下丘脑Kiss1系统在产前应激诱导男性后代生殖功能异常中的潜在作用

下丘脑Kiss1系统是下丘脑-垂体-性腺轴中的一个重要组成部分,其通过促进促性腺激素释放激素的分泌,来调节生殖功能。最近研究发现,产前应激对男性后代生殖功能具有影响。然而,产前应激诱导的男性后代生殖功能下降的机制仍未阐明。通过对下丘脑Kiss1系统的治疗可能改善产前应激,诱导男性后代的生殖功能,该综述将讨论下丘脑Kiss1系统在产前应激诱导男性后代生殖功能异常中的潜在作用。

经皮穴位电刺激对痰湿型多囊卵巢综合征患者卵细胞质量及KISS1R的影响

目的通过研究在体外受精(IVF)周期中经皮穴位电刺激对痰湿型多囊卵巢综合征患者卵细胞质量及Kiss1的影响,探讨经皮穴位电刺激影响痰湿型多囊卵巢综合征患者卵细胞质量的机理。方法将100例行IVF-ET的痰湿型多囊卵巢综合征患者随机分为两组,试验组(经皮穴位电刺激联合西药组)和对照组(伪针联合西药组),每组各50例。分别观察两组患者治疗前后证候积分及积分差值、促性腺激素(Gn)总量、取卵数、单卵雌激素水平、优卵率、受精率、优质胚胎率、临床妊娠率,取卵日卵巢颗粒细胞Kisspeptin/Kiss1r系统中Kiss1r mRNA水平的表达差异。结果试验组与对照组相比,治疗前后证候积分、积分差值、单卵雌激素水平改善明显(P<0.05);Gn总量、取卵数、受精率、临床妊娠率比较,差异无统计学意义;优卵率、优胚率显著提高(P<0.05);试验组患者颗粒细胞Kiss1r的表达水平较对照组有明显下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论经皮穴位电刺激提高痰湿型多囊卵巢综合征患者卵细胞质量的机理与调控卵巢颗粒细胞Kisspeptin/Kiss1r系统,下调通路中关键因子Kiss1r的表达,促进颗粒细胞增殖、改善卵巢微环境有关,其作用机制尚需进一步探讨。

下丘脑能量信号通路通过调节Kiss1神经元对青春期发育的影响研究进展

青春期的启动主要受下丘脑能量信号通路的调控。下丘脑能量信号通路瘦素、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、G蛋白偶联受体54(GPR54)具有启动青春期发育和调控机体能量平衡的功能。Kiss1是刺激性成熟的主要内分泌因子,是调控下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)神经元的重要作用元件和下丘脑—垂体—性腺(HPG)轴成熟的调节因子,Kiss1作为GPR54的天然配体,与GPR54结合后调节GnRH分泌,对青春期发育起关键作用;瘦素是一种能量代谢的负反馈调节激素,下丘脑Kiss1神经元表达瘦素受体,介导瘦素对生殖系统产生影响;AMPK是重要的下丘脑能量感受器,在能量缺乏的条件下,AMPK被激活,抑制Kiss1 mRNA表达,在调节能量平衡及生殖方面起关键作用。机体能量代谢与青春期启动信号通路之间关系密切,研究青春期启动过程中调节能量平衡的信号通路,可以为治疗青春期发育异常和能量代谢失衡提供新治疗靶点。

腮腺多形性腺瘤和癌在多形性腺瘤组织中Kiss-1、MMP-9蛋白的表达

目的:探讨腮腺多形性腺瘤(PA)和癌在多形性腺瘤(CPA)组织中肿瘤转移抑制基因Kiss-1、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白的表达情况。方法:采用免疫组织化学染色法检测正常腮腺、PA、CPA组织中Kiss-1和MMP-9蛋白的表达,并结合临床病理因素进行分析。结果:正常腮腺、PA和CPA组织中Kiss-1蛋白阳性表达率分别为100.0%、76.7%、24.4%,逐渐降低;而MMP-9蛋白阳性表达率分别为20.0%、53.3%、88.9%,逐渐升高(P<0.05)。CPA组织中Kiss-1和MMP-9蛋白的表达呈负关联(r_(S)=0.416,P=0.002);且MMP-9蛋白的表达与CPA的侵袭性、TNM分期有关(P<0.05)。结论:Kiss-1、MMP-9蛋白可能与CPA的发生、发展及转移密切相关。

接种KISS 1基因疫苗对藏香杂野猪血液生理生化及免疫指标的影响

为了解KISS 1基因疫苗对藏香杂野猪血液生理生化及免疫指标的影响,给实验组藏香杂野猪灌喂KISS 1基因疫苗6次(每2周灌喂1次),同时给对照组藏香杂野猪灌喂等量饮用水,检测2组实验猪血常规、血清生理生化以及免疫指标的水平。结果显示:与对照组相比,实验组藏香杂野猪的白细胞数、中性粒细胞绝对值、谷丙转氨酶活力、免疫球蛋白A质量浓度、免疫球蛋白G质量浓度均极显著升高(P<0.01),淋巴细胞数、碱性磷酸酶活力、尿素氮浓度、白细胞介素-2质量浓度、γ干扰素质量浓度均显著升高(P<0.05),血细胞比容显著下降(P<0.05),其他指标两组间差异均不显著(P>0.05)。结果表明:免疫KISS 1基因疫苗对藏香杂野猪健康有一定的影响,可减弱猪只免疫力。

KISS1基因SNP对柯乐猪繁殖性状的影响

研究旨在了解KISS1基因对猪繁殖力的影响,以78头初产柯乐猪为材料,采用聚合酶链式反应(PCR)产物直接测序与人工较对相结合鉴定KISS1基因单核苷酸多态性(SNP)位点,分析SNP位点对柯乐猪繁殖指标的影响。结果显示在KISS1基因第1外显子处发现g.64835073 A>G同义突变,在第1内含子处发现g.64835529 G>A突变,2个SNP位点均产生3种基因型,均为中度多态位点,且均符合Hardy-Weinberg平衡;g.64835073 A>G位点对5个繁殖指标的影响未能达到显著水平(P>0.05);其中g.64835529 G>A位点对总产仔数、初生个体重、断奶个体重的影响达显著水平,揭示g.64835529 G>A位点可能作为猪产仔数的一个分子标记。

下丘脑Kiss1神经元在能量代谢调节中的作用

代谢是机体生存和延续的基础,机体通过影响行为并诱发一系列的生理反应,调节代谢状态。能量代谢失衡可能导致机体消瘦或肥胖,甚至会造成生长发育和生殖功能的障碍等。因此,维持机体的能量平衡至关重要,而这一状态的维持受中枢神经系统的严格控制。中枢神经系统,特别是下丘脑,在调节机体生理功能和能量平衡中发挥着重要的作用。下丘脑Kisspeptin被认为在调节性腺轴、营养性发育和生殖中发挥重要作用。近些年来,关于其在能量代谢调控中的作用也引起广泛关注。本文将从能量摄入和能量消耗两个方面对下丘脑Kisspeptin在能量代谢调控中的作用进行综述,以期为防治因能量失衡诱发的代谢性疾病提供新的研究思路和依据。

山羊繁殖季节性相关基因KiSS-1与RFRP的表达研究

本研究为初步阐明KiSS-1和RFRP基因对山羊繁殖季节性的作用,选择常年发情济宁青山羊和季节性发情辽宁绒山羊为对比品种,应用RT-PCR和qRT-PCR技术分别研究KiSS-1和RFRP基因组织表达谱以及在下丘脑-垂体-卵巢(子宫)繁殖轴表达差异。结果发现:(1)KiSS-1基因主要表达于山羊下丘脑、垂体、松果体、肾、卵巢、脂肪和甲状腺等组织,RFRP基因主要表达于山羊下丘脑、大脑皮层、小脑、卵巢和垂体等组织,两基因组织表达谱均存在一定的品种特异性;(2)KiSS-1基因在济宁青山羊下丘脑表达量显著高于辽宁绒山羊(P<0.05),而在垂体和卵巢中的表达量两品种间差异不明显(P>0.05);(3)济宁青山羊下丘脑RFRP基因表达显著高于辽宁绒山羊(P<0.05),而济宁青山羊卵巢和垂体中RFRP基因表达明显低于辽宁绒山羊(P<0.05)。研究结果提示,KiSS-1基因可能参与调控山羊季节性繁殖,而RFRP基因是否调控季节性繁殖或以何种方式作用还需要进一步研究。本研究可为山羊KiSS-1和RFRP基因功能研究打下基础,并为揭示山羊繁殖季节性的遗传基础提供参考。

日粮低营养对母羊下丘脑KiSS-1/GPR54系统表达及相关激素分泌的影响

本研究通过分析日粮低营养对母羊下丘脑KiSS-1/GPR54系统表达及相关激素分泌的影响,明确KiSS-1/GPR54系统在日粮营养调控母羊初情期启动中的作用。选择12只体重为16kg左右的3月龄雌性小尾寒羊,随机分为2组(n=6),分别给予标准营养和低营养(对照组采食量的60%),饲喂30d后,采集下丘脑和血液,利用实时荧光定量PCR、免疫组化、ELISA和放免技术测定下丘脑KiSS-1/GPR54系统表达量及LH、胰岛素和Leptin浓度。结果表明,日粮低营养可显著降低母羊下丘脑弓状核KiSS-1基因和蛋白的表达量(P<0.01),但对GPR54基因表达量并无影响(P>0.05);日粮低营养可显著降低母羊血清中LH和胰岛素(P<0.05)浓度,极显著降低Leptin浓度(P<0.01)。结果提示,下丘脑KiSS-1/GPR54系统可通过降低KiSS-1表达来参与日粮低营养对初情期启动的调控。

KISS-1/GPR54基因及其在生殖中的作用

KISS-1及其受体GPR54基因对青春期的正常启动具有重要作用。青春期开始前后,动物下丘脑中KISS-1和GPR54 mRNA水平很高,Kisspeptins(KISS-1基因产物)通过激活GPR54增加促性腺激素的释放,KISS-1基因的表达受性腺类固醇激素的调控。GPR54基因突变可以导致人和鼠的特发性促性腺激素分泌不足性腺机能减退症和促性腺激素依赖性性早熟。文章还介绍了KISS-1、GPR54基因的结构、表达、多态性以及和其它生殖调控因子之间的相互关系。

KISS1基因与哺乳动物繁殖性能关系的研究进展

转移抑制基因(KISS1)被公认为是促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasing hormone,GnRH)的关键上游调节因子,在下丘脑-垂体-性腺轴系统中起到一个中枢节点的作用。近年来随着表达定位研究技术的发展,已在多个物种的多个组织中检测到了KISS1基因的表达。作为繁殖领域的关键候选基因,KISS1基因如何调控动物繁殖性能已有大量文献报道,文章就KISS1基因在不同繁殖相关组织表达以及在生产实践中的应用做一综述。

Kiss-1/GPR54系统在不同发育阶段五指山猪下丘脑中的表达

采用荧光定量技术研究Kiss-1mRNA和GPR54mRNA在30、60、90(初情期)和120日龄五指山母猪下丘脑表达情况,并检测血清中FSH、LH、E2、P4浓度变化。结果表明:初情期前,Kiss-1mRNA表达量随着五指山猪年龄的增长逐渐升高,到初情期(90日龄)时表达量达到最高(P<0.05),120日龄(初情期后)时表达量逐渐降低(P<0.05)。GPR54mRNA表达不受影响。血清FSH、LH、E2、P4浓度变化的趋势大体一致,初情期前各激素水平逐渐升高,但差异不显著(P>0.05);至初情期(90日龄)时显著升高,且达到一个峰值;血清FSH、LH和E2浓度在90日龄和120日龄时差异不显著(P>0.05),P4浓度在90日龄时显著高于120日龄(P<0.05)。结果显示:Kiss-1基因是五指山猪初情期启动的关键因子。

大鼠下丘脑KiSS-1与GnRH mRNA的表达

目的:观察不同发育阶段雄性大鼠下丘脑KiSS-1和GnRH mRNA表达,探讨KiSS-1在性发育的启动和正常生殖功能调节中的作用。方法:雄性SD大鼠分为幼年期(12d)、未发育期(20d)、发育早期(35d)、性发育期(45d)和性成熟期(75d)共5组,每组6只,分离下丘脑,采用RT-PCR和实时定量-PCR的方法检测各发育阶段大鼠下丘脑KiSS-1和GnRH mRNA的水平。化学发光法检测各发育阶段大鼠血清睾酮水平。结果:大鼠随发育过程KiSS-1 mRNA转录水平逐渐升高,到性发育期水平最高,成年期略下降,但保持相对较高水平。未发育期、发育早期、性发育期和性成熟期大鼠KiSS-1 mRNA水平分别是幼年期的1.7、2.1、3.5、2.0倍。GnRH与KiSS-1表达变化呈正相关(r=0.905,P<0.05),GnRH激活晚于KiSS-1。GnRH在性发育期转录水平最高,未发育期、发育早期、性发育期和性成熟期表达水平分别是幼年期的1.1、1.9、2.4、1.9倍。大鼠在性发育期睾酮水平较发育前显著升高,性成熟期水平最高。结论:KiSS-1表达与GnRH表达具有正相关性,其可能参与GnRH的调控,与青春期启动和生殖功能调节有关。

KiSS-1/GPR54系统在不同发情周期母羊下丘脑中的表达规律

【目的】研究发情周期各阶段KiSS-1/GPR54系统在母羊下丘脑中的表达规律。【方法】将12只雌性小尾寒羊随机分为4组,每组3只,分别于发情前期、发情期、发情后期和间情期,颈动脉放血致死后采集其下丘脑,采用实时荧光定量PCR技术研究母羊发情周期不同阶段下丘脑中KiSS-1和GPR54基因的表达规律。【结果】母羊发情周期各阶段下丘脑上均有KiSS-1和GPR54基因表达;发情期母羊下丘脑KiSS-1基因的表达量极显著高于发情后期、间情期和发情前期(P<0.01),而发情后期、间情期和发情前期之间差异不显著;发情周期的不同阶段,GPR54基因在母羊下丘脑中的表达量无显著差异(P>0.05)。【结论】发情期母羊下丘脑KiSS-1基因的表达量极显著高于发情周期其他阶段(P<0.01),GPR54基因在母羊发情周期各阶段的表达量无显著差异。

食管鳞状细胞癌组织中KISS-1和MMP-9蛋白和mRNA的表达

目的:探讨肿瘤转移抑制基因KISS-1及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与食管鳞状细胞癌侵袭、转移的关系。方法:采用免疫组织化学SP法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测50例食管鳞状细胞癌及50例正常食管组织中KISS-1及MMP-9蛋白和mRNA的表达情况,分析其与食管鳞状细胞癌患者各临床病理特征的关系及二者的相关性。结果:食管鳞状细胞癌组织中KISS-1蛋白的阳性表达率(61.0%)低于正常食管组织(82.0%)(χ2=5.877,P<0.05),并且其低表达与淋巴结转移密切相关(χ2=4.340,P<0.05)。食管鳞状细胞癌组织中MMP-9蛋白的阳性表达率(72.0%)高于正常食管组织(52.0%)(χ2=4.244,P<0.05),并且其高表达与肿瘤的浸润、淋巴结转移及分化程度均相关(P均<0.05)。食管鳞状细胞癌组织中KISS-1mRNA的阳性表达率(56.0%)及表达水平(0.992±0.090)均低于正常食管组织(88.0%,1.075±0.181)(P<0.05),并且其低表达也与淋巴结转移密切相关(P<0.05)。食管鳞状细胞癌组织中MMP-9mRNA的阳性表达率(72.0%)及表达水平(1.030±0.153)均高于正常食管组织(44.0%,0.943±0.085)(P<0.05),并且其高表达与肿瘤的深层浸润和淋巴结转移密切相关(P<0.05)。KISS-1与MMP-9蛋白和mRNA的表达均呈负相关(P<0.05)。结论:KISS-1的低表达和MMP-9的过表达可能与食管鳞状细胞癌的浸润、转移有关。二者有望成为判定食管鳞状细胞癌侵袭和转移能力的指标。

人食管鳞状细胞癌组织中KiSS-1 mRNA及蛋白的表达

目的:探讨食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中KiSS-1mRNA及蛋白的表达情况。方法:分别采用原位杂交方法和免疫组织化学SP法对49例ESCC、26例癌旁不典型增生组织及49例正常食管黏膜组织进行KiSS-1mRNA和蛋白的检测。结果:ESCC组织、癌旁不典型增生组织及正常食管黏膜组织中KiSS-1mRNA的阳性表达率分别为61.2%(30/49)、80.8%(21/26)、95.6%(47/49),依次升高(χ2=17.856,P<0.01);Kiss-1蛋白的阳性表达率分别为69.4%(34/49)、80.8%(21/26)、98.0%(48/49),依次增高(χ2=14.340,P<0.01);ESCC组织中KiSS-1mRNA及蛋白表达与食管癌组织学分级、浸润深度无关(P>0.05),与淋巴结转移有关(P<0.05);ESCC组织中KiSS-1mRNA与蛋白的表达呈正相关(rs=0.653,P<0.05)。结论:KiSS-1表达缺失与ESCC的发生、转移有关;KiSS-1有望成为ESCC早期诊断和判断预后的辅助指标。

胎盘组织KiSS-1 mRNA及其蛋白肽metastin表达在子癎前期发病中的意义

目的:探讨胎盘组织中KiSS-1mRNA及其蛋白肽metastin表达在早发重度子癎前期发病中的作用。方法:采用RT-PCR、Western blot、免疫组化方法检测57例子癎前期患者(轻度15例和重度42例,其中早发重度12例,晚发重度30例)和30例正常晚期妊娠者胎盘组织中KiSS-1mRNA及其蛋白肽metastin的表达水平和定位。结果:胎盘组织中蛋白肽metastin主要表达在绒毛的合体滋养细胞和细胞滋养细胞。子癎前期组胎盘组织中KiSS-1mRNA及蛋白肽metastin表达分别为(1.73±0.24)和(78.41±7.96)μg/100μg总蛋白,显著高于正常晚期妊娠组(P均<0.01),以早发重度子癎前期组尤为显著。结论:子癎前期存在KiSS-1mRNA及其蛋白肽metastin表达增强,且早发重度子癎前期组表达显著增高,可能是早发重度子癎前期发病的主要原因之一。

人胰腺癌KiSS-1基因mRNA表达及其临床意义

目的:研究人胰腺癌细胞株和胰腺癌组织中KiSS-1表达及其临床意义。方法:应用RT-PCR方法检测KiSS-1基因mRNA在人胰腺癌细胞株AsPC-1、40例胰腺癌及27例转移灶和9例正常胰腺组织中的表达情况。结果:人胰腺癌细胞株AsPC-1和胰腺癌组织中KiSS-1mRNA表达水平均显著低于正常胰腺组织(P值均为0·000),其中As-PC-1中表达水平最低,为0·124±0·046。KiSS-1mRNA的表达与性别、年龄、肿瘤大小及组织学分级无关,与临床分期、有无转移和神经侵犯密切相关。在Ⅲ、Ⅳ期胰腺癌组织中KiSS-1基因的表达为0·137±0·110,明显低于Ⅰ、Ⅱ期,P=0·000。KiSS-1基因在无转移和有转移的胰腺癌原发灶和转移灶组织中表达水平呈降低趋势,差异有统计学意义(P值均为0·000),转移灶中的表达水平最低。有神经侵犯的胰腺癌原发灶KiSS-1基因表达显著低于无神经侵犯的胰腺癌原发灶(P=0·000),其表达与有无神经侵犯Kendall等级相关系数τ=0·689,P=0·004。结论:KiSS-1基因转录和表达降低与胰腺癌侵袭和转移密切相关,可能参与胰腺癌侵袭和转移的调控。

子宫内膜异位症患者内膜组织中kiss-1及血清和腹腔液中sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES表达的意义

目的研究子宫内膜异位症患者内膜组织中kiss-1及血清和腹腔液中血管内皮生长因子可溶性受体（sflt-1）、血管内皮生长因子（VEGF）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、T细胞表达和分泌的调节性激活因子（RANTES）表达的意义。方法选取子宫内膜异位症行腹腔镜手术患者256例作为观察组,根据病变部位、大小、粘连程度分为Ⅰ~Ⅱ期组76例,Ⅲ~Ⅳ期组180例。选取同期因卵巢良性肿瘤、卵巢系膜囊肿、宫颈病变等入院治疗的患者114例作为对照组。采用免疫组化法测定受检者子宫内膜组织标本kiss-1的表达情况,采用ELISA方法测定受检者血清和腹腔液中sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES表达情况。结果观察组kiss-1阳性表达率明显低于对照组（P〈0.05）。Ⅰ~Ⅱ期组kiss-1阳性表达率明显高于Ⅲ~Ⅳ期组（P〈0.05）。观察组血清和腹腔液中sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES表达水平明显高于对照组（P均〈0.05）。Ⅰ~Ⅱ期组血清和腹腔液中sflt-1、VEGF和RANTES表达水平低于Ⅲ~Ⅳ期组（P〈0.05）。结论kiss-1、sflt-1、VEGF、MCP-1、RANTES水平与子宫内膜异位症发展密切相关,可能参与了其发病过程,可以作为子宫内膜异位症的辅助检测指标。

Kisspeptin/Kiss1r系统在多囊卵巢综合症大鼠下丘脑弓状核的表达

目的:通过构建多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型,探讨其下丘脑弓状核Kisspeptin/kiss1r系统和促性腺激素释放激素(GnRH)的表达变化及相互作用。方法:孕10dWistar大鼠雌性后代随机分为对照组和PCOS组。采用来曲唑构建大鼠PCOS模型。造模结束后,测定体重参数和内分泌激素的改变;观察卵巢组织的病理学改变;同时用免疫组织化学、免疫印迹法和实时荧光定量PCR检测下丘脑弓状核Kisspeptin、Kiss1r和GnRH的蛋白和各自mRNA水平。结果:成功构建PCOS大鼠模型,体重增加(P<0.05),体脂肪含量增加(P<0.05),血清黄体生成激素(LH)和睾酮(T)水平增加显著(P<0.01),具有典型的PCOS内分泌和卵巢的改变;与对照组相比,PCOS组GnRH的蛋白和mRNA表达显著增加(P<0.01),Kisspeptin蛋白和其mRNA表达下调(P<0.05),未见Kiss1r蛋白和其mRNA表达的显著改变(P>0.05)。结论:大鼠下丘脑弓状核Kisspeptin/Kiss1r系统表达下调,GnRH表达异常增加,与PCOS的神经内分泌有关,可能在PCOS疾病的发生发展中有着重要的作用。