KISS-1/GPR54基因及其在生殖中的作用

KISS-1及其受体GPR54基因对青春期的正常启动具有重要作用。青春期开始前后,动物下丘脑中KISS-1和GPR54 mRNA水平很高,Kisspeptins(KISS-1基因产物)通过激活GPR54增加促性腺激素的释放,KISS-1基因的表达受性腺类固醇激素的调控。GPR54基因突变可以导致人和鼠的特发性促性腺激素分泌不足性腺机能减退症和促性腺激素依赖性性早熟。文章还介绍了KISS-1、GPR54基因的结构、表达、多态性以及和其它生殖调控因子之间的相互关系。

KISS-1/GPR54基因在猪繁育性能中的作用概述

KISS-1和GPR54(Kiss-1受体)基因共同作用组成KISS-1/GPR54系统,参与HPGA启动青春期,调节下丘脑分泌Gn RH,并刺激垂体门脉系统分泌LH、FSH对性腺产生作用,刺激雌激素、睾酮等激素合成,进而促使卵子和精子的产生,使个体具备生殖能力,在生殖中起关键调控作用。该文章对这两个基因在猪的繁育性能中的作用进行简述,旨在探讨和挖掘影响猪繁育的遗传机理及作用,为更有效地提高猪场产量及优良繁育猪种的选育提供参考依据。

初情期母牦牛下丘脑kiss-1/GPR54系统基因克隆

应用聚合酶链反应和基因克隆技术,对10头初情期母牦牛下丘脑kiss-1/GPR54系统基因进行扩增和基因克隆。结果表明,kiss-1基因拼接后序列全长为291bp,其中CDS序列长为282bp,序列中碱基组分为腺嘌呤20.62%,鸟嘌呤27.14%,胸腺嘧啶23.37%,胞嘧啶28.87%。共编码95个氨基酸,其中丙氨酸占总氨基酸残基的11.58%,亮氨酸占10.52%,丝氨酸、甘氨酸、脯氨酸各占9.47%。GPR54基因拼接后序列全长为202bp,其中CDS序列长为196bp,序列中碱基组分为腺嘌呤16.34%,鸟嘌呤30.69%,胸腺嘧啶17.82%,胞嘧啶35.15%。GPR54基因共编码66个氨基酸,其中脯氨酸占总氨基酸残基的13.63%,甘氨酸、丝氨酸、丙氨酸各占10.60%,半胱氨酸占9.09%。

五加丹方对去势模型大鼠血清性激素及下丘脑弓状核Kiss-1、GPR54、GnRH基因表达的影响

目的:探讨五加丹方对去卵巢大鼠血清中FSH、E2及下丘脑弓状核组织匀浆Kiss-1、GPR54、GnRH·RNA表达的影响,进一步探讨五加丹方对绝经综合征的作用机制。方法:将64只成年期雌性大鼠随机分为7组,空白组、模型组、中药对照组、西药对照组各10只,五加丹方高、中、低剂量组各8只。除空白组外,其余各组均手术去势。各组灌胃给药每日1次,正常组及模型组给予等剂量生理盐水灌胃每日1次,实验过程中空白组大鼠灌胃死亡1只。连续给药4周后,腹主动脉取血并处死大鼠,脑立体定位留存下丘脑弓状核组织。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清促卵泡激素(FSH)、雌二醇(E2)含量,PCR技术检测各组大鼠下丘脑弓状核Kiss-1、GPR54、GnRH mRNA表达水平。结果:(1)与空白组比较,模型组FSH水平明显升高(P<0.01),E2水平明显下降(P<0.01)。与模型组比较,西药对照组血清E2水平明显升高(P<0.01),五加丹方高剂量组、中剂量组、中药对照组血清E2水平也明显升高(P<0.05)。各给药组血清FSH含量均下降,五加丹方高剂量组与西药对照组下降明显(P<0.01),中药对照组、五加丹方中剂量组、低剂量组也明显降低(P<0.05)。(2)与空白组比较,模型组Kiss-1 mRNA、GPR54 mRNA、GnRH mRNA表达均明显上升(P<0.01);与模型组比较,五加丹方高剂量组、中剂量组、西药对照组的Kiss-1 mRNA、GPR54 mRNA表达明显降低(P<0.05)。与模型组比较,五加丹方高剂量组、西药对照组GnRH mRNA表达明显下降(P<0.01);五加丹方中剂量组明显降低(P<0.05)。结论:五加丹方可以改善去势模型大鼠的血清性激素水平,可以降低去势模型大鼠下丘脑弓状核Kiss-1、GPR54、GnRH mRNA的过高表达,这可能是五加丹方临床治疗绝经综合征的生殖内分泌机制。

日粮低营养对母羊下丘脑KiSS-1/GPR54系统表达及相关激素分泌的影响

本研究通过分析日粮低营养对母羊下丘脑KiSS-1/GPR54系统表达及相关激素分泌的影响,明确KiSS-1/GPR54系统在日粮营养调控母羊初情期启动中的作用。选择12只体重为16kg左右的3月龄雌性小尾寒羊,随机分为2组(n=6),分别给予标准营养和低营养(对照组采食量的60%),饲喂30d后,采集下丘脑和血液,利用实时荧光定量PCR、免疫组化、ELISA和放免技术测定下丘脑KiSS-1/GPR54系统表达量及LH、胰岛素和Leptin浓度。结果表明,日粮低营养可显著降低母羊下丘脑弓状核KiSS-1基因和蛋白的表达量(P<0.01),但对GPR54基因表达量并无影响(P>0.05);日粮低营养可显著降低母羊血清中LH和胰岛素(P<0.05)浓度,极显著降低Leptin浓度(P<0.01)。结果提示,下丘脑KiSS-1/GPR54系统可通过降低KiSS-1表达来参与日粮低营养对初情期启动的调控。

KiSS-1/GPR54系统在不同发情周期母羊下丘脑中的表达规律

【目的】研究发情周期各阶段KiSS-1/GPR54系统在母羊下丘脑中的表达规律。【方法】将12只雌性小尾寒羊随机分为4组,每组3只,分别于发情前期、发情期、发情后期和间情期,颈动脉放血致死后采集其下丘脑,采用实时荧光定量PCR技术研究母羊发情周期不同阶段下丘脑中KiSS-1和GPR54基因的表达规律。【结果】母羊发情周期各阶段下丘脑上均有KiSS-1和GPR54基因表达;发情期母羊下丘脑KiSS-1基因的表达量极显著高于发情后期、间情期和发情前期(P<0.01),而发情后期、间情期和发情前期之间差异不显著;发情周期的不同阶段,GPR54基因在母羊下丘脑中的表达量无显著差异(P>0.05)。【结论】发情期母羊下丘脑KiSS-1基因的表达量极显著高于发情周期其他阶段(P<0.01),GPR54基因在母羊发情周期各阶段的表达量无显著差异。

Kiss-1/GPR54系统在不同发育阶段五指山猪下丘脑中的表达

采用荧光定量技术研究Kiss-1mRNA和GPR54mRNA在30、60、90(初情期)和120日龄五指山母猪下丘脑表达情况,并检测血清中FSH、LH、E2、P4浓度变化。结果表明:初情期前,Kiss-1mRNA表达量随着五指山猪年龄的增长逐渐升高,到初情期(90日龄)时表达量达到最高(P<0.05),120日龄(初情期后)时表达量逐渐降低(P<0.05)。GPR54mRNA表达不受影响。血清FSH、LH、E2、P4浓度变化的趋势大体一致,初情期前各激素水平逐渐升高,但差异不显著(P>0.05);至初情期(90日龄)时显著升高,且达到一个峰值;血清FSH、LH和E2浓度在90日龄和120日龄时差异不显著(P>0.05),P4浓度在90日龄时显著高于120日龄(P<0.05)。结果显示:Kiss-1基因是五指山猪初情期启动的关键因子。

KISS-1 mRNA和GPR54 mRNA在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的探讨肿瘤转移抑制基因(KISS-1)和G蛋白偶联受体54(GPR54)mRNA在子宫内膜异位症(EMT)中的表达及意义。方法利用实时定量逆转录PCR方法检测EMT患者的异位/在位内膜组织及正常子宫内膜组织中KISS-1及GPR54 mRNA的表达情况。结果 KISS-1 mRNA在EMT患者异位及在位内膜中的表达水平均明显低于正常子宫内膜(P<0.01),GPR54 mRNA在EMT患者异位内膜中的表达水平略高于EMT患者在位内膜及正常子宫内膜,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 KISS-1下调在EMT的发生中起重要作用。

能量平衡与哺乳动物生殖:瘦素和KiSS-1/GPR54系统的最新研究进展

本文结合有关瘦素和KiSS-1/GPR54系统的发现,综述了能量平衡与哺乳动物生殖之间作用机制的最新研究进展,并对该领域今后的研究趋势和方向进行了分析。

复方地黄合剂对青春期大鼠下丘脑KiSS-1与GPR54及Ghrelin mRNA表达的影响

目的探讨中药复方地黄合剂对青春期大鼠性发育的调节作用及可能的作用机制。方法将16只SPF级4周龄SD雌性大鼠随机分为两组,正常组予0.9%NaCl溶液灌胃,中药组予复方地黄合剂灌胃。每天观察大鼠阴道口开放(VO)时间;干预2周后计算子宫、卵巢指数;Real-time荧光定量PCR法检测下丘脑组织KiSS-1及其GPR54和GhrelinmRNA的表达;ELISA法检测血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、Ghrelin以及胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的表达浓度。结果中药组VO时间平均推迟约7d,子宫、卵巢指数较正常组均明显降低(P<0.01);中药组血清LH、Ghrelin均显著降低(P<0.01),而对FSH、IGF-1无明显影响(P>0.05);中药组KiSS-1、GPR54mRNA表达量分别降低至正常组的0.22和0.17倍,差异有显著性(P<0.01),而GhrelinmRNA变化不明显(P>0.05)。结论复方地黄合剂对青春期大鼠性发育有明显的调节作用,其作用机制可能与抑制KiSS-1、GPR54基因表达,从而影响外周FSH、LH等激素水平有关。

子宫内膜癌中KiSS-1及GPR54mRNA的表达及意义(英文)

目的检测KISS-1及GPR54mRNA在子宫内膜癌组织中的表达,探讨其在子宫内膜癌浸润及转移中的作用。方法采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测32例子宫内膜癌,10例子宫内膜上皮内瘤样病变(EIN)及12例正常子宫内膜组织中KiSS-1及GPR54mRNA的表达情况和其与各种临床参数的关系。结果KiSS-1mRNA在子宫内膜癌组中的表达率(37.5%)明显低于EIN组(80.0%)及正常内膜组(83.3%),并且其在子宫内膜癌组中的表达率与临床分期、肌层浸润深度及淋巴结转移密切相关,P均<0.05。GPR54mRNA在子宫内膜癌组的表达率(78.1%)高于EIN组(70.0%)和正常内膜组(66.7%),但无明显差异(均P>0.05)。GPR54mRNA在子宫内膜癌组中的表达与临床分期、组织分级、肌层浸润深度及淋巴结转移情况均无相关性(均P>0.05)。结论KiSS-1与其受体GPR54结合在抑制子宫内膜癌的浸润和转移过程中可能起着重要的作用。

新的生殖激素调控系统——KiSS-1/GPR54

KiSS-1/GPR54在中枢神经系统和生殖器官广泛表达,与生殖功能密切相关。kisspeptin激活促性腺激素释放激素神经元,有力地促进促性腺激素释放激素的释放。GPR54基因突变导致原发性低促性腺激素型性腺功能低减,给予外源促性腺激素释放激素恢复性腺功能。小剂量kisspeptin注射可以引起大鼠黄体生成激素剧烈升高。KiSS-1/GPR54在脑内介导类固醇激素对促性腺激素释放激素释放的调控作用。

原发性低促性腺激素型性腺机能减退症与kiss-1/GPR54系统在动物体内表达的研究

本文着重从原发性低促性腺激素型性腺机能减退症(IHH)的病因、临床症状;kiss-1/GPR54的概述及在动物繁殖过程中的调节作用,以及原发性低促性腺激素型性腺机能减退症与kiss-1/GPR54系统之间的关系等方面综述了近年来的研究进展。

猪发育期NPY-Y1和GPR54受体基因的表达规律研究

[目的]研究猪发育期NPY-Y1和GPR54受体基因的发育性变化。[方法]分别选取初生、60、120、初情期、180日龄的苏姜猪母猪各3头,采集下丘脑、垂体、卵巢组织样品,提取组织RNA,采用荧光定量PCR分析NPY-Y1、GPR54受体基因的发育性变化。[结果]下丘脑、垂体与卵巢内NPY-Y1 mRNA从初生到初情期表达量逐渐下降,在初情期达到最低,初情期后呈上升趋势。在3种组织内,初情期与其他时期NPY-Y1 mRNA表达量均存在显著差异(P<0.05);GPR54 mRNA从初生到初情期表达量逐渐上升,在初情期达到最高,初情期后呈下降趋势。在3种组织内,初情期也与其他时期GPR54 mRNA表达量也均存在显著差异(P<0.05)。[结论]猪发育期NPY-Y1基因与GPR54基因表达存在负相关性。

KiSS-1、KiSS-1受体GPR54及基质金属蛋白酶-9与非小细胞肺癌侵袭转移的关系

目的:研究KiSS-1、KiSS-1受体GPR54及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在非小细胞肺癌组织中的表达及其与非小细胞肺癌侵袭转移的关系,探讨三者在非小细胞肺癌侵袭转移中是否具有相关性。方法:选择98例原发性非小细胞肺癌癌组织及30例癌旁肺组织的标本,采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物免疫组化法(S-P法)检测组织中KiSS-1、GPR54及MMP-9的表达情况。结果:KiSS-1在非小细胞肺癌组织中的表达显著低于癌旁肺组织(P<0.01);MMP-9在非小细胞肺癌组织中的表达显著高于癌旁肺组织中的表达(P<0.01)。KiSS-1在有淋巴结转移的非小细胞肺癌中的表达显著低于无淋巴结转移者(P<0.01);MMP-9在有淋巴结转移的非小细胞肺癌组织中的表达显著高于无淋巴结转移者(P<0.05)。KiSS-1与GPR54、MMP-9在肺癌组织中的表达均具有负相关性(P<0.05)。结论:KiSS-1基因表达下调和GPR54、MMP-9蛋白过表达与非小细胞肺癌的侵袭转移密切相关。

日粮能量对动物HPG轴中Kiss-1/GPR54系统影响进展

本文着重从HPG轴对生殖过程的调节、kiss-1/GPR54系统的发现及在动物体内的表达、IHH与kiss-1/GPR54系统的关系以及kiss-1/GPR54系统与日粮能量平衡等方面简要综述了近年来国内外的研究进展。

甘加藏羊发情周期下丘脑-垂体-卵巢轴KISS-1/GPR54的表达与分布

为了研究高原甘加藏羊(Ovis aries)发情周期下丘脑-垂体-卵巢轴(hypothalamic-pituitary-ovary axis,HPOA)中肿瘤转移抑制基因(kisspeptins,KISS-1)/G蛋白偶联受体54(G protein-coupled receptors 54,GPR54)的表达及其对藏羊季节性发情周期的调控作用,本实验选取处于发情周期的甘加藏羊32只,应用qRT-PCR和免疫组织化学技术,检测其在发情周期HPOA组织中的表达和分布。qRT-PCR结果显示,甘加藏羊整个发情周期HPOA组织中均有KISS-1和GPR54 mRNA表达。下丘脑组织中发情前期KISS-1 mRNA相对表达量显著(P<0.05)高于其他3个发情时期;在垂体组织中发情前期和间情期的相对表达量较高,与发情后期差异显著(P<0.05);卵巢轴组织中间情期的相对表达量最高,显著(P<0.05)高于其他3个时期。下丘脑组织中发情期GPR54 mRNA相对表达量显著(P<0.05)高于其他3个时期;垂体组织中发情前期的相对表达量显著(P<0.05)高于其他时期;卵巢轴组织中发情后期的相对表达量显著(P<0.05)高于其他时期。免疫组织化学染色结果显示:Kisspeptin和GPR54阳性产物在下丘脑中主要分布于促垂体区的弓状核、脑室前腹侧区;腺垂体中主要在嗜碱性细胞和嫌色细胞中表达;卵巢轴中主要在卵泡颗粒层及卵泡内膜上表达。KISS-1和GPR54在藏羊发情周期HPOA中的差异表达,对藏羊季节性发情周期有一定的调控作用。

Kiss-1、Kiss-1受体GPR54及MMP-9与甲状腺乳头状癌侵袭转移关系的研究进展

随着生活环境的改变及多因素的影响,甲状腺癌的发病率近年来呈逐渐上升趋势。目前甲状腺癌的分型中以甲状腺乳头状癌（PTC）最为常见,大部分PTC进展缓慢,患者预后较好,但某些组织亚型容易突破组织被膜发生侵袭和转移。目前众多研究显示,恶性肿瘤的侵袭和转移是多基因步骤共同参与形成的。因此随着肿瘤研究学的进展,对肿瘤转移抑制基因的不断探索就显得尤为重要。

KISS-1/GPR54在不同生长期大鼠睾丸中的表达分析

为探讨KISS-1/GPR54在大鼠睾丸中表达定位及生长期表达变化特点,进而推测KISS-1/GPR54在大鼠睾丸生长期中可能的生理功能,以60只3周龄离乳SPF级大鼠为研究对象,在第21、35、43天和第56天4个时间点,取大鼠睾丸组织,采用免疫组化、RT-qPCR和Western Blot的方法分别研究KISS-1/GPR54在生长期大鼠睾丸中定位、mRNA表达和蛋白表达的变化情况。结果显示:KISS-1/GPR54在生长期大鼠睾丸生精细胞和间质细胞均见表达;随着鼠龄的增加,第21天至第56天大鼠睾丸中KISS-1/GPR 54 mRNA表达和蛋白表达整体上呈现上升的趋势且有一定的时序性,其中KISS-1 mRNA在第35天出现峰值,GPR 54 mRNA在第43天出现峰值;KISS-1蛋白和GPR54蛋白表达均在第56天出现峰值。表明KISS-1/GPR54在大鼠睾丸的生精细胞和间质细胞中均见表达,但在生殖周期的不同阶段表达情况存在差异;生长期大鼠KISS-1/GPR54表达逐渐增加,且KISS-1表达峰值早于GPR54,呈现一定的时序性。大鼠睾丸中KISS-1/GPR54可能参与精子成熟和性激素合成,且在生殖周期的不同阶段主要功能可能有所不同。