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KCNK15-AS1靶向miR-21对肺鳞癌恶性生物学行为的影响
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作者 雷晋铭 周志雄 张显萍 《生物医学工程与临床》 CAS 2021年第4期488-495,共8页
目的探讨KCNK15-AS1靶向miR-21对肺鳞癌细胞迁移和凋亡的影响。方法选择湘南学院附属医院2018年6月至2019年12月收治的21例肺鳞癌患者的癌组织及癌旁正常组织。采用lncRNA芯片筛选肺鳞癌中差异表达的lncRNA;用实时荧光定量聚合酶链式反... 目的探讨KCNK15-AS1靶向miR-21对肺鳞癌细胞迁移和凋亡的影响。方法选择湘南学院附属医院2018年6月至2019年12月收治的21例肺鳞癌患者的癌组织及癌旁正常组织。采用lncRNA芯片筛选肺鳞癌中差异表达的lncRNA;用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测用于分析KCNK15-AS1和miR-21的表达。将pcDNA3.1质粒和pcDNA3.1-KCNK15-AS1质粒、mimic NC、miR-21 mimic分别转染肺鳞癌细胞NCI-H520。荧光素酶活性分析实验用于检测KCNK15-AS1与miR-21的靶向关系;Transwell^(TM)实验和流式细胞术实验用于检测NCI-H520细胞的迁移和凋亡;Western blot实验检测caspase-3、caspase-9、BAX和BCL-2的蛋白表达。结果lncRNA芯片实验结果提示KCNK15-AS1在肺鳞癌组织中低表达。在肺鳞癌细胞系NCI-H520中KCNK15-AS1低表达,而miR-21高表达。荧光素酶活性分析实验显示,KCNK15-AS1靶向miR-21。Transwell^(TM)实验和流式细胞术实验结果显示,过表达KCNK15-AS1可抑制NCI-H520细胞迁移,促进细胞凋亡,而miR-21 mimic可逆转KCNK15-AS1对NCI-H520细胞迁移和凋亡的作用。Western blot实验结果显示过表达KCNK15-AS1可促进caspase-3、caspase-9、BAX蛋白的表达,抑制BCL-2的表达,而miR-21 mimic抑制KCNK15-AS1过表达对凋亡相关蛋白的调节作用。结论过表达KCNK15-AS1负向调节miR-21,抑制肺鳞癌细胞迁移,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 kcnk15-as1 MIR-21 肺鳞癌 细胞迁移 细胞凋亡
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长链非编码RNAKCNK15-AS1靶向微RNA-140-5p对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡及炎症因子表达的影响
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作者 孙鹏 张国华 +4 位作者 陈超斌 刘彬 陈美 周一林 杨翾 《中华骨与关节外科杂志》 CSCD 北大核心 2024年第5期459-466,共8页
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)KCNK15-AS1是否通过靶向微RNA-140-5p(miR-140-5p)影响骨关节炎(OA)软骨细胞增殖、凋亡,炎症因子表达及细胞外基质(ECM)合成。方法:实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测KCNK15-AS1和miR-140-5p在OA软骨组织中... 目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)KCNK15-AS1是否通过靶向微RNA-140-5p(miR-140-5p)影响骨关节炎(OA)软骨细胞增殖、凋亡,炎症因子表达及细胞外基质(ECM)合成。方法:实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测KCNK15-AS1和miR-140-5p在OA软骨组织中的表达。在OA软骨细胞中转染si-KCNK15-AS1,噻唑蓝(MTT)和流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡,蛋白质印迹法(WB)检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、p21、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、蛋白聚糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原(Collagen typeⅡ)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、MMP-9、MMP-13的表达。双荧光素酶活性检测分析KCNK15-AS1与miR-140-5p的靶向关系。si-KCNK15-AS1和anti-miR-140-5p共转染,观察干扰miR-140-5p表达对抑制KCNK15-AS1表达诱导的OA软骨细胞增殖、凋亡,炎症因子表达及ECM合成的影响。结果:与正常软骨组织比较,OA软骨组织中KCNK15-AS1表达量明显增加(P<0.05),miR-140-5p表达量显著减少(P<0.05)。抑制KCNK15-AS1表达明显提高OA软骨细胞24 h、48 h、72 h的吸光度(OD)值和CyclinD1、Bcl-2蛋白表达量、Aggrecan、Collagen typeⅡ水平(P<0.05),显著降低细胞凋亡率、p21、Bax蛋白水平、IL-6、TNF-α、IL-8、MMP-3、MMP-9、MMP-13水平(P<0.05)。KCNK15-AS1靶向miR-140-5p抑制miR-140-5p的表达。干扰miR-140-5p表达逆转了抑制KCNK15-AS1表达对OA软骨细胞增殖、ECM合成的促进作用,对细胞凋亡、炎症因子表达的抑制作用。结论:LncRNA KCNK15-AS1通过靶向调控miR-140-5p表达影响OA软骨细胞增殖、凋亡、炎症因子表达及ECM合成。 展开更多
关键词 长链非编码RNA kcnk15-as1 微RNA-140-5p 软骨细胞 增殖 炎症 细胞外基质
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lncRNA FGD5-AS1靶向miR-15a-5p调控LPS诱导的脓毒症细胞损伤 被引量:2
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作者 王春枝 武百强 +4 位作者 吴威 赵艳庚 张娜 唐海霞 杨冬松 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期666-670,675,共6页
目的:探讨长链非编码RNA FGD5-AS1(lncRNA FGD5-AS1)对LPS诱导的脓毒症细胞损伤的影响及分子机制。方法:500 ng/ml脂多糖(LPS)诱导THP-1细胞损伤。THP-1细胞分为对照组、LPS组、pcDNA组、pcDNA-FGD5-AS1组、anti-miR-NC组、anti-miR-15a... 目的:探讨长链非编码RNA FGD5-AS1(lncRNA FGD5-AS1)对LPS诱导的脓毒症细胞损伤的影响及分子机制。方法:500 ng/ml脂多糖(LPS)诱导THP-1细胞损伤。THP-1细胞分为对照组、LPS组、pcDNA组、pcDNA-FGD5-AS1组、anti-miR-NC组、anti-miR-15a-5p组、pcDNA-FGD5-AS1+miR-NC组、pcDNA-FGD5-AS1+miR-15a-5p组。RT-qPCR检测lncRNA FGD5-AS1和miR-15a-5p表达;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot法检测蛋白表达;ELISA检测IL-6、IL-1β、TNF-α水平。双荧光素酶报告实验检测lncRNA FGD5-AS1和miR-15a-5p的靶向关系。结果:与对照组相比,经LPS诱导的THP-1细胞中,lncRNA FGD5-AS1表达降低,miR-15a-5p表达升高(P<0.05)。过表达lncRNA FGD5-AS1和下调miR-15a-5p均能够显著降低细胞凋亡以及炎症细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α表达(P<0.05)。lncRNA FGD5-AS1靶向调控miR-15a-5p表达,上调miR-15a-5p能逆转过表达lncRNA FGD5-AS1对LPS诱导的THP-1细胞凋亡以及炎症细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α的影响(P<0.05)。结论:过表达lncRNA FGD5-AS1通过靶向下调miR-15a-5p表达减轻LPS诱导的THP-1细胞损伤。 展开更多
关键词 lncRNA FGD5-as1 miR-15a-5p LPS THP-1 细胞损伤
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LncRNA SLC16A1-AS1通过靶向miR-15a-5p负向调控子宫颈癌细胞的增殖和侵袭 被引量:2
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作者 卢豪 占稳稳 +5 位作者 熊国平 吴汝芳 胡晓继 韩迎燕 李莉 张庆华 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期514-519,共6页
目的探讨LncRNA SLC16A1-AS1通过靶向miR-15a-5p调控子宫颈癌细胞增殖和侵袭的作用机制。方法采用qRT-PCR法检测SLC16A1-AS1在子宫颈癌组织、癌旁组织、人正常子宫颈上皮细胞(H8)及子宫颈癌细胞株(HeLa、HCC94、SiHa、C33A)中的表达水... 目的探讨LncRNA SLC16A1-AS1通过靶向miR-15a-5p调控子宫颈癌细胞增殖和侵袭的作用机制。方法采用qRT-PCR法检测SLC16A1-AS1在子宫颈癌组织、癌旁组织、人正常子宫颈上皮细胞(H8)及子宫颈癌细胞株(HeLa、HCC94、SiHa、C33A)中的表达水平。选择SLC16A1-AS1表达最少的子宫颈癌细胞株,分别转染阴性质粒和SLC16A1-AS1过表达质粒,标记为NC组和SLC16A1-AS1组。应用MTT法和Transwell实验分别检测过表达SLC16A1-AS1对子宫颈癌细胞增殖和侵袭能力的影响。生物信息学网站预测及双荧光素酶报告基因实验,验证SLC16A1-AS1与靶基因的靶向关系。qRT-PCR和Western blot法检测靶基因及相关蛋白的表达。结果子宫颈癌组织中SLC16A1-AS1的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.01)。与H8细胞相比,HeLa、HCC94、SiHa、C33A细胞中SLC16A1-AS1的表达水平降低(P<0.05)。与NC组相比,过表达SLC16A1-AS1的C33A细胞增殖能力降低(P<0.05),过表达SLC16A1-AS1的C33A细胞侵袭数下降(P<0.01)。生物信息学网站预测显示,SLC16A1-AS1可与miR-15a-5p有特异性结合位点。双荧光素酶报告基因实验结果证实SLC16A1-AS1可与miR-15a-5p直接结合(P<0.01)。SLC16A1-AS1可负向调控miR-15a-5p的表达(P<0.01)。与NC组相比,SLC16A1-AS1组细胞增殖表型蛋白(如PCNA、Ki-67)和细胞侵袭表型蛋白(如N-cadherin、Slug)表达均降低。结论SLC16A1-AS1在子宫颈癌中低表达,SLC16A1-AS1通过靶向下调miR-15a-5p的表达,抑制子宫颈癌细胞C33A的增殖和侵袭。 展开更多
关键词 子宫颈肿瘤 细胞增殖 细胞侵袭 SLC16A1-as1 miR-15a-5p
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lncRNA ZSWIM8-AS1对结直肠癌细胞RKO增殖、凋亡、迁移和放射敏感性的影响
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作者 侯歌 张家杰 +5 位作者 肖陈虎 宋锐 黄洋洋 袁金金 柴婷 刘宗文 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2021年第4期485-492,共8页
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)ZSWIM8-AS1对结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移和放射敏感性的影响及作用机制。方法:选取25例结直肠癌组织和对应的癌旁组织,采用qRT-PCR法检测组织中ZSWIM8-AS1和miR-15b表达水平。体外培养结直肠癌细胞RKO... 目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)ZSWIM8-AS1对结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移和放射敏感性的影响及作用机制。方法:选取25例结直肠癌组织和对应的癌旁组织,采用qRT-PCR法检测组织中ZSWIM8-AS1和miR-15b表达水平。体外培养结直肠癌细胞RKO,双荧光素酶报告基因实验验证ZSWIM8-AS1和miR-15b调控关系。分组培养RKO细胞(pcDNA组、pcDNA-ZSWIM8-AS1组、anti-miR-NC组、anti-miR-15b组、pcDNA-ZSWIM8-AS1+miR-NC组和pcDNA-ZSWIM8-AS1+miR-15b组),采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测各组细胞存活率,双染法检测各组细胞凋亡率,Transwell小室检测各组细胞迁移,克隆形成实验检测各组细胞放射敏感性,Western blot法检测各组细胞中Ki-67、Cleaved Caspase-3、N-cadherin、E-cadherin的蛋白表达水平。结果:与癌旁组织比较,结直肠癌组织中ZSWIM8-AS1表达降低(P<0.001),miR-15b表达升高(P<0.001)。ZSWIM8-AS1在RKO细胞中负调控miR-15b表达。与pcDNA组或anti-miR-NC组比较,pcDNA-ZSWIM8-AS1组和anti-miR-15b组细胞存活率、迁移数及Ki-67和N-cadherin蛋白表达均降低(P均<0.001),凋亡率及Cleaved Caspase-3和E-cadherin蛋白表达升高(P均<0.001),增敏比分别为1.747、1.977。与pcDNA-ZSWIM8-AS1+miR-NC组比较,pcDNA-ZSWIM8-AS1+miR-15b组细胞存活率、迁移数及Ki-67和N-cadherin蛋白表达升高(P均<0.001),凋亡率及Cleaved Caspase-3和E-cadherin蛋白表达降低(P均<0.001),增敏比为0.645。结论:ZSWIM8-AS1在结直肠癌组织中表达降低,上调其表达可通过靶向负调控miR-15b抑制结直肠癌细胞RKO增殖和迁移,并促进细胞凋亡和对放射线的敏感性。 展开更多
关键词 结直肠癌 ZSWIM8-as1 miR-15b 放射敏感性 RKO细胞
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6-(4-氯苯氧基)四唑并[5,1-a]酞嗪的核磁共振谱峰归属 被引量:1
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作者 王思宏 张敬东 +3 位作者 尹秀梅 李东浩 阚玉和 胡伟 《波谱学杂志》 CAS 北大核心 2020年第3期390-398,共9页
为确保具有独立知识产权的国家级一类抗癫痫创新候选药物的药品安全,采用500 MHz核磁共振(NMR)技术,结合规范不变原子轨道-核磁共振(GIAO-NMR)量子化学计算方法,对进入临床阶段的抗癫痫药6-(4-氯苯氧基)四唑并[5,1-a]酞嗪的1H NMR、13C ... 为确保具有独立知识产权的国家级一类抗癫痫创新候选药物的药品安全,采用500 MHz核磁共振(NMR)技术,结合规范不变原子轨道-核磁共振(GIAO-NMR)量子化学计算方法,对进入临床阶段的抗癫痫药6-(4-氯苯氧基)四唑并[5,1-a]酞嗪的1H NMR、13C NMR和15N NMR信号进行了归属,从而为安全用药提供了精确结构信息.线性回归对比表明,标度法计算的NMR化学位移与实验值吻合较好. 展开更多
关键词 液体NMR 结构归属 二维NMR 15N NMR 6-(4-氯苯氧基)四唑并[5 1-a]酞嗪 密度泛函理论计算
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渗透性砂岩地层漏失压力预测模型 被引量:13
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作者 邹德永 赵建 +2 位作者 郭玉龙 方满宗 管申 《石油钻探技术》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期33-36,共4页
为了预测渗透性砂岩地层的漏失压力,提高钻井的安全性。根据塑性流体的本构方程和毛细管渗流理论,分析了钻井液(宾汉流体)在井壁泥饼带、地层侵入带和原地层孔隙中的流动特性,分别建立了井壁有无泥饼2种情况下的渗漏压力计算模型。利用... 为了预测渗透性砂岩地层的漏失压力,提高钻井的安全性。根据塑性流体的本构方程和毛细管渗流理论,分析了钻井液(宾汉流体)在井壁泥饼带、地层侵入带和原地层孔隙中的流动特性,分别建立了井壁有无泥饼2种情况下的渗漏压力计算模型。利用建立的数学模型,对崖城13-1-A15井压力衰竭储层段的漏失压力进行了预测,结果表明:井壁上未形成泥饼时,漏失压力当量密度为0.613kg/L;井壁上形成厚度1mm、渗透率小于4×10-5 D的泥饼时,漏失压力当量密度可提高到1.21kg/L以上。崖城13-1-A15井钻井施工中,采用密度1.10kg/L的抗高温Versaclean油基钻井液,没有发生井漏。建立的渗透性砂岩地层漏失压力预测模型,可为渗透性砂岩地层安全钻井提供参考。 展开更多
关键词 渗透性漏失 漏失压力 高渗透地层 钻井液 数学模型 崖城13-1-a15 WELL YC13-1-a15
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Microstructure and mechanical properties of AlSi10Cu3 alloy with (La+Yb) addition processed by heat treatment 被引量:4
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作者 闫洪 陈凡荟 李正华 《Journal of Rare Earths》 SCIE EI CAS CSCD 2016年第9期938-944,共7页
The optical microscopy, scanning electron microscopy (SEM) and energy-dispersive spectrometry (EDS) were used to as-sess the influence of micro-addition of (La+Yb) on the microstructure and mechanical performan... The optical microscopy, scanning electron microscopy (SEM) and energy-dispersive spectrometry (EDS) were used to as-sess the influence of micro-addition of (La+Yb) on the microstructure and mechanical performance of the AlSi10Cu3 alloy in heat treatment conditions. It was shown that the appropriate (La+Yb)addition (0.3 wt.% or 0.6 wt.%) transformed the needle-likeβ-Al5FeSi phase into Chinese script or sphericalα-Al8Fe2Si phase. Eutectic silicon refined the long needle-like particles into granular or round particles at 0.6 wt.% (La+Yb) content. Moreover, the La3Al11 and YbAl3 phases acted as strengthening phases during the heat treatment processing in the alloy with the addition of (La+Yb). Consequently, the alloy with 0.6 wt.% (La+Yb) exhibited an en-hanced mechanical properties response with ultimate tensile strength, elongation, and hardness at 69.35%, 113.26% and 23.61% higher than those of the unmodified alloy, respectively. Further addition (0.9 wt.%) of (La+Yb) resulted in the increasing of the black acicular RE-rich intermetallics during heat treatment, which could aggravate the situation of stress concentration leading to deteriora-tion of the mechanical properties of alloy. 展开更多
关键词 A1Si10Cu3 (La+Yb) heat treatment eutectic Si β-a15FeSi α-a18Fe2Si mechanical properties rare earths
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