KLF14基因rs4731702多态性与中国汉族人群2型糖尿病关联研究

目的:研究中国重庆地区汉族人群Kruppel-like factor 14(KLF14)基因rs4731702多态性与2型糖尿病(T2DM)的相关性。方法:在中国重庆地区汉族人群中选取200例健康对照者和200例T2DM患者。采用病例对照研究方法,通过收集临床资料,进行人体测量学及代谢指标的检测(包括空腹血浆胰岛素、血糖、血脂、血压等),计算体质指数、臀腰比、胰岛素抵抗指数及β细胞功能指数并提取DNA和测序。对两组KLF14基因的rs4731702位点进行基因分型,比较2组间的基因型和等位基因频率,并进行与T2DM的关联分析。结果:T2DM组KLF14基因rs4731702位点空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、极低密度脂蛋白(VLDL)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)明显高于NC组,差异有统计学意义(p<0.05)。健康对照组中CC+CT基因型178例(89%)、TT基因型22例(11%),C、T等位基因频率分别为67.5%和32.5%;T2DM组CC+CT基因型188例(94%)、TT基因型12例(6%),C、T等位基因频率分别为74.5%和25.5%,2组间差异有统计学意义(p<0.05)。结论:KLF14基因rs47313702位点的多态性可能与中国汉族人群T2DM发病相关。由于T2DM发病机制较为复杂,且基因多态性有一定的地域性和异质性,该基因风险等位基因C在正常对照人群中也普遍存在,故其在T2DM的发病过程中可能不起显著作用。

KLF14基因rs972283多态性与2型糖尿病的关系研究

目的研究KLF14基因rs972283多态性与宁夏2型糖尿病的关系。方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性的方法(RFLP-PCR),对宁夏2型糖尿病患者(DM组)和正常对照组(NC组)KLF14基因rs972283位点进行基因多态性和等位基因频率分析,测定相应生化指标。结果 KLF14基因rs972283位点多态性在DM组和NC组的分布差异无统计学意义(P>0.05);DM组内携G等位基因患者的体质指数(BMI)、腰臀比(WHR)、血胆固醇(TC)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均高于携A等位基因者,DM组内携G等位基因者胰岛β细胞功能(HOME-β)较携A等位基因者低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 KLF14基因rs972283位点多态性可能与宁夏2型糖尿病发病无关,与肥胖、血脂代谢等有关。

上调KLF14基因对妊娠高血压大鼠的作用及其作用机制研究

目的研究上调KLF14基因对妊娠高血压大鼠的作用及作用机制。方法将30只清洁级健康SD妊娠大鼠建立妊娠高血压模型,分为空白组、上调组和下调组,每组各10只。检测大鼠血压、β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、血栓素A2(TXA2)、前列环素(PGI2)、24 h尿蛋白,记录大鼠胚胎发育数量、胚胎重、胎仔重,观察病理学变化,检测Polo样蛋白激酶4(PLK4)、精氨酸加压素(AVP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)蛋白表达。结果上调组收缩压、舒张压、平均动脉压、β-HCG、TXA2、24 h尿蛋白低于下调组和空白组,PGI2高于下调组和空白组,胚胎发育数量、胚胎重、胎仔重大于下调组和空白组,差异均有统计学意义(P <0.05)。下调组收缩压、舒张压、平均动脉压、β-HCG、TXA2、24 h尿蛋白高于空白组,PGI2低于空白组,胚胎发育数量、胚胎重、胎仔重小于空白组,差异均有统计学意义(P <0.05)。上调组AVP、AngⅡ、PLK4低于下调组和空白组,下调组AVP、AngⅡ、PLK4高于空白组(P <0.05)。结论上调KLF14基因能够改善妊娠高血压大鼠血压以及胚胎重,通过调控KLF14、AVP、AngⅡ表达可改善β-HCG、TXA2、PGI2、24 h尿蛋白水平。

KLF14基因rs4731702位点多态性与妊娠期糖尿病的关联性研究

目的研究KLF14基因单核苷酸多态性位点rs4731702与妊娠期糖尿病(GDM)的相关性以及KLF14基因rs4731702位点不同基因型与体质量指数(BMI)、胰岛素抵抗之间的关系。方法该研究采用病例对照法,随机选取妊娠期糖尿病孕妇(GDM组)和健康孕妇(对照组)各100例作为研究对象,对受试者进行体格检查,检测相关生化指标,计算出胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰岛β细胞功能指数(HOMA-β),并采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)技术,对两组孕妇KLF14基因rs4731702位点进行基因分型,比较两组间的基因型和等位基因频率,进行与GDM的关联分析。结果 KLF14基因rs4731702位点C等位基因频率、CC基因型频率在GDM组均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。GDM组内CC基因型者BMI、FPG、TG、HbA1c、HOMA-IR较CT、TT基因型者高,差异有统计学意义(P<0.05);CC基因型者FINS、HDL、HOMA-β较CT、TT基因型者低,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析提示KLF14基因CC基因型与GDM密切相关(P=0.005,RR=25.128)。结论 KLF14基因rs4731702位点CC基因型在GDM发病过程中起一定的作用,可能为GDM的易感基因,且与胰岛功能异常、脂肪代谢异常以及肥胖有关。KLF14基因rs4731702位点的多态性研究有助于揭示脂代谢异常、胰岛素抵抗与GDM发病的关系。

KLF14基因过表达对改善Hepa1-6小鼠肝癌细胞胰岛素抵抗的作用

目的探讨KLF14基因过表达对小鼠肝癌细胞Hepa1-6胰岛素抵抗的影响。方法实时荧光定量PCR(RT-QPCR)检测KLF14基因m RNA在健康C57BL/6J小鼠各组织的表达分布情况;构建小鼠KLF14基因重组真核表达质粒p IRES2-EGFP-KLF14并转染Hepa1-6细胞,RT-PCR法检测KLF14基因m RNA的表达;Western印迹检测KLF14及p-AKT蛋白水平的表达。结果成功构建p IRES2-EGFP-KLF14质粒;转染肝癌细胞48 h后,KLF14 m RNA和蛋白水平明显高于对照组和空载组(P<0.01);转录水平上KLF14基因在小鼠体内普遍表达,其m RNA相对表达量由高到低依次为心脏、骨骼肌、肝脏、脂肪、小肠、肾脏、脑、肺、胃、脾、附睾;非转染组给予血清干预后,正常人血清处理组和糖尿病病人血清处理组无明显差异;而转染组给予血清干预后,糖尿病病人血清处理组p-AKT表达量较正常人血清处理组明显增加;在胰岛素刺激情况下,无论转染组或非转染组,给予PI3K抑制剂LY294002后,p-AKT表达受抑。结论 KLF14在C57BL/6J小鼠多种组织均有表达,提示其可能在维持正常生理功能中发挥一定作用;KLF14基因过表达可促进AKT的活化,并且其增加胰岛素敏感性的作用在糖尿病状态下较正常人更为明显。

香青兰总黄酮对子痫前期大鼠血管重构、内皮功能及胎盘组织中KLF14基因的影响

目的研究香青兰总黄酮对子痫前期大鼠血管重构、内皮功能及胎盘组织中KLF14基因的影响。方法6~8周龄雌性妊娠(妊娠第12天)SD大鼠55只,随机分为空白组(健康大鼠)、子痫组(子痫模型大鼠)、21 mg/kg组(模型+21 mg/kg组香青兰)、42 mg/kg组(模型+42 mg/kg组香青兰)、84 mg/kg组(模型+84 mg/kg组香青兰),每组11只。ELISA检测各组大鼠内皮功能相关指标;高分辨率小动物超声系统检测股动脉血流介导的FMD;H-E染色检测各组大鼠胎盘组织病理学形态;检测血管重构相关指标PWV;RT-PCR检测KLF14mRNA水平。结果空白组大鼠胎盘完整;子痫组胎膜组织变薄,完整性差,有炎性细胞浸润,胎盘绒毛水肿、结构破坏、血管充血扩张。与子痫组相比,21 mg/kg组、42 mg/kg组、84 mg/kg组大鼠胎盘组织呈现不同程度的改善,且以高剂量组效果最为明显。空白组及香青兰总黄酮各剂量组FMD呈现先升高后下降的趋势,在2 min时达到峰值,子痫组FMD呈持续升高趋势,在5 min时达到峰值,时间与分组间有交互作用(P<0.05)。空白组及21 mg/kg组、42 mg/kg组、84 mg/kg组FMD峰值均高于子痫组(P<0.05)。子痫组FMD峰值高于21 mg/kg组、42 mg/kg组、84 mg/kg组(P<0.05)。与空白组相比,子痫组ET-1、AngⅡ、PWV升高,NO、NOS、cGMP、KLF14降低(P<0.05)。在经过香青兰总黄酮的干预后,21 mg/kg组、42 mg/kg组、84 mg/kg组ET-1、AngⅡ、PWV降低,NO、NOS、cGMP、KLF14升高,且呈现出剂量依赖性(P<0.05)。结论香青兰总黄酮可通过降低ET-1、AngⅡ,提高NO、NOS、cGMP、FMD,从而改善血管内皮功能,降低PWV改善血管重构通过提高KLF14水平改善内皮功能并促进胎儿生长。