核转录因子KLF4与VEGF启动子上游DNA序列相互作用研究

目的研究体内核转录因子KLF4是否与血管内皮生长因子(VEGF)启动子上游DNA序列相互作用。方法采用染色质免疫沉淀法鉴定人胃癌AGS细胞内KLF4与VEGF启动子上游DNA序列的相互作用,通过检索VEGF基因序列,发现在VEGF基因转录起始位点上游存在3个KLF4结合位点,针对这3个KLF4结合位点核心DNA序列(CACCC)设计3对PCR引物,利用KLF4抗体进行染色质免疫沉淀,PCR扩增。结果针对VEGF上游启动序列3个潜在的KLF4结合位点设计的引物,以KLF4特异性结合的DNA片段为模板,能够扩增出目的条带,与阴性对照组比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论体内KLF4可能与VEGF启动子上游DNA序列相互作用。

转录因子KLF4在内皮祖细胞分化过程中的表达及意义

目的探讨转录因子KLF4在内皮祖细胞分化过程中的表达及意义。方法以Ficoll密度梯度离心法从SD大鼠骨髓分离单个核细胞,用含20%胎牛血清的DMEM/F12培养基培养,以DiI-ac-LDL、FITC-UEA-I双荧光染色和FITC标记的CD133、CD34进行鉴定。细胞免疫化学法检测原代培养7d内皮祖细胞KLF4的表达,RT-PCR法检测原代培养5、10、15d后细胞内KLF4及一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达。结果经DiI-ac-LDL、FITC-UEA-I双荧光染色鉴定证实获得的细胞为内皮祖细胞。细胞免疫化学检测发现KLF4表达于细胞核内;RT-PCR检测结果显示,5、10、15d大鼠内皮祖细胞的KLF4mRNA表达(分别为0.830±0.017,0.980±0.014,1.090±0.014)逐渐增强(P<0.01),eNOSmRNA表达(分别为0.310±0.008,0.500±0.011,0.650±0.010)也逐渐增强(P<0.01)。结论在内皮祖细胞分化为内皮细胞的过程中,KLF4的表达逐渐增强,并与成熟内皮功能相关。

锌指蛋白转录因子KLFs家族与心血管疾病

心血管疾病（cardiovasculardisease）是一系列与心脏血管相关的循环系统疾病。循环系统是指人体内运送血液的器官和组织，主要包括心脏和血管（动脉、静脉、微血管）。心血管疾病以血管病变为主要病理特征，其主要诱因包括炎症反应、内皮细胞损伤、脂代谢异常、血栓和动脉粥样硬化等。在诸多心血管疾病中，危害性最大患病人数最多的有心肌肥大、动脉粥样硬化、糖尿病、冠心病及肥胖等。

Krüppel样转录因子8(KLF8)的结构及功能

Krüppel样转录因子8(Krüppel-like factor 8,KLF8)是KLFs家族中的一员.KLF8在羧基端含有3个保守的C2H2锌指结构域,用于与DNA结合.KLF8的转录受粘着斑激酶(focal adhesionkinase,FAK)、KLF1(erythroid krüppel-like factor1)、KLF3(basic Krüppel-like factor)的调控.类泛素化是KLF8翻译后主要的修饰方式.KLF8在氨基端含有特定的PVALS/T基序,与辅助抑制因子C末端结合蛋白(C-terminal binding protein,CtBP)相互作用,抑制调节区含CACCC元件的基因表达.此外,还可以通过招募辅助激活因子p300和p300/CBP相关因子(P/CAF)辅助激活靶基因的表达.同时,KLF8在细胞周期循环、细胞侵袭和上皮-间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)、细胞致癌性转化及肿瘤发生发展中发挥作用.

转录因子KLF6在肝病中的作用

转录因子Kruppel-like factor 6(KLF 6)广泛涉及到细胞增殖、分化、凋亡以及生长相关信号,且通过调节增殖分化在哺乳动物细胞内环境中起重要作用。本文就KLF 6在肝病中的一些作用进行简要综述。

转录因子KLF4与肿瘤EMT的分子机制研究进展

上皮间质转化(EMT)是一种在胚胎发育和损伤修复过程中的生理性改变,其是肿瘤发生和发展过程中的一种常见现象,但作用及机制尚不完全清楚。目前已经发现多个转录因子通过调控下游靶基因参与了EMT的发生过程,其中Krüppel样因子4(KLF4)能够活化上皮基因的表达,同时抑制间质基因的表达,在EMT发生过程中发挥着关键作用,可能是肿瘤治疗的新靶点。该文系统地总结了转录因子KLF4在肿瘤EMT发展过程中的作用及分子机制。

锌指转录因子GKLF在子宫内膜癌中的表达及其与手术病理分期的相关性

目的:探讨锌指转录因子GKLF/KLF4 mRNA在子宫内膜癌组织及良性子宫内膜组织中的表达,分析其表达的变化与手术病理分期的相关性。方法:采用半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测37例子宫内膜癌组织(研究组)和26例良性子宫内膜组织(对照组)中GKLF mRNA表达强度的变化。结果:(1)每份实验标本中均检测到GKLF mRNA表达,子宫内膜癌中的相对表达强度为0．38±0．19,良性内膜组织中的表达强度则为0．72±0．16,与良性内膜组织相比较,内膜癌组织中GKLF mRNA的表达强度降低。经统计学分析差异有统计学意义(P＜0．01);(2)子宫内膜癌组织GKLF mRNA的表达强度依次为Ⅰ期内膜癌0．56±0．12,Ⅱ期内膜癌0．35±0．09,Ⅲ期内膜癌0．17±0．08,子宫内膜癌的手术病理分期愈晚,GKLF mRNA的表达强度愈低,差异有统计学意义(P＜0．01);(3)随着病理分级的增高,GKLF mRNA的表达强度逐渐降低,差异有统计学意义(P＜0．01)。结论:在子宫内膜癌组织中,GKLF表达下调,而且GKLF mRNA的表达水平与子宫内膜癌的临床分期和病理分级呈负相关,提示GKLF可能参与了子宫内膜癌的发生和进展过程。

锌指样转录因子4与动脉粥样硬化研究进展

动脉粥样硬化（AS）是引起心血管事件的病理基础,其发病机制尚不明确。目前更倾向于认为AS是一种慢性血管炎症性疾病,血管壁在各种内源性及外界刺激下损伤,多种炎症因子、免疫细胞及相关细胞因子相互作用发挥炎性效应,形成慢性炎症。近来发现,锌指样转录因子（KLF）4是参与调控心血管系统的重要转录因子,能通过不同途径抑制或激活炎性因子,调控血管内皮细胞活化、巨噬细胞极化.

Krüppel样转录因子2的功能

Krüppel样转录因子2(Krüppel-like transcription factor 2,KLF2)作为KLF家族(KLFs)中重要一员,高表达于血管内皮细胞,参与节血管张力、抗炎、抗血栓和血管形成/血管新生等重要过程,对维持血管稳态至关重要.对KLF家族、KLF2结构特点、KLF2的血流依赖性调节、KLF2在血管内皮以及非血管内皮的作用进行综述.

LncRNA-MEG3竞争性结合miR-216a调控KLF9介导血管通透性减缓重症急性胰腺炎肾脏损伤的机制

目的研究LncRNA-MEG3竞争性结合miR-216a调控Kruppel样转录因子(KLF)9介导血管通透性减缓重症急性胰腺炎肾脏损伤的机制。方法选取SD大鼠20只,鼠龄8~12 w,体质量225~312 g,随机分为假手术组与模型组,每组10只。肾上皮细胞实验分为肾损伤组(未转染MEG3)、对照组(转染不相关序列)、转染组(转染MEG3)。苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾组织病理形态;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测肾组织及肾上皮细胞中LncRNA-MEG3、miR-216a、KLF9水平;流式细胞仪检测肾上皮细胞凋亡情况;Western印迹法检测肾上皮细胞中核因子(NF)-κB、肿瘤坏死因子(TNF)-α蛋白水平;双荧光素酶报告检测LncRNA-MEG3与miR-216a相关性。结果假手术组肾小球结构完整,无明显炎症浸润,模型组肾小球有所损伤,有炎性细胞浸润,可见重症急性胰腺炎肾损伤大鼠模型建立成功。与假手术组肾脏血管通透性(151.22±23.14)μg/g相比,模型组肾血管通透性(376.27±43.14)μg/g明显升高(t=14.54,P<0.001)。与假手术组相比,模型组LncRNA-MEG3、KLF9表达明显升高,miR-216a表达明显降低(P<0.05)。肾损伤组与对照组LncRNA-MEG3、KLF9、miR-216a水平无明显统计学差异(P>0.05),在经过转染LncRNA-MEG3后LncRNA-MEG3、KLF9水平较肾损伤组和对照组明显下降,miR-216a水平明显上升(P<0.05),表明转染成功。肾损伤组上皮细胞凋亡率[(61.34±5.22)%]与对照组[(60.13±5.42)%]无统计学差异(t=0.39,P=0.70),转染组上皮细胞凋亡率[(29.67±2.11)%]明显低于对照组(t=12.83,P<0.05)。肾损伤组与对照组上皮细胞中NF-κB、TNF-α蛋白水平无统计学差异(P<0.05),转染组上皮细胞中NF-κB、TNF-α蛋白水平较对照组明显降低(P<0.05)。转染MEG3后野生型上皮细胞中miR-216a活性明显增加(P<0.05),突变型上皮细胞中miR-216a活性无明显变化(P>0.05),表明miR-216a是MEG3的靶基因。结论LncRNA-MEG3通过调控mir-216a的表达,抑制KLF9活性,降低炎症因子的水平及肾上皮细胞的凋亡,对肾保护作用。

KLF7联合脂肪源性干细胞对脊髓损伤大鼠运动功能的影响及其机制

目的观察KLF样转录因子7(KLF7)联合脂肪源性干细胞(ADSC)对脊髓损伤大鼠运动功能的影响,并探讨其可能的机制。方法将30只SD大鼠随机分为KLF7联合ADSC组、ADSC组及对照组,每组10只,均采用离断右半脊髓的方法制备脊髓损伤模型。KLF7联合ADSC组于脊髓损伤组织注入100μL ADSC(ADSC均采用PKH26进行标记)及2μL AAV2-KLF7腺病毒,ADSC组仅注入100μL ADSC,对照组仅注入100μL PBS。术后1天及1、2、3、4周行运动功能评分(BBB评分);术后4周,应用诱发电位仪和磁刺激器经颅磁刺激运动诱发神经电生理反应,记录神经传导速度、潜伏期及波幅。术后4周处死,采用Western boltting法检测脊髓损伤组织KLF7、神经生长因子(NGF)及其受体酪氨酸激酶A(TrkA)蛋白相对表达量,计算脊髓损伤面积百分比及ADSC数量(以PKH26的光密度值表示)。结果与术后1天比较,各组术后1、2、3、4周BBB评分均升高(P均<0.05)。术后4周,KLF7联合ADSC组与ADSC组BBB评分、神经传导速度、波幅、ADSC数量及脊髓损伤组织NGF、TrkA蛋白相对表达量均高于对照组,潜伏期及脊髓损伤面积百分比均低于对照组,且KLF7联合ADSC组上述变化更明显(P均<0.05)。KLF7联合ADSC组脊髓损伤组织KLF7蛋白相对表达量均高于ADSC组及对照组(P均<0.05)。结论KLF7联合ADSC可减轻脊髓损伤大鼠的神经损伤,改善其运动功能;其机制可能与KLF7促进ADSC存活及提高脊髓损伤组织NGF、TrkA表达有关。

KLF6、Sp1蛋白在肝癌、肝硬化组织中的表达及意义

目的研究转录因子KLF6、Sp1在人肝细胞癌与肝硬化组织中的表达和意义。探讨KLF6、Sp1在肝癌、肝硬化中发生发展的作用机制及KLF6与Sp1之间的相关性。方法用免疫组化法对51例肝癌组织、35例癌旁肝硬化组织、10例良性病变而切除的正常肝组织转录因子KLF6、Sp1进行蛋白检测。结果KLF6、Sp1蛋白在肝癌组织表达率高于癌旁肝硬化组织,正常肝组织中全部呈阴性表达(P<0.001)。结论KLF6、Sp1蛋白过表达在肝细胞癌、肝硬化的发生发展中可能起重要作用,在肝硬化组织中KLF6与Sp1具有正相关性。

KLF6、KLF4及APC基因蛋白在结直肠癌中的表达和意义

目的研究转录因子KLF6、KLF4及APC基因在结直肠癌中的表达和意义。探讨它们在结直肠癌发生发展中的作用机制。方法应用免疫组化Envision法对58例结直肠癌组织、20例结直肠黏膜慢性炎症组织中的KLF6、KLF4及APC基因进行蛋白检测。结果KLF6、KLF4及APC蛋白在结直肠癌组织表达率分别为77.59%(45/58)、51.79%(30/58)、65.50%(38/58),低于在结直肠黏膜慢性炎症组织中的100%(20/20)、85%(17/20)、90%(18/20),差异有统计学意义(P<0.05);KLF6、KLF4及APC蛋白在结直肠癌组织中的表达与其浸润深度及预后有关(P<0.05),与淋巴结转移及Dukes分期无关(P>0.05)。结论KLF6、KLF4及APC基因可能在结直肠癌的发生发展中起重要作用。

KLF8及Snail1在结肠癌中的表达及意义

目的:探讨结肠癌组织中Krüppel样转录因子8(KLF8)、锌指蛋白转录因子1(Snail1)的表达及临床意义。方法:收集2015年11月—2017年11月70例结肠癌组织与30例癌旁正常组织,采用免疫组织化学法检测上述组织中KLF8、Snail1的表达情况,分析两者的相关性及临床病理特征的关系。结果:KLF8在结肠癌组织中的阳性表达率为71. 4%,高于癌旁正常组织20%,差异有统计学意义(P <0. 05); Snail1在结肠癌组织中的阳性表达率为54. 2%,高于癌旁正常组织的30%,差异有统计学意义(P <0. 05)。KLF8和Snail1在结肠癌组织中的表达与TNM分期、浸润深度及淋巴结转移有关(P <0. 05),与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度无关(P> 0. 05)。在结肠癌组织中两者表达不存在相关性。结论:KLF8和Snail1在结肠癌组织中高表达,且两者之间不存在相关性,提示KLF8和Snail1两者通过不同的途径参与结肠癌的发生、发展过程。

KLFs转录因子在山羊成肌细胞分化过程中的表达模式

本研究旨在研究KLFs家族6个成员(KLF3,KLF5,KLF7,KLF8,KLF9和KLF12)在山羊成肌细胞诱导分化过程中的表达模式及各个成员的相关性。利用qPCR检测KLFs在成肌细胞不同分化阶段中的表达丰度,并分析该家族成员间的相关性。结果显示,KLF3、KLF5、KLF7、KLF8、KLF9和KLF12在成肌细胞诱导分化过程中的表达水平逐渐升高,在诱导分化96 h的表达水平均极显著高于未诱导细胞中的表达水平(p<0.01);相关性分析结果显示6个成员mRNA表达水平存在极显著相关(p<0.01)。本研究明确了KLF3、KLF5、KLF7、KLF8、KLF9和KLF12在山羊成肌细胞诱导分化过程中的表达模式,为阐明该家族在山羊肌肉生长发育中的调控作用提供重要的基础数据。

转录因子KLF6在肝细胞癌、肝硬化组织中的表达及其意义

[目的]探讨转录因子KLF6蛋白在人类肝细胞癌(HCC)、肝硬化中发生发展的作用机制。[方法]用免疫组化方法对51例HCC组织、51例癌旁组织、15例肝硬化组织以及10例因良性病变而切除的正常肝组织中的转录因子KLF6进行蛋白检测。[结果]KLF6蛋白阳性表达率在HCC组织、癌旁组织、肝硬化组织、正常肝组织分别为86.3%(44/51)、68.6%(35/51)、26.7%(4/15)、0。KLF6蛋白随着肝病恶化程度的增高而表达增多。KLF6蛋白表达在HCC组织高于癌旁组织(P<0.05),癌旁组织高于肝硬化组织(P<0.01),HCC组织与癌旁组织均显著高于正常肝组织(P<0.01)。KLF6蛋白阳性表达与肝癌分化程度相关(P<0.05)。[结论]KLF6过表达在HCC与肝硬化的发生发展中起重要作用,其作用机制值得进一步研究。

转录因子KLF6研究进展及其在神经损伤再生中的作用

Kruppel-like factor6(KLF6)是Krupple样因子家族的一员,其广泛表达于多种组织中,涉及细胞生长与凋亡、肿瘤发生与发展、血管形成及血管损伤后的修复等多种生理病理过程。本文就目前研究中转录因子KLF6的生理和病理学功能,包括神经损伤后再生过程中的作用加以综述。

青少年发病的成人糖尿病7型新突变的可能位点

目的通过对一个高度怀疑为青少年发病的成人糖尿病7型(MODY7)家系进行信息收集及基因检测,寻找其基因突变位点,并探讨其临床特点。方法对1例病程20年、长期胰岛素治疗但血糖控制不佳、无酮症倾向、有3代糖尿病家族史的28岁女性患者进行基因检测,发现其携带KLF11基因变异,遂对其家系进行调查,收集家庭成员相关临床资料,并进行致病基因检测。基因检测方法为:首先对先证者采用芯片捕获高通量测序方法寻找致病基因,然后使用Sanger测序技术验证基因突变位点,并对其他家系成员使用Sanger测序技术筛查有无相同基因突变位点。结果该家系共检出2例成员存在KLF11基因杂合突变c.920C>T(编码区第920号核苷酸由胞嘧啶变异为胸腺嘧啶),导致氨基酸改变p.P307L(第307号氨基酸由脯氨酸变异为亮氨酸),为错义突变。这与其临床被诊断为糖尿病相符合。结论本研究的家系为KLF11基因c.920C>T(p.P307L)错义突变导致糖尿病家系,该突变位点可能是MODY7新突变位点。