PI3K、ERK1／2、mito—KATP通道及mPTP在七氟醚后处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用

目的 评价磷脂酰肌醇-3-激酶（P13K）及细胞外信号调节激酶1／2（ERK1／2）、线粒体ATP敏感性钾（mito-KATP）通道及线粒体膜通透性转换孔（mPTP）在七氟醚后处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用。方法雄性清洁级sD大鼠，周龄7-10周，体重250～300g，采用Langendorff法建立大鼠离体心脏灌注模型，取模型制备成功的心脏180个，随机分为12组（n=15），对照组（C组）：持续灌注90min；缺血再灌注组（IR组）：停止灌注K—H液30min，再灌注60min；IR＋LY组、IR＋PD组、IR＋ATR组、IR＋5-HD组和IR＋DMSO组：于再灌注即刻分别灌注P13K特异性抑制剂LY294002（LY）15μmol／L、ERK1／2特异性抑制剂PD98059（PD）20／Lmol／L、mPWP开放剂苍术甙（ATR）20／Lmol／L、mito—K。。通道抑制剂5-羟癸酸（5-HD）100μmol／L和溶剂二甲基亚砜（DMSO）0．02％15min；七氟醚后处理组（S组）：于再灌注即刻灌注经3％t氟醚饱和的K—H液15min，随后更换正常K-H液再灌注45min；S＋LY组、S＋PD组、S＋ATR组和s＋5-HD组：于再灌注即刻灌注经七氟醚饱和的K—H液同时分别灌注LY15μmol／L、PD20μmool/L、ATR20μmol／L、5-HD100μmol／L 15min，随后更换为正常K．H液再灌注45min。于平衡灌注20min、停灌前即刻、再灌注15、30和60min（T0-4）时测定冠状动脉流量（CF），记录心功能指标；C组、IR组和S组分别于R和L时收集冠状动脉流出液测定乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶同工酶（CK—MB）活性和肌钙蛋白1（cTnI）浓度；于T4时取左心室，测定心肌梗死面积，C组、IR组、IR＋ATR组、IR＋5-HD组、IR＋DMSO组、S组、S＋ATR组和S＋5-HD组检测细胞凋亡情况，计算凋亡指数（AI），C组、IR组、IR＋LY组、IR＋PD组、IR＋DMSO组、S组、S＋LY组和S＋PD组测定心肌炳酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD＋）含量。结果与c组比较，其余各组再灌注时心功能降低，CF降低，心肌梗死面积增大，IR组、IR＋ATR组、IR＋5-HD组、IR＋DMSO组、S组、s＋ATR组和S＋5-HD组AI升高，IR组、IR＋LY组、IR＋PD组、IR＋DMSO组、S组、S＋LY组和S＋PD组NAD＋含量降低，IR组和S组LDH、CK—MB活性和cTnI浓度升高（P〈0．05）；与IR组比较，S组再灌注时心功能提高，CF升高，心肌梗死面积减小，AI降低，NAD＋含量升高，LDH、CK-MB活性和cTnⅠ浓度降低（P〈0．05），其余组上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）。结论七氟醚后处理可能通过激活P13K及ERKI／2、促进mito-KATP通道开放、抑制mPTP开放，从而减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤。