应用KLH-ELISA及KLH-IHA诊断血吸虫病的研究

已经证明,日本血吸虫尾蚴及虫卵具有与钥孔(虫戚)血兰蛋白(Keyhole Limpet Haemocyanin,KLH)的共同抗原决定簇。抗KLH血清能引起尾蚴膜反应(CHR),但不引起环卵沉淀反应(COP)。本文试用KLH检测急、慢性血吸虫病,并与常规使用的SEA进行了对比。

4种抗原检测日本血吸虫病人血清中特异性IgG和IgG_4考核疗效的比较研究

目的探讨ＳｊＭＡｇ、ＫＬＨ及ｒＳｊ３２检测日本血吸虫病人的特异性和敏感性及疗效考核价值。方法采用ＥＬＩＳＡ法，用ＳｊＭＡｇ、ＫＬＨ及ｒＳｊ３２及ＳＥＡ检测治疗前及治疗后不同时期血吸虫病人血清中的特异性ＩｇＧ、ＩｇＧ４及正常人和肺吸虫、肝吸虫、囊虫病人血清中的非特异抗体。结果ＳｊＭＡｇ、ＫＬＨ及ｒＳｊ３２的敏感性和特异性与ＳＥＡ比较差异均无显著性（均Ｐ＞０．０５）；用ＳｊＭＡｇ和ＫＬＨ分别检测治疗后１２个月血清中ＩｇＧ和ＩｇＧ４的阴转率均显著高于ＳＥＡ（Ｐ＜０．０１）、检测治疗后２４个月血清中ＩｇＧ４的阴转率均达９７．６％。结论ＳｊＭＡｇ、ＫＬＨ及ｒＳｊ３２具有与ＳＥＡ相似的诊断价值和较高的疗效考核价值；特异性ＩｇＧ４可能系一种疗效敏感抗体，可望成为疗效考核评价指标。

甘草酸单克隆抗体的制备与ELISA方法的建立

目的制备特异性的甘草酸单克隆抗体。方法通过活性酯法分别制备了甘草酸免疫抗原GA-KLH和包被抗原GA-OVA;用免疫抗原免疫Balb/c小鼠,采用间接竞争ELISA法筛选后,成功获得了能稳定分泌甘草酸单克隆抗体的杂交细胞株3D6;用阳性细胞株刺激小鼠,获得了高效价的、特异性很高的甘草酸单克隆抗体。结果经检测与甘草酸主要结构类似物甘草次酸的交叉反应率低于0.5%,与熊果酸、齐墩果酸等甘草酸结构类似物无交叉反应;将该方法应用于甘草样品实测,采用HPCL法验证,结果表明:所采用的ELISA分析方法测定的数据与HPLC分析方法有很好的相关性(r^2=0.9977)。结论为甘草酸ELISA快速检测试剂盒的开发奠定了良好的基础。