长链非编码核糖核酸KCNQ1重叠转录物1、Runt相关转录因子3与急性心肌梗死的关系

目的 探讨急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者血清长链非编码RNA KCNQ1重叠转录物1(long non-coding RNA KCNQ1 overlapping transcript 1,lncRNA KCNQ1OT1)、Runt相关转录因子3(Runt-related transcription factor 3,Runx3)表达水平及意义。方法 选取2019年1月至2020年4月在德阳市人民医院住院治疗的231例AMI患者为研究对象(AMI组),AMI患者按美国纽约心脏病协会心功能分级标准分为Ⅱ级组72例、Ⅲ级组81例、Ⅳ级组78例;同期选取229例健康体检者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(realtime fluorescence quantitative polymerase chain reaction,fqRT-PCR)法检测血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3表达水平;酶联免疫吸附(ELISA)法检测氨基末端脑钠肽前体(N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzymes,CK-MB)、心肌肌钙蛋白(cardiac troponin,cTn)I、肌红蛋白(myoglobin,MYO)浓度;超声心动图检查左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左心室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic diameter,LVEDD)、左心室收缩末期内径(left ventricular end-systolic diameter,LVESD);分析AMI患者血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3表达水平与心功能指标的相关性;分析血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3表达水平对AMI的诊断价值;分析影响AMI发生的因素。结果AMI组患者lncRNA KCNQ1OT1(1.54±0.36 vs. 1.01±0.26)、LVESD[(52.68±6.74)mm vs.(42.73±6.52)mm]、LVEDD[(61.79±6.03)mm vs.(51.62±5.32)mm]、NT-proBNP[(292.23±34.27)ng/L vs.(96.27±23.42)ng/L]、CK[(746.82±210.55)U/L vs.(70.32±15.48)U/L]、CK-MB[(156.95±49.87)U/L vs.(1.25±0.37)U/L]、cTnI[(27.48±7.92)ng/mL vs.(1.13±0.26)ng/mL]、MYO[(678.94±159.78)ng/mL vs.(12.45±2.73)ng/mL]浓度高于对照组,Runx3(0.67±0.20 vs.1.02±0.24)、LVEF(43.26%±4.31%vs. 56.38%±5.12%)低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。心功能Ⅳ级组lncRNA KCNQ1OT1、LVESD、LVEDD、NT-proBNP、CK、CK-MB、cTnI、MYO高于Ⅲ级组和Ⅱ级组,Runx3、LVEF低于Ⅲ级组和Ⅱ级组,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅲ级组lncRNA KCNQ1OT1、LVESD、LVEDD、NT-proBNP、CK、CK-MB、cTnI、MYO高于Ⅱ级组,Runx3、LVEF低于Ⅱ级组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3表达水平与病变支数、Gensini积分有关,且随着病变支数、Gensini积分增加,lncRNA KCNQ1OT1表达水平升高、Runx3表达水平降低(P<0.05)。AMI患者血清lncRNA KCNQ1OT1与Runx3表达水平呈负相关(r=-0.584;P<0.05);lncRNA KCNQ1OT1与LVESD、LVEDD、NT-proBNP、CK、CK-MB、cTnI、MYO呈正相关,与LVEF呈负相关(P<0.05);Runx3与LVESD、LVEDD、NT-proBNP、CK、CK-MB、cTnI、MYO呈负相关,与LVEF呈正相关(P<0.05)。血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3水平诊断AMI的曲线下面积(AUC)分别为0.859、0.743,特异度分别为81.6%、74.7%,敏感度分别为76.1%、78.3%;两者联合诊断的曲线下面积为0.901,特异度为92.0%,敏感度为73.9%。lncRNA KCNQ1OT1是影响AMI发生的独立危险因素(P<0.05),Runx3是影响AMI发生的保护因素(P<0.05)。结论 血清lncRNA KCNQ1OT1、Runx3参与AMI的发生、发展,二者表达水平对AMI的诊断可能具有重要意义。

糖尿病肾病患者血清LncRNA KCNQ1OT1、miR-192-5p与白蛋白尿短期进展及预后的关系

目的分析糖尿病肾病(DN)患者血清长链非编码RNA KCNQ1反向链/反义转录物1(LncRNA KCNQ1OT1)、微小核糖核酸-192-5p(miR-192-5p)与白蛋白尿短期进展及预后的关系。方法选取2021年4月—2022年12月康复大学青岛中心医院/青岛市中心医院内分泌风湿免疫科收治的DN患者102例为观察组,根据2次检测(间隔6个月)24 h尿白蛋白及SCr水平分为未进展亚组(n=78)和进展亚组(n=24),根据随访1年预后情况分为预后良好亚组(n=84)和预后不良亚组(n=18),选择同期医院健康体检者58例为健康对照组。采用qRT-PCR检测血清LncRNA KCNQ1OT1、miR-192-5p相对表达量;Pearson法分析LncRNA KCNQ1OT1与miR-192-5p的相关性;多因素Logistic回归分析患者白蛋白尿短期进展的影响因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LncRNA KCNQ1OT1,miR-192-5p对患者预后的预测价值。结果与健康对照组比较,观察组血清LncRNA KCNQ1OT1水平升高,miR-192-5p水平降低(t/P=17.619/<0.001、16.120/<0.001);与未进展亚组比较,进展亚组血清LncRNA KCNQ1OT1水平升高,miR-192-5p水平降低(t/P=7.698/<0.001、9.485/<0.001);与未进展亚组比较,进展亚组患高血压比例降低及FPG、HbA_(1c)、BUN、SCr升高,差异均有统计学意义(χ^(2)/P=9.835/0.002,t/P=2.593/0.011、2.356/0.020、4.582/<0.001、3.139/0.002);与预后良好亚组比较,预后不良亚组血清LncRNA KCNQ1OT1水平升高,miR-192-5p水平降低(t/P=7.602/<0.001,9.380/<0.001);LncRNA KCNQ1OT1与miR-192-5p呈负相关(r/P=-0.452/<0.001);高血压、血清LncRNA KCNQ1OT1水平升高为患者白蛋白尿短期进展的危险因素[OR(95%CI)=1.532(1.058~2.219)、1.638(1.100~2.438)],miR-192-5p水平升高为患者白蛋白尿短期进展的保护因素[OR(95%CI)=0.671(0.517~0.871)];LncRNA KCNQ1OT1、miR-192-5p以及二者联合预测患者预后的AUC分别为0.808、0.822、0.896,联合预测显著优于各自单独预测(Z/P=2.030/0.042、2.116/0.034)。结论DN患者血清LncRNA KCNQ1OT1水平升高,miR-192-5p水平降低,两者均为DN患者发生白蛋白尿短期进展的影响因素,且对患者预后具有一定辅助预测价值。

长链非编码RNA KCNQ1重叠转录物1对肺鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的 检测长链非编码RNA(lncRNA)KCNQ1重叠转录物1(KCNQ1OT1)在肺鳞癌组织中的表达及其对肺鳞癌NCI-H266细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法 采用实时定量荧光PCR(RT-PCR)检测KCNQ1OT1基因在肺鳞癌组织中的表达。构建KCNQ1OT1基因的小干扰RNA(siRNA-KCNQ1OT1)并转染NCI-H266细胞,RT-PCR检测转染效果;MTT法检测NCI-H266细胞的增殖活力;划痕实验检测NCI-H266细胞的迁移能力;Transwell小室检测NCI-H266细胞的侵袭能力。结果 KCNQ1OT1基因在肺鳞癌组织中呈显著高表达(P<0.05),KCNQ1OT1的高表达与肺鳞癌分化程度、肿瘤体积、淋巴结转移以及TNM分期相关。si-KCNQ1OT1的转染能够显著下调NCI-H266细胞中KCNQ1OT1的表达(P<0.05),沉默KCNQ1OT1能够显著抑制NCI-H266细胞的增殖活力、迁移能力、侵袭能力(P<0.05)。结论 KCNQ1OT1基因的表达上调与肺鳞癌的发生、发展相关,沉默KCNQ1OT1能够显著抑制NCI-H266细胞的增殖以及迁移和侵袭能力。

下调长链非编码RNA KCNQ1重叠转录物1表达对胃癌HGC-27细胞生长和顺铂敏感性的影响

背景胃癌(gastric cancer,GC)已成为威胁人类生命安全的恶性肿瘤之一,目前GC发生及发展的分子机制尚未完全阐明,长链非编码RNA(long-chain noncoding RNA,lncRNA)在肿瘤中异常表达并可能参与肿瘤发生及发展过程,但仍有部分lncRNA在GC发生及转移过程中的调控作用尚未阐明.目的探讨lncRNA KCNQ1重叠转录物1(KCNQ1 opposite strand/antisense transcript 1,KCNQ1OT1)对HGC-27细胞增殖、侵袭、迁移和顺铂敏感性的影响.方法将转染KCNQ1OT1-siRNA的HGC-27细胞作为KCNQ1OT1-siRNA组,转染阴性对照的HGC-27细胞作为NC-siRNA组,正常培养的细胞作为对照组.顺铂处理KCNQ1OT1-siRNA组、NC-siRNA组细胞后,采用细胞计数试剂盒法检测细胞活力并计算细胞的半数抑制浓度(half-maximal inhibitory concentration,IC50)值.采用实时荧光定量聚合酶链式反应、Transwell小室、流式细胞仪和免疫印迹法分别检测KCN Q1OT1表达水平、细胞增殖活力、侵袭与迁移、周期分布和细胞中上皮型钙黏蛋白(E-cadlherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药关联蛋白1 (multidrug resistance associated protein1,MRP1)表达情况.结果与对照组比较,NC-siRNA组中各指标差异无统计学意义(P>0.05);与对照组或NC-siRNA组比较,KCNQ1OT1-siRNA组细胞中KCNQ1OT1表达水平、细胞在S期与G2/M期所占百分比和细胞增殖、侵袭、迁移能力以及细胞中N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平均明显降低,而细胞在G0/G1期所占百分比和E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与NCsiRNA组比较,KCNQ1OT1-siRNA组P-gp蛋白水平显著降低(P<0.05),MRP1蛋白水平显著升高(P<0.05),IC50值明显降低(P<0.05).结论下调KCNQ1OT1表达可抑制HGC-27细胞增殖、侵袭、迁移并增强细胞对顺铂的敏感性.

上皮性卵巢癌患者血清LncRNA KCNQ1OT1、 miR-506-3p水平变化及临床意义

目的 探讨上皮性卵巢癌(EOC)患者血清长链非编码核糖核酸(RNA)KCNQ1重叠转录物1(LncRNA KCNQ1OT1)、miR-506-3p水平变化。方法 选取2019年3月至2020年12月南京医科大学附属无锡人民医院收治的102例EOC患者作为EOC组,70例良性卵巢肿瘤患者作为良性组,以及体检的60例健康女性作为对照组。分析各组血清LncRNA KCNQ1OT1、miR-506-3p对EOC的诊断价值,以及EOC患者2年生存率、预后影响因素。结果 3组LncRNA KCNQ1OT1、miR-506-3p相对表达量比较差异有统计学意义(P<0.05)。EOC患者LncRNA KCNQ1OT1、miR-506-3p表达与国际妇产科学联盟(FIGO)分期、分化程度、淋巴结转移、腹膜转移有关(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,LncRNA KCNQ1OT1、miR-506-3p联合诊断EOC的价值较高,ROC曲线下面积(AUC)高于二者单独诊断。LncRNA KCNQ1OT1低表达组2年生存率高于高表达组(P<0.05),miR-506-3p高表达组高于低表达组(P<0.05)。FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移、腹膜转移及血清LncRNA KCNQ1OT1上调、miR-506-3p下调是预后不良的危险因素(P<0.05)。结论 血清LncRNA KCNQ1OT1在EOC中上调、miR-506-3p下调,二者联合检测对EOC诊断效能较高,与患者不良预后有关,有望成为辅助评估病情和预后的生物学标志物。

LncRNA KCNQ1OT1靶向miR-9-5p对口腔癌细胞黏附性及活性的影响

目的探究长链非编码RNA钾电压门控通道亚家族Q成员1反向转录物1(LncRNA KCNQ1OT1)靶向miR-9-5p对口腔鳞状细胞癌细胞黏附性及活性的影响。方法体外培养口腔癌SCC25细胞,分别转染LncRNA KCNQ1OT1阴性对照、LncRNA KCNQ1OT1 siRNA、miR-9-5p阴性对照、miR-9-5p siRNA、LncRNA KCNQ1OT1 siRNA和miR-9-5p siRNA,分别记为KCNQ1OT1-NC组、KCNQ1OT1组、miR-9-5p-NC组、miR-9-5p组,KCNQ1OT1+miR-9-5p组及口腔癌组;采用RT-PCR检测各组细胞的LncRNA KCNQ1OT1及miR-9-5p水平,MTT法检测细胞吸光度(OD)值,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测细胞中CD44S及CD44V5蛋白表达;通过双荧光素酶报告证实LncRNA KCNQ1OT1与miR-9-5p靶向关系。结果KCNQ1OT1组LncRNA KCNQ1OT1水平低于口腔癌组(P<0.05),miR-9-5p组miR-9-5p水平低于口腔癌组(P<0.05);与口腔癌组相比,KCNQ1OT1组、miR-9-5p组、KCNQ1OT1+miR-9-5p组细胞OD值、CD44S及CD44V5蛋白降低,细胞凋亡率升高(P<0.05),且以KCNQ1OT1+miR-9-5p组效果最为显著(P<0.05);双荧光素酶报告结果显示,miR-9-5p是LncRNA KCNQ1OT1的靶基因。结论LncRNA KCNQ1OT1可通过调控miR-9-5p表达从而降低口腔鳞状细胞癌细胞黏附性,抑制口腔鳞状细胞癌细胞增殖,诱导其凋亡。

长链非编码RNAβ分泌酶1反义转录物在七氟醚诱发老年大鼠认知功能下降中的作用

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)β分泌酶1反义转录物(BACE1-AS)在七氟醚诱发老年大鼠认知功能下降中的作用。方法SPF级健康雄性SD老年大鼠64只,18月龄,体重480~580 g。采用随机数字表法分为四组:对照组(C组)、七氟醚组(S组)、七氟醚+阴性对照质粒组(SN组)和七氟醚+BACE1-AS抑制剂(siRNA-BACE1-AS)组(ST组),每组16只。SN组和ST组分别侧脑室注射阴性对照质粒和siRNA-BACE1-AS,C组和S组注射等体积PBS溶液,注射后1 d C组吸入30%氧气6 h,S组、SN组和ST组吸入3.6%七氟醚与30%氧气的混合气体6 h。气体吸入后1 d,采用水迷宫实验测实验第1~5天逃避潜伏期和实验第6天穿越平台次数。水迷宫实验结束后1 h内处死大鼠,取海马组织,采用ELISA法检测海马组织TNF-α、IL-1β、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)浓度,可见分光光度计法检测海马组织caspase-3活性,Western blot法检测海马组织Bax、Bcl-2和BACE1蛋白含量,RT-qPCR法检测海马组织lncRNA BACE1-AS、miR-124和BACE1 mRNA表达量,TUNEL法测定海马组织神经细胞凋亡百分比,苏木素伊红染色法观察海马组织病理结构。结果与C组比较,S组、SN组和ST组水迷宫实验第3~5天逃避潜伏期明显延长(P<0.05),实验第6天穿越平台次数明显减少(P<0.05),海马组织TNF-α、IL-1β和MDA浓度、BACE1和Bax蛋白含量、lncRNA BACE1-AS和BACE1 mRNA表达量、凋亡细胞百分比明显升高(P<0.05),SOD浓度、Bcl-2蛋白含量、miR-124 mRNA表达量明显降低(P<0.05),caspase-3活性明显增强(P<0.05)。与S组比较,ST组水迷宫实验第3~5天逃避潜伏期明显缩短(P<0.05),实验第6天穿越平台次数明显增多(P<0.05),海马组织TNF-α、IL-1β和MDA浓度、BACE1和Bax蛋白含量、lncRNA BACE1-AS和BACE1 mRNA表达量、凋亡细胞百分比明显降低(P<0.05),SOD浓度、Bcl-2蛋白含量、miR-124 mRNA表达量明显升高(P<0.05),caspase-3活性明显减弱(P<0.05)。S组和SN组上述指标差异均无统计学意义。结论长链非编码RNAβ分泌酶1反义转录物参与七氟醚诱导老年大鼠认知功能下降,其机制与神经细胞炎症、氧化应激损伤、调控miR-124和BACE1表达和促进细胞凋亡有关。

lncRNA KCNQ1OT1的生物学功能及其在人类疾病中的研究进展

长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)是长度超过200个核苷酸的转录本,在人类各种疾病的发生发展过程中发挥着至关重要的作用。研究表明,lncRNA KCNQ1重叠转录物1(KCNQ1 opposite strand/antisense transcript 1,KCNQ1OT1)在癌症、心脑血管疾病、糖尿病等疾病中表达异常。KCNQ1OT1作为竞争性内源RNA(Competing endogenous RNA,ceRNA),通过与微RNA(MicroRNA,miRNA)相互作用参与多种生理和病理过程,包括细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡等。本文就lncRNA KCNQ1OT1在人类疾病中的生物学功能和分子机制进行综述。

LncRNA KCNQ1OT1通过调控miR-506-3p表达调节喉鳞状细胞癌细胞的生物学行为

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)KCNQ1重叠转录物1(KCNQ1OT1)对喉鳞状细胞癌细胞生物学的影响及作用机制。方法于2019年5月至2020年2月,采用RT-qPCR法检测了45例来自山东大学齐鲁医院桓台分院喉鳞状细胞癌病人的癌组织和癌旁组织及购自上海研生实业有限公司的人胚肺成纤维细胞WI-38和购自中国科学院上海细胞库的喉鳞状细胞癌细胞系(EV-SCC-18、AMC-HN-8和HCC345)中KCNQ1OT1和miR-506-3p表达。以HCC345细胞为研究对象,转染KCNQ1OT1小干扰RNA或共转染KCNQ1OT1小干扰RNA与miR-506-3p抑制剂至HCC345细胞后,MTT法、流式细胞术、Transwell分别检测细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭。双荧光素酶报告基因实验验证KCNQ1OT1与miR-506-3p的调控关系。结果喉鳞状细胞癌组织中KCNQ1OT1表达高于癌旁组织[(0.81±0.09)比(0.27±0.08)],miR-506-3p表达低于癌旁组织[(0.24±0.08)比(0.83±0.09)]。喉鳞状细胞癌细胞系(EV-SCC-18、AMC-HN-8和HCC345)中KCNQ1OT1表达均高于WI-38细胞[(2.44±0.22)、(2.69±0.21)、(3.61±0.24)比(1.00±0.13)],miR-506-3p表达均低于WI-38细胞[(0.41±0.13)、(0.30±0.12)、(0.22±0.11)比(1.00±0.12)]。与未敲减KCNQ1OT1的HCC345细胞比较,敲减KCNQ1OT1的HCC345细胞活力[(0.41±0.06)比(0.81±0.12)]、迁移数[(86.32±15.21)个比(162.31±20.23)个]和侵袭数[(65.23±12.05)个比(140.26±18.27)个]均降低,细胞凋亡率升高[(34.13±3.60)%比(3.79±2.37)%]。KCNQ1OT1在HCC345细胞中负调控miR-506-3p表达。敲减miR-506-3p逆转敲减KCNQ1OT1对HCC345细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。结论KCNQ1OT1在喉鳞状细胞癌组织和细胞系中表达升高,其通过靶向miR-506-3p促进喉鳞状细胞癌细胞的恶性生物学行为。

lncRNA KCNQ1OT1在结肠癌细胞中的促癌功能和下游调控通路研究

目的明确lncRNA KCNQ1OT1在结肠癌HCT-116和HT-29细胞中的功能,探讨其作用的分子机制。方法在结肠癌HCT-116和HT-29细胞系中转染KCNQ1OT1的过表达质粒及空白对照,siRNA干扰KCNQ1OT1及空白对照;分别在两个细胞系中进行CCK8、划痕实验、Transwell、细胞侵袭实验以验证KCNQ1OT1对细胞功能的影响;免疫共沉淀(RNA immune precipitation,RIP)和双荧光素酶标记实验分别验证KCNQ1OT1与miR-125a-5p的特异结合以及miR-125a-5p和SMURF1蛋白的特异结合。过表达和敲低KCNQ1OT1、miR-125a-5p后,Western hlot验证SMURF1的表达;完成过表达KCNQ1OT1同时过表达miR-125a-5p、敲低KCNQ1OT1同时敲低miR-125a-5p后检测SMURF1表达情况的Resecue实验,验证KCNQ1OT1与miR-125a-5p的调控关系。结果在结肠癌HCT-116和HT-29细胞中,过表达的KCNQ1OT1能促进结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭;KCNQ1OT1敲低后,结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭受抑制;miR-125a-5p与KCNQ1OT1及SMURF1均能特异性结合;过表达KCNQ1OT1促进SMURF1的表达,敲低KCNQ1OT1抑制SMURF1的表达;过表达miR-125a-5p抑制SMURF1的表达,敲低miR-125a-5p促进SMURF1的表达;过表达KCNQ1OT1的基础上同时表达miR-125a-5p能显著抑制SMURF1的表达,敲低KCNQ1OT1的基础上同时敲低miR-125a-5p能促进SMURF1的表达。结论在结肠癌细胞中,lncRNA KCNQ1OT1通过KCNQ1OT1-miR-125a-5p-SMURF1调控轴,促进结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

长链非编码RNA在急性肺损伤中的作用及分子调控机制研究进展

急性肺损伤(ALI)是临床上常见的危重症之一。长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度超过200个核苷酸的非蛋白质编码RNA,在染色质形成、转录和转录后翻译等基因表达水平直接或间接参与ALI的发生发展。lncRNA核富集丰富转录物1、lncRNA HOX转录反义基因间RNA及lncRNA牛磺酸上调1等lncRNA可作为竞争性内源RNA,与miR-26a-5p、miR-17-5p及miR-34b-5p等微小RNA结合,调节Wnt1诱导的信号通路蛋白1、Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1蛋白及自噬相关蛋白等下游相关蛋白的表达,参与ALI的发生发展。LncRNA可能通过调控DNA甲基化、组蛋白修饰,在表观遗传水平参与ALI的发生发展;L通过组装转录激活因子和抑制因子,调节白细胞介素6(IL-6)、IL-17、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3/9等蛋白质的转录,在转录水平参与ALI的发生发展;与多种RNA结合蛋白相互作用,在转录后水平调控ALI的发生发展。

胶质瘤组织lncRNA HOTAIRM1、miR-129-5p表达变化及其临床意义

目的探讨胶质瘤组织长链非编码RNA(lncRNA)HOXA反义转录物髓系异构体1(HOTAIRM1)、微小RNA-129-5p(miR-129-5p)表达变化及其临床意义。方法选择胶质瘤患者83例(观察组)、因颅脑损伤接受手术治疗者55例(对照组),分别取手术切除的胶质瘤组织和正常脑组织,采用RT-qPCR法检测lncRNA HOTAIRM1、miR-129-5p表达,分析胶质瘤组织lncRNA HOTAIRM1表达与miR-129-5p表达的关系,以及二者表达与患者临床病理特征和预后的关系。结果观察组lncRNA HOTAIRM1相对表达量高于对照组,miR-129-5p相对表达量低于对照组(P均<0.05)。Pearson积矩相关分析显示,胶质瘤组织lncRNA HOTAIRM1相对表达量与miR-129-5p相对表达量呈负相关关系(r=-0.726,P<0.05)。分别以胶质瘤组织lncRNA HOTAIRM1、miR-129-5p相对表达量的中位数为临界值,将患者分为lncRNA HOTAIRM1低表达者40例与lncRNA HOTAIRM1高表达者43例、miR-129-5p低表达者46例与miR-129-5p高表达者37例。lncRNA HOTAIRM1、miR-129-5p表达与肿瘤直径和WHO分级有关(P均<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤位置、病理类型无关(P均>0.05)。lncRNA HOTAIRM1高表达者累积生存时间低于lncRNA HOTAIRM1低表达者,而miR-129-5p高表达者累积生存时间高于miR-129-5p低表达者(P均<0.05)。结论胶质瘤组织lncRNA HOTAIRM1表达上调、miR-129-5p表达下调,二者表达变化与肿瘤直径、WHO分级和患者预后密切相关。

胃癌组织lncRNA MAFG-AS1、miR-143-3p表达变化及其临床意义

目的观察胃癌组织长链非编码RNA(lncRNA)碱性亮氨酸拉链家族转录因子V-Maf鸟类肌筋膜纤维肉瘤癌基因同源物G-反义核糖核酸1(MAFG-AS1)、微小RNA-143-3p(miR-143-3p)表达变化,并探讨二者表达与患者临床病理特征和预后的关系。方法选择胃癌患者105例,取手术切除的胃癌组织及其配对的癌旁正常组织,采用RT-qPCR技术检测lncRNA MAFG-AS1、miR-143-3p表达。收集胃癌患者临床病理资料和术后随访资料,分析胃癌组织lncRNA MAFG-AS1、miR-143-3p表达与患者临床病理特征和预后的关系。结果胃癌组织lncRNA MAFG-AS1相对表达量高于癌旁正常组织,miR-143-3p相对表达量低于癌旁正常组织(P均<0.05)。胃癌组织lncRNA MAFG-AS1、miR-143-3p表达与肿瘤组织分化程度、浸润深度、pTNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05),而与性别、年龄、肿瘤直径无关(P均>0.05)。胃癌组织lncRNA MAFG-AS1表达与miR-143-3p表达呈负相关关系(r=-0.699,P<0.05)。以lncRNA MAFG-AS1、miR-143-3p相对表达量的均数为临界值,将患者分为lncRNA MAFG-AS1高表达者55例与lncRNA MAFG-AS1低表达者50例、miR-143-3p高表达者48例与miR-143-3p低表达者57例。lncRNA MAFG-AS1高表达者3年总生存率低于lncRNA MAFG-AS1低表达者,miR-143-3p高表达者3年总生存率高于miR-143-3p低表达者(χ^(2)分别为4.783、5.383,P均<0.05)。结论胃癌组织lncRNA MAFG-AS1表达上调、miR-143-3p表达下调,二者表达变化与胃癌恶性生物学行为和患者预后不良有关。

血清LncRNA OSER1-AS1及HOTAIR表达与原发性肝细胞癌病理特征及预后的相关性分析

目的探讨原发性肝细胞癌(HCC)患者血清长链非编码RNA(LncRNA)OSER1-AS1及LncRNA HOX转录物反义RNA(HOTAIR)的表达情况及其与病理特征和预后的相关性。方法选取2016年6月至2019年6月华北理工大学附属医院行R0切除术的92例原发性HCC患者作为HCC组,另选取同期体检的100例健康志愿者作为对照组。采集HCC组术前血清标本及对照组血清标本,收集HCC肿瘤组织及癌旁组织,检测LncRNA OSER1-AS1及LncRNA HOTAIR表达水平。随访HCC患者的术后总生存情况和无病生存情况。结果HCC组术前血清LncRNA OSER1-AS1及LncRNA HOTAIR表达水平高于对照组(P<0.05)。HCC组织LncRNA OSER1-AS1及LncRNA HOTAIR表达水平高于癌旁组织(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析,血清LncRNA OSER1-AS1及LncRNA HOTAIR表达水平对HCC具有诊断价值,截断值分别为1.098(灵敏度70.00%、特异度69.69%)及1.066(灵敏度67.50%、特异度69.57%)。HCC组血清LncRNA OSER1-AS1及LncRNA HOTAIR表达水平与病理分级、临床分期、脉管浸润有关(P<0.05)。LncRNA OSER1-AS1≥1.098、LncRNA HOTAIR≥1.066的HCC患者累积总生存率及累积无病生存率均低于LncRNA OSER1-AS1<1.098、LncRNA HOTAIR<1.066的HCC患者(P<0.05)。结论HCC患者血清LncRNA OSER1-AS1及LncRNA HOTAIR高表达,且与病理进展、预后不良有关。

lncRNA KCNQ1OT1缓解LPS诱导的肺炎症损伤

为探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)KCNQ1对链/反义转录本1(KCNQ1 opposite strand/antisense transcript 1,KCNQ1OT1)在脓毒症急性肺损伤(acute lung injury,ALI)炎症反应中的作用及其可能机制,腹腔注射LPS(10 mg/kg)建立脓毒症ALI大鼠模型,体外建立LPS诱导的人小气道上皮细胞(human small airway epithelial cell,HSAEC)。采用ELISA检测肺组织中TNF-α、IL-6和IL-1β的相对水平,qRT-PCR和Western blotting检测KCNQ1OT1、miR-192-5p和凋亡相关蛋白(Caspase-3、Bax)的表达水平,CCK-8试验检测细胞增殖情况,生物信息学方法、双荧光素酶报告基因试验分别预测和验证KCNQ1OT1与miR-192-5p的相互作用。结果显示,脓毒症模型HSAEC中KCNQ1OT1显著下调,miR-192-5p显著上调(P<0.05)。KCNQ1OT1直接靶向miR-192-5p并负调控后者的表达。过表达KCNQ1OT1促进HSAEC的增殖,抑制细胞凋亡,而敲低KCNQ1OT1则发挥相反的作用(P<0.05)。该研究提示,KCNQ1OT1可通过抑制miR-192-5p表达减轻脓毒症ALI的炎症反应。