吡那地尔对人肺动脉平滑肌细胞K_(ATP)通道mRNA表达的影响

目的:研究经典KATP开放剂吡那地尔对原代培养人肺动脉平滑肌细胞KATP通道mRNA表达的影响,以探讨KATP通道在肺动脉高压发生发展中的分子生物学机制。方法:分离人3～4级肺小动脉,原代培养人肺动脉平滑肌细胞。分成ET-1组、ET-1+吡那地尔组及ET-1+吡那地尔+格列本脲组。以Trizol法抽提总RNA,逆转录为cDNA,采用Real-timePCR方法检测各组细胞KATP通道SUR2B和Kir亚单位mRNA表达量。结果:ET-1组KATP通道SUR2BmRNA表达量较对照组明显减少,为对照组的0.09±0.01倍(P<0.05,n=3)。加用吡那地尔可拮抗ET-1作用,提高SUR2BmRNA表达量,为ET-1组的10.94±1.13倍,为对照组的0.97±0.03倍(P>0.05,n=3)。格列本脲可拮抗吡那地尔作用,减少SUR2B mRNA表达量,为ET-1+吡那地尔组的0.10±0.01倍,为对照组的0.07±0.02倍(P<0.05,n=3)。各组细胞KATP通道Kir6.1 mRNA表达量无统计学差异。结论:KATP开放剂吡那地尔可增加原代培养人肺动脉平滑肌细胞KATP通道SUR2B mRNA表达量,这可能是其调节肺动脉平滑肌细胞KATP通道表达和功能的机制。