细胞侵袭能力的改变;细胞同质黏附实验检测细胞黏附力的变化。结果:当腺病毒载体rAd-KAI1效价为30 MOI时,对HNE-1细胞的转染率可达92%;转染48和72 h时,rAd-KAI1转染组细胞的增殖明显受到抑制,抑制率分别为17%和30%;G0/G1期细胞数量较对照组增多,S期细胞数量减少;转染组的穿膜细胞数为(52.5±4.2)个,明显低于对照组的(167.4±3.5)个,差异有统计学意义(P<0.05);转染组的细胞同质黏附作用高于对照组(P<0.05)。结论:腺病毒载体成功介导了抑癌基因KAI1转染进入鼻咽癌HNE-1细胞,并取得较高的转染率。KAI1基因可能通过阻滞HNE-1细胞生长周期,从而抑制细胞增殖。KAI1基因能够抑制HNE-1细胞侵袭能力,其机制可能为KAI1基因增强了鼻咽癌细胞的黏附力所致。

KAI1基因对人肝癌细胞MHCC97-H粘附作用的影响

背景与目的:研究表明,KAI1基因对多种恶性肿瘤细胞具有转移抑制作用。本研究旨在通过探讨KAI1基因对具有高转移潜能的人肝癌细胞株MHCC97-H粘附作用的影响,揭示其转移抑制的分子生物学机制。方法:将载有KAI1基因的质粒转染入具有高转移潜能的MHCC97-H细胞,观察细胞的生长状态,运用ELISA、Western blot等方法测定细胞产生的可溶性细胞间粘附因子-1(sICAM-1)和E-钙粘连蛋白的变化,并通过集落形成实验、细胞粘附实验判定细胞的粘附特点。结果:转染KAI1基因的MHCC97-H细胞形态与转染前无明显差别,但胞浆内黑染颗粒增加;同时细胞分泌的sICAM-1以及细胞内E-钙粘连蛋白较转染前减少,在传代后第4天分别减少24.28%和26.02%。3h及4h的细胞粘附率分别下降11.34%和24.00%,克隆形成率则没有明显变化。结论:KAI1基因改变了MHCC97-H细胞的生长方式和细胞增殖情况,使细胞分泌的sICAM-1以及细胞内E-钙粘连蛋白的量明显减少,使细胞粘附率降低。

KAI1基因对乳腺癌细胞生物学特征的影响

目的:研究稳定转染外源性KAI1基因对人乳腺癌细胞体外生物学特性的影响。方法:应用脂质体将pCMV-KAI1质粒转染入人乳腺癌细胞株MDA-MB-231中,免疫印迹方法检测蛋白表达,分别利用MTT法,体外粘附及侵袭力实验判断KAI1基因对细胞增殖能力及粘附,侵袭力的影响,并利用ELISA法检测转染前后游离组织间粘附因子-1(sICAM-1)的动态变化。结果:获得了稳定表达KAI1基因的MDA-MB-231乳腺癌细胞克隆,并有KAI1蛋白的高表达。MTT法显示转染组的细胞增殖力低于未转染组和转染空载体组(P<0.05)。体外粘附及侵袭力实验表明转染组的细胞粘附侵袭能力低于未转染组和转染空载体组(P<0.05)。转染后sICAM-1含量下降。结论:KAI1基因可抑制人乳腺癌细胞的恶性特征,并可能是通过影响一些粘附因子作用而抑制肿瘤细胞转移。

KAI1基因在7例肝癌组织中的表达

应用Ｎｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交方法对ＫＡＩ１基因在肝癌组织中的表达进行了分析。结果表明，ＫＡＩ１在癌组织的表达比在没有癌细胞部位和正常肝组织中降低达５０％以上。

KAI1基因对肝癌细胞侵袭、转移的影响及其分子机制

目的研究肿瘤转移抑制基因KAI1对肝癌细胞侵袭、转移的影响及其分子机制,为肝癌的基因治疗提供理论和实验依据。方法用亚克隆技术构建KAI1基因正、反义真核表达质粒,DOTAP脂质体法将其分别转入高转移潜能的人MHCC97-H肝癌细胞,以限制性酶切、PCR、Westernblot及免疫组化鉴定基因重组及转染是否成功。电镜观察细胞超微形态变化,流式细胞仪检测细胞周期分布,细胞生长曲线和平板法集落形成试验观察细胞生长和集落形成能力,BoydenChamber试验观察细胞侵袭能力,微管吸吮技术测定细胞的粘弹性和粘附力。BALBCA4～6周龄雄性裸鼠80只,随机分正义组、反义组、亲本细胞组及空载体组进行皮下(n=40)和原位肝(n=40)种植试验,观察体内的成瘤性、侵袭性及远处转移能力,免疫组化研究癌转移灶AFP和肿瘤组织细胞外基质(ECM)及粘附分子的表达状况。结果(1)成功构建了KAI1正、反义基因真核表达质粒,并将其分别转入MHCC97-H人肝癌细胞;(2)发现转入KAI1基因后可导致肝癌MHCC97-H细胞的一些细胞器数量和形态的变化;(3)KAI1基因对肝癌MHCC97-H细胞的体内外生长、细胞周期及体内成瘤性无明显影响;(4)反义KAI1基因可使MHCC97-H细胞的克隆形成能力增强、对体内外肝癌细胞的侵袭和转移有促进作用;(5)KAI1基因表达上调能使MHCC97-H细胞的体内外侵袭能力降低;(6)KAI1基因抑制肝癌侵袭和转移的机制可能与细胞粘弹性增加、ECM表达上调、粘附分子表达下调及粘附力下降等变化有关。结论KAI1基因在肝癌的侵袭转移过程中发挥着重要作用,上调KAI1基因表达能明显降低肝癌细胞的侵袭和转移能力。

KAI1基因与肿瘤侵袭、转移、预后的关系

KAI1基因是 1995年发现的肿瘤转移抑制基因 ,它表达的蛋白质属于TM 4SF。KAI1基因的表达对大多数的肿瘤转移起抑制作用 ,但在个别肿瘤转移中的作用各学者看法不同。作者对近年来关于KAI1基因的结构以及与肿瘤侵袭。

KAI1基因在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的探讨肿瘤转移抑制基因KAI1基因在非小细胞肺癌组织中的表达及其与患者临床病理指标的关系。方法采用RT-PCR和Western blot法,检测48例肺癌患者手术切除的新鲜肺癌组织标本和20例同期手术切除的肺部良性病变周围正常组织中KAI1mRNA、KAI1/CD82,并结合患者的临床病理资料对其结果进行统计分析。结果肺癌组织和肺部良性病变组织中KAI1mRNA的阳性率分别为52%和90%,KAI1/CD82蛋白的阳性率分别为48%和85%,肺癌组KAI1mRNA及KAI1/CD82蛋白表达均低于肺部良性病变组(P<0.01);KAI1mRNA、KAI1/CD82表达水平与肺癌患者的临床分期、组织分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05),其中KAI1/CD82表达与淋巴结转移状况密切相关(P<0.01),肺癌组织中KAI1mRNA与KAI1/CD82表达有相关性(P<0.01)。结论KAI1基因的低表达可能与非小细胞肺癌的发生、发展和转移有关;其下调的机制可能主要发生在转录水平;KAI1基因的表达可作为一项评估肺癌患者转移潜能的指标。

中国人胃癌KAI1基因表达及遗传不稳定性

采用Envision免疫组织化学,Leica-Qwin计算机图像分析,石蜡包埋组织抽提DNA,PCR-单链构象多态性(SSCP)和常规银染等方法,对56例石蜡包埋胃癌标本及其相应的正常组织,进行KAI1蛋白表达水平的研究和D1S1344、D11S1326位点微卫星不稳定(MSI)、杂合性缺失(LOH)的检测,为揭示KAI1基因作用机制和肿瘤转移机制提供实验依据。实验中,胃癌KAI1蛋白阳性检出率为55.4%(31/56):随着癌组织浸润程度的进展,其阳性率呈降低趋势(P<0.01);在无淋巴结转移的肿瘤组织KAI1蛋白表达率为83.9%,显著高于淋巴结转移肿瘤组织的20.0%;在肿瘤结节转移(tumor node metastasis,TNM)Ⅰ+Ⅱ期,KAI1蛋白阳性率为82.8%,明显高于TNMⅢ+Ⅳ期的25.9%(P<0.01)。56例胃癌D11S1326、D11S1344位点的SSCP分析中,均未出现MSI或LOH。实验结果提示,KAI1蛋白表达与胃癌组织浸润、淋巴结转移及恶性进展密切相关。在胃癌的发生发展中,KAI1基因未见遗传不稳定性改变。

转移性和非转移性食管癌组织中KAI1基因的表达

目的 :探讨KAI1基因与食管癌转移的关系。方法 :应用原位杂交法分析KAI1基因在有淋巴结转移和无淋巴结转移的食管癌组织中的表达。结果 :在有淋巴结转移和无淋巴结转移的食管癌组织中KAI1mRNA的表达未见显著差异 (P >0 0 5 ) ,且KAI1mRNA表达与食管癌的分化无关 (P >0 0 5 )。结论 :KAI1基因对食管癌转移的发生无抑制作用 ;KAI1基因的表达也与食管癌的分化无关。

乳腺癌KAI1基因表达及其临床病理意义

目的 :探讨乳腺癌KAI1表达及其临床病理意义。方法 :采用免疫组织化学和半定量逆转录多聚酶链反应 (RT -PCR)。检测 83例乳腺癌标本中KAI1蛋白和mRNA的表达并与临床病理资料比较分析。结果 :免疫组化的阳性率 4 8.19% (40 83)和阴性率 5 1.81% (43 83) ,RT -PCR的阳性率4 1.17% (35 83)和阴性率 5 7.83% (48 83)。结论 :免疫组化和RT -PCR的结果基本一致 (P >0 .0 5 )。并与乳腺癌的转移呈负相关。在Ⅲ、Ⅳ期以及发生淋巴结等转移的病人中 ,KAI1的表达明显下调 (P <0 .0 1)。

转移性和非转移性乳腺癌组织中KAI1基因的表达

目的 :探讨肿瘤转移抑制基因KAI1与乳腺癌转移的相关性。方法 :运用原位杂交法观察KAI1mRNA在转移性和非转移性乳腺癌组织中的表达。结果 :在无淋巴结转移的 12例乳腺癌病例中KAI1mRNA阳性表达为 9例 ,有淋巴结转移的 8例中阳性表达 1例。前者阳性率显著高于后者 (P <0 0 5 )。结论 :KAI1基因的低表达或不表达可能是某些高转移潜能乳腺癌的特征。

小泛素相关修饰物调控KAI1基因的肿瘤转移抑制作用

小泛素相关修饰物(small ubiquitin-related modifier,SUMO)是泛素(ubiquitin)类蛋白家族的重要成员之一。SUMO化修饰属于真核基因表达的翻译后加工,可使蛋白质更稳定,从而调节更多的细胞活动。KAI1是1995年发现的肿瘤转移抑制基因,它表达的蛋白属于四跨膜超家族(transmembrane 4 superfamily,TM4SF),KAI1基因的表达对大多数的肿瘤转移起抑制作用。SUMO与KAI1基因的关系密切,并影响着KAI1基因,从而在肿瘤的转移抑制过程中起重要作用。该文介绍了SUMO与KAI1基因的最新研究进展,供同行参考。

不同转移潜能人肺癌细胞系KAI1基因的表达

目的 :探讨KAI1基因与人肺癌细胞系转移潜能的关系。方法 :利用逆转录 PCR和Northernblot杂交法分析不同转移潜能人肺癌细胞系中KAI1mRNA的表达 ,并用聚合酶链反应 单链构象多态性分析 (PCR SSCP)检测与突变的关系。结果 :在高转移潜能细胞系PG中KAI1mRNA表达降低 ,在无转移潜能的PAa细胞中KAI1的表达量比PG细胞高 10倍以上 (积分光密度比值分别为 0 .7313和 0 .0 5 49)。PCR SSCP结果显示在PG细胞KAI1基因第 7外显子出现异常改变。结论 :肺癌细胞的转移潜能可能与KAI1基因表达量有关 ,KAI1基因的低表达可能由基因突变所致。

KAI1基因与妇科肿瘤

KAI1基因是定位于人染色体11p11.2的转移抑制基因,主要参与调节细胞间的粘附,通过封闭肿瘤细胞表面的粘附受体,使肿瘤细胞不易脱离原发灶而抑制转移。KAI1蛋白已被证实对多种肿瘤的转移有抑制作用。本文对KAI1基因的结构、功能及其与妇科肿瘤的关系作一综述。

KAI1基因在186例大肠癌中的表达及意义

[目的]探讨大肠癌中KAI1基因蛋白表达与病理组织学特征及预后的关系。[方法]对186例存档大肠癌石蜡组织标本进行重新切片,KAI1免疫组化染色(S-P法)。将不同大肠癌组织学分型、分化程度、浸润深度及临床分期(Dukes’)下染色结果进行比较。[结果]大肠癌不同组织学分型和分化程度下KAI1表达无显著性差异(P>0.05);而在肿瘤伴淋巴结转移组,KAI1阳性表达率低于无淋巴结转移组(20.6%vs.64.3%);KAI1阳性率随Dukes’分期依次减低,分别Dukes’A阳性表达率为86.4%,Dukes’B阳性表达率为54.8%,Dukes’C阳性表达率为21.6%,有显著性差异(P<0.05)。[结论]KAI1的阳性表达与大肠癌的进展及转移有关,对判断大肠癌预后有益。

KAI1基因异常剪接与乳腺癌进展、转移的关系

目的探讨KAI1基因的异常剪接与乳腺癌进展、转移的关系。方法提取48例乳腺癌组织的RNA,利用RT-PCR技术进行逆转录扩增KAI1基因,电泳检测KAI1基因的异常剪接,测序验证,统计分析KAI1基因的异常剪接与乳腺癌进展、转移的关系。结果48例乳腺癌组织中,20例（42%）出现KAI1基因异常剪接,导致第9外显子（exon9）杂合性缺失;有淋巴结转移的乳腺癌组织中,基因异常剪接导致exon9表达缺失的频率明显高于无淋巴结转移者（P〈0.05）;Ⅲ-Ⅳ期乳腺癌组织中,基因的异常剪接导致exon9表达缺失的频率明显高于Ⅰ-Ⅱ期（P〈0.05）;KAI1基因的异常剪接与乳腺癌患者的年龄、肿块大小、组织学类型以及分化程度无关（P〉0.05）。结论KAI1基因的异常剪接可能与乳腺癌的进展、转移有关,异常剪接的检测可作为预测肿瘤进展、转移的临床指标。