KISS-1/KISS-1R系统在调控生殖内分泌系统的研究进展

KISS-1作为肿瘤转移抑制基因之一,最早在人类黑色素瘤中被发现,自发现之初便成为医学领域的研究热点。目前已经证实,KISS-1基因具有抑制肿瘤转移、调节促性腺激素释放激素分泌及作为食欲调节因子调控摄食行为等作用,因而被纳入恶性肿瘤、生殖系统及内分泌代谢等多系统疾病研究中。为此,本文主要从青春期启动、生殖功能、能量代谢等神经内分泌功能方面论述KISS-1的作用。

山羊繁殖季节性相关基因KiSS-1与RFRP的表达研究

本研究为初步阐明KiSS-1和RFRP基因对山羊繁殖季节性的作用,选择常年发情济宁青山羊和季节性发情辽宁绒山羊为对比品种,应用RT-PCR和qRT-PCR技术分别研究KiSS-1和RFRP基因组织表达谱以及在下丘脑-垂体-卵巢(子宫)繁殖轴表达差异。结果发现:(1)KiSS-1基因主要表达于山羊下丘脑、垂体、松果体、肾、卵巢、脂肪和甲状腺等组织,RFRP基因主要表达于山羊下丘脑、大脑皮层、小脑、卵巢和垂体等组织,两基因组织表达谱均存在一定的品种特异性;(2)KiSS-1基因在济宁青山羊下丘脑表达量显著高于辽宁绒山羊(P<0.05),而在垂体和卵巢中的表达量两品种间差异不明显(P>0.05);(3)济宁青山羊下丘脑RFRP基因表达显著高于辽宁绒山羊(P<0.05),而济宁青山羊卵巢和垂体中RFRP基因表达明显低于辽宁绒山羊(P<0.05)。研究结果提示,KiSS-1基因可能参与调控山羊季节性繁殖,而RFRP基因是否调控季节性繁殖或以何种方式作用还需要进一步研究。本研究可为山羊KiSS-1和RFRP基因功能研究打下基础,并为揭示山羊繁殖季节性的遗传基础提供参考。

日粮低营养对母羊下丘脑KiSS-1/GPR54系统表达及相关激素分泌的影响

本研究通过分析日粮低营养对母羊下丘脑KiSS-1/GPR54系统表达及相关激素分泌的影响,明确KiSS-1/GPR54系统在日粮营养调控母羊初情期启动中的作用。选择12只体重为16kg左右的3月龄雌性小尾寒羊,随机分为2组(n=6),分别给予标准营养和低营养(对照组采食量的60%),饲喂30d后,采集下丘脑和血液,利用实时荧光定量PCR、免疫组化、ELISA和放免技术测定下丘脑KiSS-1/GPR54系统表达量及LH、胰岛素和Leptin浓度。结果表明,日粮低营养可显著降低母羊下丘脑弓状核KiSS-1基因和蛋白的表达量(P<0.01),但对GPR54基因表达量并无影响(P>0.05);日粮低营养可显著降低母羊血清中LH和胰岛素(P<0.05)浓度,极显著降低Leptin浓度(P<0.01)。结果提示,下丘脑KiSS-1/GPR54系统可通过降低KiSS-1表达来参与日粮低营养对初情期启动的调控。

KISS-1/GPR54基因及其在生殖中的作用

KISS-1及其受体GPR54基因对青春期的正常启动具有重要作用。青春期开始前后,动物下丘脑中KISS-1和GPR54 mRNA水平很高,Kisspeptins(KISS-1基因产物)通过激活GPR54增加促性腺激素的释放,KISS-1基因的表达受性腺类固醇激素的调控。GPR54基因突变可以导致人和鼠的特发性促性腺激素分泌不足性腺机能减退症和促性腺激素依赖性性早熟。文章还介绍了KISS-1、GPR54基因的结构、表达、多态性以及和其它生殖调控因子之间的相互关系。

KiSS-1/GPR54系统在不同发情周期母羊下丘脑中的表达规律

【目的】研究发情周期各阶段KiSS-1/GPR54系统在母羊下丘脑中的表达规律。【方法】将12只雌性小尾寒羊随机分为4组,每组3只,分别于发情前期、发情期、发情后期和间情期,颈动脉放血致死后采集其下丘脑,采用实时荧光定量PCR技术研究母羊发情周期不同阶段下丘脑中KiSS-1和GPR54基因的表达规律。【结果】母羊发情周期各阶段下丘脑上均有KiSS-1和GPR54基因表达;发情期母羊下丘脑KiSS-1基因的表达量极显著高于发情后期、间情期和发情前期(P<0.01),而发情后期、间情期和发情前期之间差异不显著;发情周期的不同阶段,GPR54基因在母羊下丘脑中的表达量无显著差异(P>0.05)。【结论】发情期母羊下丘脑KiSS-1基因的表达量极显著高于发情周期其他阶段(P<0.01),GPR54基因在母羊发情周期各阶段的表达量无显著差异。

Kiss-1/GPR54系统在不同发育阶段五指山猪下丘脑中的表达

采用荧光定量技术研究Kiss-1mRNA和GPR54mRNA在30、60、90(初情期)和120日龄五指山母猪下丘脑表达情况,并检测血清中FSH、LH、E2、P4浓度变化。结果表明:初情期前,Kiss-1mRNA表达量随着五指山猪年龄的增长逐渐升高,到初情期(90日龄)时表达量达到最高(P<0.05),120日龄(初情期后)时表达量逐渐降低(P<0.05)。GPR54mRNA表达不受影响。血清FSH、LH、E2、P4浓度变化的趋势大体一致,初情期前各激素水平逐渐升高,但差异不显著(P>0.05);至初情期(90日龄)时显著升高,且达到一个峰值;血清FSH、LH和E2浓度在90日龄和120日龄时差异不显著(P>0.05),P4浓度在90日龄时显著高于120日龄(P<0.05)。结果显示:Kiss-1基因是五指山猪初情期启动的关键因子。

大鼠下丘脑KiSS-1与GnRH mRNA的表达

目的:观察不同发育阶段雄性大鼠下丘脑KiSS-1和GnRH mRNA表达,探讨KiSS-1在性发育的启动和正常生殖功能调节中的作用。方法:雄性SD大鼠分为幼年期(12d)、未发育期(20d)、发育早期(35d)、性发育期(45d)和性成熟期(75d)共5组,每组6只,分离下丘脑,采用RT-PCR和实时定量-PCR的方法检测各发育阶段大鼠下丘脑KiSS-1和GnRH mRNA的水平。化学发光法检测各发育阶段大鼠血清睾酮水平。结果:大鼠随发育过程KiSS-1 mRNA转录水平逐渐升高,到性发育期水平最高,成年期略下降,但保持相对较高水平。未发育期、发育早期、性发育期和性成熟期大鼠KiSS-1 mRNA水平分别是幼年期的1.7、2.1、3.5、2.0倍。GnRH与KiSS-1表达变化呈正相关(r=0.905,P<0.05),GnRH激活晚于KiSS-1。GnRH在性发育期转录水平最高,未发育期、发育早期、性发育期和性成熟期表达水平分别是幼年期的1.1、1.9、2.4、1.9倍。大鼠在性发育期睾酮水平较发育前显著升高,性成熟期水平最高。结论:KiSS-1表达与GnRH表达具有正相关性,其可能参与GnRH的调控,与青春期启动和生殖功能调节有关。

非小细胞肺癌LVD、MVD、CEAmRNA及KAI1和Kiss-1的表达与患者预后关系的研究

背景与目的目前对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者预后的研究很多,有些临床病理因素已被公认与预后有关,本研究旨在对淋巴管密度(lymphatic vessel density,LVD)、微血管密度(microves-sel density,MVD)及癌胚抗原信使核糖核酸(carcinoembryonic antigen messenger ribonucleic acid,CEAmRNA)和肿瘤转移抑制基因KAI1、Kiss-1的表达与NSCLC患者预后的关系进行探讨。方法选取57例NSCLC患者,采用逆转录巢式聚合酶链反应(nested-RT-PCR)和微流控芯片(micro-fluid chip)技术对外周血CEAmRNA的表达进行检测;采用免疫组织化学技术对肺癌组织LVD、MVD和KAI1、Kiss-1的表达进行检测,并对所有患者进行随访分析。结果全组的5年生存率为18%,中位生存期为34个月;单因素分析显示TNM分期、淋巴结有无转移、CEAmRNA的阳性表达、MVD、LVD和Kiss-1的表达对生存有影响;多因素分析显示TNM分期、淋巴结有无转移和CEAmRNA的表达是影响预后的独立危险因素。结论在NSCLC患者中MVD、LVD和Kiss-1及CEAmRNA的表达可以在一定程度上反映患者的预后。

人食管鳞状细胞癌组织中KiSS-1 mRNA及蛋白的表达

目的:探讨食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中KiSS-1mRNA及蛋白的表达情况。方法:分别采用原位杂交方法和免疫组织化学SP法对49例ESCC、26例癌旁不典型增生组织及49例正常食管黏膜组织进行KiSS-1mRNA和蛋白的检测。结果:ESCC组织、癌旁不典型增生组织及正常食管黏膜组织中KiSS-1mRNA的阳性表达率分别为61.2%(30/49)、80.8%(21/26)、95.6%(47/49),依次升高(χ2=17.856,P<0.01);Kiss-1蛋白的阳性表达率分别为69.4%(34/49)、80.8%(21/26)、98.0%(48/49),依次增高(χ2=14.340,P<0.01);ESCC组织中KiSS-1mRNA及蛋白表达与食管癌组织学分级、浸润深度无关(P>0.05),与淋巴结转移有关(P<0.05);ESCC组织中KiSS-1mRNA与蛋白的表达呈正相关(rs=0.653,P<0.05)。结论:KiSS-1表达缺失与ESCC的发生、转移有关;KiSS-1有望成为ESCC早期诊断和判断预后的辅助指标。

子宫内膜异位症患者内膜组织中kiss-1及血清和腹腔液中sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES表达的意义

目的研究子宫内膜异位症患者内膜组织中kiss-1及血清和腹腔液中血管内皮生长因子可溶性受体（sflt-1）、血管内皮生长因子（VEGF）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、T细胞表达和分泌的调节性激活因子（RANTES）表达的意义。方法选取子宫内膜异位症行腹腔镜手术患者256例作为观察组,根据病变部位、大小、粘连程度分为Ⅰ~Ⅱ期组76例,Ⅲ~Ⅳ期组180例。选取同期因卵巢良性肿瘤、卵巢系膜囊肿、宫颈病变等入院治疗的患者114例作为对照组。采用免疫组化法测定受检者子宫内膜组织标本kiss-1的表达情况,采用ELISA方法测定受检者血清和腹腔液中sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES表达情况。结果观察组kiss-1阳性表达率明显低于对照组（P〈0.05）。Ⅰ~Ⅱ期组kiss-1阳性表达率明显高于Ⅲ~Ⅳ期组（P〈0.05）。观察组血清和腹腔液中sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES表达水平明显高于对照组（P均〈0.05）。Ⅰ~Ⅱ期组血清和腹腔液中sflt-1、VEGF和RANTES表达水平低于Ⅲ~Ⅳ期组（P〈0.05）。结论kiss-1、sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES水平与子宫内膜异位症发展密切相关,可能参与了其发病过程,可以作为子宫内膜异位症的辅助检测指标。

食管鳞状细胞癌组织中KISS-1和MMP-9蛋白和mRNA的表达

目的:探讨肿瘤转移抑制基因KISS-1及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与食管鳞状细胞癌侵袭、转移的关系。方法:采用免疫组织化学SP法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测50例食管鳞状细胞癌及50例正常食管组织中KISS-1及MMP-9蛋白和mRNA的表达情况,分析其与食管鳞状细胞癌患者各临床病理特征的关系及二者的相关性。结果:食管鳞状细胞癌组织中KISS-1蛋白的阳性表达率(61.0%)低于正常食管组织(82.0%)(χ2=5.877,P<0.05),并且其低表达与淋巴结转移密切相关(χ2=4.340,P<0.05)。食管鳞状细胞癌组织中MMP-9蛋白的阳性表达率(72.0%)高于正常食管组织(52.0%)(χ2=4.244,P<0.05),并且其高表达与肿瘤的浸润、淋巴结转移及分化程度均相关(P均<0.05)。食管鳞状细胞癌组织中KISS-1mRNA的阳性表达率(56.0%)及表达水平(0.992±0.090)均低于正常食管组织(88.0%,1.075±0.181)(P<0.05),并且其低表达也与淋巴结转移密切相关(P<0.05)。食管鳞状细胞癌组织中MMP-9mRNA的阳性表达率(72.0%)及表达水平(1.030±0.153)均高于正常食管组织(44.0%,0.943±0.085)(P<0.05),并且其高表达与肿瘤的深层浸润和淋巴结转移密切相关(P<0.05)。KISS-1与MMP-9蛋白和mRNA的表达均呈负相关(P<0.05)。结论:KISS-1的低表达和MMP-9的过表达可能与食管鳞状细胞癌的浸润、转移有关。二者有望成为判定食管鳞状细胞癌侵袭和转移能力的指标。

人胰腺癌KiSS-1基因mRNA表达及其临床意义

目的:研究人胰腺癌细胞株和胰腺癌组织中KiSS-1表达及其临床意义。方法:应用RT-PCR方法检测KiSS-1基因mRNA在人胰腺癌细胞株AsPC-1、40例胰腺癌及27例转移灶和9例正常胰腺组织中的表达情况。结果:人胰腺癌细胞株AsPC-1和胰腺癌组织中KiSS-1mRNA表达水平均显著低于正常胰腺组织(P值均为0·000),其中As-PC-1中表达水平最低,为0·124±0·046。KiSS-1mRNA的表达与性别、年龄、肿瘤大小及组织学分级无关,与临床分期、有无转移和神经侵犯密切相关。在Ⅲ、Ⅳ期胰腺癌组织中KiSS-1基因的表达为0·137±0·110,明显低于Ⅰ、Ⅱ期,P=0·000。KiSS-1基因在无转移和有转移的胰腺癌原发灶和转移灶组织中表达水平呈降低趋势,差异有统计学意义(P值均为0·000),转移灶中的表达水平最低。有神经侵犯的胰腺癌原发灶KiSS-1基因表达显著低于无神经侵犯的胰腺癌原发灶(P=0·000),其表达与有无神经侵犯Kendall等级相关系数τ=0·689,P=0·004。结论:KiSS-1基因转录和表达降低与胰腺癌侵袭和转移密切相关,可能参与胰腺癌侵袭和转移的调控。

胎盘组织KiSS-1 mRNA及其蛋白肽metastin表达在子癎前期发病中的意义

目的:探讨胎盘组织中KiSS-1mRNA及其蛋白肽metastin表达在早发重度子癎前期发病中的作用。方法:采用RT-PCR、Western blot、免疫组化方法检测57例子癎前期患者(轻度15例和重度42例,其中早发重度12例,晚发重度30例)和30例正常晚期妊娠者胎盘组织中KiSS-1mRNA及其蛋白肽metastin的表达水平和定位。结果:胎盘组织中蛋白肽metastin主要表达在绒毛的合体滋养细胞和细胞滋养细胞。子癎前期组胎盘组织中KiSS-1mRNA及蛋白肽metastin表达分别为(1.73±0.24)和(78.41±7.96)μg/100μg总蛋白,显著高于正常晚期妊娠组(P均<0.01),以早发重度子癎前期组尤为显著。结论:子癎前期存在KiSS-1mRNA及其蛋白肽metastin表达增强,且早发重度子癎前期组表达显著增高,可能是早发重度子癎前期发病的主要原因之一。

KISS-1 mRNA和GPR54 mRNA在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的探讨肿瘤转移抑制基因(KISS-1)和G蛋白偶联受体54(GPR54)mRNA在子宫内膜异位症(EMT)中的表达及意义。方法利用实时定量逆转录PCR方法检测EMT患者的异位/在位内膜组织及正常子宫内膜组织中KISS-1及GPR54 mRNA的表达情况。结果 KISS-1 mRNA在EMT患者异位及在位内膜中的表达水平均明显低于正常子宫内膜(P<0.01),GPR54 mRNA在EMT患者异位内膜中的表达水平略高于EMT患者在位内膜及正常子宫内膜,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 KISS-1下调在EMT的发生中起重要作用。

子宫内膜异位症合并代谢综合征患者血清和腹腔液中sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES及组织中kiss-1的表达

目的研究子宫内膜异位症合并代谢综合征患者血清和腹腔液中sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES及组织kiss-1中表达的意义。方法选取子宫内膜异位症合并代谢综合征行腹腔镜手术患者256例为观察对象,根据病变部位、大小、粘连程度分为Ⅰ～Ⅳ期,其中Ⅰ～Ⅱ期76例（Ⅰ～Ⅱ期组）,Ⅲ～Ⅳ期180例（Ⅲ～Ⅳ期组）。选取同期因卵巢良性肿瘤、输卵巢系膜囊肿、宫颈病变等入院治疗的患者114例为对照组。观察受检者子宫内膜组织标本采用免疫组化法测定Kiss-1的阳性表达率,采用ELISA方法测定血清和腹腔液中sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES表达。结果子宫内膜异位症组、Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期Kiss-1在子宫内膜组织的阳性表达明显低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。Ⅰ～Ⅱ期Kiss-1在子宫内膜组织的阳性表达明显高于子宫内膜异位症组和Ⅲ～Ⅳ期,差异有统计学意义（P〈0.05）。子宫内膜异位症组、Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期血清和腹腔液中sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES表达明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期血清和腹腔液中sflt-1、VEGF、和RANTES表达与子宫内膜异位症组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。Ⅰ～Ⅱ期血清和腹腔液中sflt-1、VEGF、和RANTES表达与Ⅲ～Ⅳ期比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 Kiss-1、sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES水平与子宫内膜异位症发展密切相关,可能参与了其发病过程,可以作为子宫内膜异位症合并代谢综合征的辅助检测指标。

Kiss-1在雌性性早熟大鼠下丘脑中mRNA的表达

目的探讨Kiss-1在雌性性早熟大鼠不同时期下丘脑中mRNA的表达。方法正常5日龄清洁级Sprague-Dawley雌性大鼠40只,随机分为4组,对照1组(正常青春前期),对照2组(正常青春期早期),模型1组(青春期早期),模型2组(青春期中期),每组10只,达那唑300μg皮下注射以诱导真性性早熟。半定量RT-PCR法检测对照1组,对照2组,模型1组,模型2组的Kiss-1 mRNA的表达。结果与对照1组相比,模型1组和模型2组下丘脑Kiss-1 mRNA水平分别增加了1.4和2.8倍,差异具有显著性(P<0.05)。模型2组大鼠下丘脑Kiss-1 mRNA表达水平高于模型1组,差异有显著性(P<0.05)。对照2组与模型1组的Kiss-1 mRNA的表达差异无显著性(P>0.05)。结论Kiss-1 mRNA的表达与生长发育的时期密切相关,提示Kiss-1可能与真性性早熟的发生有关。

能量平衡与哺乳动物生殖:瘦素和KiSS-1/GPR54系统的最新研究进展

本文结合有关瘦素和KiSS-1/GPR54系统的发现,综述了能量平衡与哺乳动物生殖之间作用机制的最新研究进展,并对该领域今后的研究趋势和方向进行了分析。

乳腺癌及其转移灶Ezrin、RECK与Kiss-1蛋白表达和意义

目的观察乳腺癌及其转移灶Ezrin、RECK与Kiss-1蛋白表达情况。方法运用免疫组织化学法对乳腺癌患者乳腺癌组织及其转移灶中Ezrin、RECK与Kiss-1蛋白表达情况进行观察。结果与对照组相比,不伴转移的乳腺癌肿瘤组织内Ezrin蛋白表达显著增高(P<0.05),伴转移者乳腺癌肿瘤组织内Ezrin蛋白表达更高(P<0.05),淋巴转移灶中也可见Ezrin蛋白表达(P<0.05);与对照组相比,不伴转移的乳腺癌肿瘤组织内RECK及Kiss-1蛋白表达显著降低(P<0.05),伴转移者乳腺癌肿瘤组织内RECK及Kiss-1蛋白表达量更低(P<0.05),淋巴转移灶中也可见RECK及Kiss-1蛋白降低(P<0.05)。结论 Ezrin蛋白表达增高,RECK及Kiss-1蛋白表达降低可能可以作为乳腺癌转移的生物学标志。

肾癌中KISS-1与E-cadherin的表达及调控关系

目的探讨KISS-1与E-cadherin在肾癌组织中的表达和相关性以及肾癌细胞中二者之间的调控关系。方法实时PCR检测原发未转移肾癌和原发伴转移肾癌组织中KISS-1和E-cadherin的表达。KISS-1表达载体转染肾癌Caki-1细胞,Western blot检测KISS-1和E-cadherin蛋白的表达。结果与原发未转移肾癌相比,原发伴转移肾癌组织中KISS-1和E-cadherin的表达均显著下调,二者呈显著正相关;转染后KISS-1和E-cadherin蛋白的表达均显著上调。结论 KISS-1和E-cadherin与肾癌的侵袭转移相关,KISS-1在肾癌细胞中能够上调E-cadherin的表达。

胃癌组织中Kiss-1 mRNA与Notch1 mRNA的表达及意义

目的探讨Kiss-1 mRNA与Notch1 mRNA在胃癌组织中的表达及意义。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应检测胃癌和癌旁正常组织中Kiss-1 mRNA与Notch1 mRNA的表达情况,分析其与临床病理特征之间的关系。结果 Kiss-1 mRNA在胃癌组织中的表达较癌旁正常组织中降低(P<0.05);Kiss-1 mRNA的表达与胃癌的淋巴结转移、TNM分期密切相关(P<0.05),与胃癌的浸润深度、分化程度、远处转移无关(P>0.05);Notch1 mRNA在胃癌组中的表达较癌旁正常组织升高(P<0.05);Notch1 mRNA的表达与胃癌的淋巴结转移、TNM分期、分化程度密切相关(P<0.05),与胃癌的浸润深度、远处转移无关(P>0.05)。结论 Kiss-1在胃癌的发病过程中发挥抑癌基因作用,并通过抑制转移来影响胃癌的预后;Notch1在胃癌的发病过程中发挥癌基因作用,有潜力成为早期诊断胃癌的新型肿瘤标记物。