肺炎支原体CARDS毒素依赖KELED序列调控炎性反应

目的细胞内逆向运输系统是微生物毒素蛋白导致细胞毒性的关键。KELED序列是肺炎支原体CARDS毒素逆向转运至内质网,而后发挥细胞毒性作用的关键氨基酸基序。在小鼠模型中,体外重组的CARDS蛋白可以重现肺炎支原体肺炎患者的特征性症状。然而,CARDS是否依赖于KELED序列调控肺组织炎性反应仍不清楚。方法在大肠杆菌中表达并纯化CARDS及其KELED序列突变蛋白;随后在细胞水平验证其致空泡化活性;最后,在小鼠模型中评价KELED序列突变的CARDS蛋白是否影响炎性因子的表达以及是否造成肺组织病理学损伤。结果KELED序列氨基酸发生突变,减弱CARDS蛋白致细胞空泡化效应,下调肺组织炎性因子mRNA表达,减轻肺组织的病理学损伤。结论KELED序列对CARDS蛋白致细胞空泡化及炎性损伤活性的维持至关重要。

肺炎支原体社区获得性呼吸窘迫综合征毒素及其转运机制的研究

肺炎支原体是引起人类呼吸系统疾病的非典型病原体,能导致包括咽炎、气管支气管炎和社区获得性肺炎(CAP)。它也与气道高反应性、哮喘,甚至急性呼吸窘迫综合征(ARDS)密切相关。在其定植期间,肺炎支原体表达独特的ADP-核糖基化和空泡细胞毒素,被称为社区获得性呼吸窘迫综合征(CARDS)毒素。在CAP患者,哮喘患者和呼吸机相关性肺炎创伤患者中,CAR DS毒素持续存在并定位于气道中,目前研究已明确CARDS毒素与特定的细胞受体结合,被内化,并且诱导气道高反应性,黏液增生和其他气道损伤。但它在细胞内转运的机制仍不清楚。本综述的结果提示CARDS毒素通过早期和晚期细胞核内体和高尔基复合体转运,并集中在核周区达到内质网(ER)。使用ER靶向的SNAP标签证实了CARDS毒素与ER的关联,并确定CARDS毒素遵循逆行途径。此外,研究发现确定了一种新的CARDS毒素氨基酸指纹KELED,这是毒素转运到ER所必需的,即介导细胞毒性的毒素。