缺氧预处理调节间充质干细胞中的赖氨酸巴豆酰化改善其缺氧存活和增殖

缺氧预处理能提高间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在缺血缺氧环境中存活,但其具体机制仍未深入探讨。本研究旨在确定赖氨酸巴豆酰化调节外周血间充质干细胞(peripheral blood mesenchymal stem cells,PBMSCs)在缺氧培养中存活和增殖中的作用。从大鼠外周血单个核细胞中分离、培养得到PBMSCs,流式细胞仪鉴定其表面标志。首先将PBMSCs进行缺氧/常氧预处理:缺氧(1%O_(2))或常氧(21%O_(2))培养24 h。然后将预处理的PBMSCs移至缺氧培养箱(37℃、94%N2、5%CO_(2)、1%O_(2))内持续缺氧培养72 h。观察不同时间点(预处理前、后,持续缺氧培养后24 h、48 h、72 h)PBMSCs凋亡和增殖情况。为确定赖氨酸巴豆酰化(lysine crotonylation,Kcr)对PBMSCs增殖和存活的影响,将预处理的细胞随机加入巴豆酸钠(NaCr)或其溶剂(DMSO),并行缺氧培养72 h,使用免疫印迹方法检测赖氨酸巴豆酰化修饰,应用qRT-PCR和Western印迹检测凋亡相关因子Bcl2、Bax和胱天蛋白酶3 mRNA和蛋白质表达情况。与常氧预处理组比较,缺氧预处理明显增加PBMSCs数量(3.53×10^(5)vs 0.03×10^(5),P<0.001),使其活力增加1.3倍(P<0.001);明显降低细胞凋亡率(缺氧培养48 h,缺氧预处理组9.9±2.1%vs常氧预处理组29.6±3.1%,P<0.001;缺氧培养72 h,缺氧预处理组12.1±2.2%vs常氧预处理组43.3±6.0%,P<0.001)。进一步研究发现,缺氧预适应会促进NaCr诱导的巴豆酰化水平;在缺氧预处理的PBMSCs中Bcl2表达水平明显高于常氧预处理组(P<0.001),而Bax和胱天蛋白酶3表达水平明显低于常氧预处理组(P<0.001)。我们的研究结果表明,凋亡相关蛋白质Kcr可能是缺氧预处理提高PBMSCs抗缺氧凋亡的关键机制,这为提高MSCs抗缺氧生存提供了新的干预策略。

基于K-Means算法的Web日志用户聚类研究

Web日志作为服务器的记录文件,记录了网站最重要的信息,随着大数据时代数据量的骤然增加,提出一种应对大数据量的数据挖掘算法,更有效地分析日志文件迫在眉睫。用户聚类是在对日志文件进行数据预处理的基础上,建立用户会话序列矩阵,进而对其进行聚类分析,论文针对K-Means算法在选取初始中心点上存在的问题,以及在构建用户会话矩阵后存在的孤立点的问题,提出了一种密度参数和KCR算法的优化算法-ICKM算法,该算法利用密度参数最大的对象作为第一中心点,随后从数据集中将此对象删除,利用KCR算法寻找下一个中心点,算法借助MapReduce计算框架,提高大数据环境下的数据处理速度,通过实验表明,ICKM算法在寻找初始中心点以及用户聚类上具有较高的准确度,在处理大数据量的数据集时,有较好的的运算速度。

固溶温度对0Cr32Ni7Mo3N双相不锈钢组织和耐蚀性能的影响

对0Cr32Ni7Mo3N双相不锈钢进行了1 180℃～1 220℃的固溶处理。采用XRD、OM、EDS及电化学工作站研究了固溶温度对材料的显微组织和耐蚀性能的影响。结果表明:随固溶温度的升高,γ相含量逐渐降低,Cr、Mo和Ni在两相中的分布趋于均匀;Cr和Mo在两相的分配系数K_(Cr)和K_(Mo)对材料的耐蚀性起主导作用,K_(Cr)和K_(Mo)随温度的升高逐渐减小,材料的耐蚀性下降。

潮玩盲盒产品的顾客关键需求因素研究

本文基于潮玩盲盒产品在线评论数据的文本挖掘以及对访谈资料的扎根分析,综合凝练潮玩盲盒产品的顾客关键需求因素,构建潮玩盲盒产品消费者购买路径演化模型。基于传统KANO模型对潮玩盲盒产品的顾客需求因素进行KANO分类,并通过Better-Worse系数对其进行二次细分,进一步明确各类属顾客需求因素的优先级。