心脏发育候选致病基因KIAA0196斑马鱼品系的建立及初步机制研究

目的:探究KIAA0196基因对心脏发育的影响及斑马鱼品系的建立。方法:提取先天性心脏病患者外周血和gDNA,采用拷贝数变异和靶向序列分析筛选出候选致病基因。用CRISPR/Cas9技术建立KIAA0196基因敲除斑马鱼品系。对野生型和突变型斑马鱼进行解剖和组织学染色,观察心脏形态、大小及环化方向等表型。结果:通过CRISPR/Cas9技术成功构建了斑马鱼KIAA0196基因敲除品系。受精后60h,突变个体(杂合子+纯合子)显微镜检查显示心包积液、心脏受压和尾部严重卷曲。突变型斑马鱼与野生型相比,心脏存在心房缩小,心室增大,心肌细胞更加松散等缺陷。结论:KIAA0196基因在心脏发育过程中起重要的调控作用,该基因可能为先天性心脏病的致病候选基因。

一个遗传性痉挛性截瘫家系KIAA0196基因的突变分析与追溯

目的 对1个遗传性痉挛性截瘫家系进行突变分析与追溯.方法 对2例患者和1名健康个体进行全外显子测序,筛选候选致病突变,并在10名家系成员中通过Sanger测序进行验证.结果 4例患者和3名无症状的年轻个体(25岁以下)携带KIAA0196基因c.1771T>C突变,而3名无症状的年长个体(40岁以上)未携带该突变.经SIFT、PolyPhen-2和Mutation Taster软件评估,上述变异对于蛋白质功能的影响分别为“有害”,“很可能损伤”和“致病性”.对3名携带者进行随访,一人在采样1年后(26岁)发病,另两人尚无疾病迹象.结论 KIAA0196基因c.1771T>C位点突变的临床表型具有较大的异质性,该突变可能为遗传性痉挛性截瘫患者常见的致病位点.