KLK7 mRNA在子宫颈癌组织的表达及其临床意义

目的探讨激肽释放酶7(KLK7)mRNA在宫颈癌组织中的表达及其临床意义。方法采用RT-PCR技术检测30例宫颈癌组织中KLK7 mRNA的表达,并以10例正常宫颈组织作对照。分析宫颈癌组织中KLK7 mRNA的表达水平与临床特征的相关性。结果宫颈癌组织中KLK7 mRNA的表达水平为1.16±0.33,明显高于正常宫颈组织0.77±0.20,(P<0.05)。分化程度较低的宫颈癌组织KLK7 mRNA的表达水平高于分化程度较高的宫颈癌组织(P<0.05)。伴有淋巴结转移的宫颈癌组织KLK7 mRNA表达水平为1.47±0.22,明显高于淋巴结转移阴性1.10±0.31,(P<0.05)。结论KLK7在宫颈癌的浸润、转移过程中具有一定的作用,将成为宫颈癌诊断和判断预后的有力工具,也可成为基因或免疫治疗的新靶点。

KLK7蛋白在卵巢上皮性癌组织中的表达及临床意义

目的探讨KLK7蛋白在卵巢上皮性癌组织中的表达及其临床意义。方法采用Western-blot技术检测34例卵巢上皮性癌、19例卵巢交界性上皮性肿瘤、32例卵巢良性上皮性肿瘤及37例正常卵巢组织中KLK7蛋白的表达,并分析其与各临床病理指标的相关性。结果KLK7蛋白在卵巢上皮性癌及卵巢交界性上皮性肿瘤组织中的阳性表达率(分别为79.4%、47.4%)及表达水平(分别为0.85±0.15、0.53±0.09)均显著高于卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢组织(分别为15.6%、16.2%和0.20±0.13、0.22±0.11,P均<0.05);且KLK7蛋白在卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率和表达水平均与手术病理分期和淋巴结转移有明显的相关性(P<0.05)。结论KLK7蛋白在卵巢上皮性癌组织中呈高表达,其不同程度的表达增强与卵巢上皮性肿瘤可能有关。

KLK7蛋白及E-钙黏蛋白在卵巢癌中的表达及意义

目的:探讨KLK7蛋白和E-钙黏蛋白(E-cad)在卵巢癌中的表达。方法:应用免疫组化法检测40例卵巢癌中KLK7蛋白和E-cad的表达,将二者的表达情况与临床指标的关系进行统计分析。结果:(1)KLK7蛋白和E-cad在上皮性卵巢癌中的表达与患者年龄、组织类型无关;随着临床分期增高、组织分化降低、患者手术时有淋巴结或大网膜转移和腹腔液中有癌细胞,KLK7蛋白的阳性表达率呈上升趋势(P<0.05),而E-cad的阳性表达率呈下降趋势(P<0.05或P<0.01);(2)在卵巢癌中KLK7蛋白和E-cad表达呈负相关(P<0.05)。结论:KLK7蛋白在卵巢癌中呈高表达,E-cad则正好相反,二者与卵巢癌的侵袭转移有关,可为评估预后的有效指标;KLK7蛋白和E-cad在卵巢癌组中表达呈负相关,在卵巢癌侵袭转移中可能存在拮抗效应。

KLK7及E-cadherin在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨组织激肽释放酶7(Kallikrein 7,KLK7)和上皮性钙粘蛋白(E-cadherin,E-cad)在胰腺癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化法检测50例胰腺癌组织、50例癌旁组织及50例正常胰腺组织中KLK7和E-cad的表达,将二者的表达情况与临床病理特征的关系进行统计分析。结果①KLK7在胰腺癌组织中的阳性表达率(72.0%)及表达水平(0.80±0.14)均显著高于癌旁组织及正常胰腺组织(分别为18%、14%和(0.21±0.12)、(0.18±0.10),均p<0.05),而E-cad在胰腺癌组织中的阳性表达率(44.0%)及表达水平(0.51±0.09)均显著低于癌旁组织及正常胰腺组织[分别为100.0%、100.0%和(0.99±0.05)、(1.00±0.02),均p<0.05];②KLK7和E-cad在胰腺癌组织中的表达与患者年龄、组织类型无关;随着临床分期增高、组织分化降低、患者手术时有淋巴结或大网膜转移和腹腔液中有癌细胞,KLK7的阳性表达率呈上升趋势(p<0.05),而E-cad的阳性表达率呈下降趋势(p<0.05或p<0.01);③在胰腺癌中KLK7和E-cad表达呈负相关(p<0.05)。结论 KLK7在胰腺癌组织中呈高表达,而E-cad正好相反,二者与胰腺癌的侵袭转移有关,可为评估预后的有效指标;KLK7和E-cad在胰腺癌组中表达呈负相关,在胰腺癌侵袭转移中可能存在拮抗效应。

KLK7 mRNA表达与乳腺癌的关系

目的:探讨KLK7mRNA在乳腺癌中的表达及其与临床病理因素的关系。方法:采用real-time RT-PCR方法检测30例乳腺癌和正常组织,淋巴结转移癌、良性乳腺组织中KLK7的mRNA表达,分析其与临床病理因素的关系。结果:KLK7mRNA在乳腺原发癌组织中的表达均低于乳腺正常组织和良性乳腺肿瘤组织(P<0.001),在淋巴结转移癌组织中的表达低于原发癌(P=0.011)。KLK7 mRNA的表达水平与乳腺癌患者的无病生存率差异无统计学意义(P=0.384)。结论:KLK7mRNA表达在乳腺癌发生和进展过程中是动态变化的,KLK7mRNA是可能潜在的乳腺癌肿瘤标志物。

KLK7基因与妇科肿瘤的研究进展

KLK7基因(PRSS6)是人组织激肽释放酶家族的一个新成员,编码人角化层糜蛋白酶(SCCE,hK7),主要在上皮的角化层细胞中表达,参与皮肤脱屑过程。近来发现KLK7基因在人体许多组织、器官中都有表达,并与肿瘤细胞的生长、浸润、转移相关,尤其在妇科肿瘤领域,可作为判断早期转移和预后的标记物,也为治疗提供了新方向。

KLK7小分子抑制剂对卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭与转移的影响

为了探讨KLK7小分子抑制剂G284-1264对卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭和转移的影响,采用MTT法检测G284-1264处理后细胞的存活率;钙黄绿素-AM/PI活细胞/死细胞双染和流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期分布,同时用细胞划痕实验检测G284-1264对SKOV3细胞侵袭与转移的影响。结果显示:相同时间作用下,随着G284-1264浓度增大,SKOV3细胞存活率逐渐降低,24 h、48 h和72 h的IC50分别为110.0、48.62和39.64μmol/L,相比5-FU,G284-1264对SKOV3细胞表现出更强的抗增殖能力;钙黄绿素-AM/PI对细胞进行双染后,G284-1264作用组细胞活力明显降低;流式细胞术分析发现,G284-1264作用组G1期的细胞数目增加,G2期明显降低,且凋亡率高于空白组和阳性对照组;划痕实验表明G284-1264处理细胞36 h后,细胞迁移率降低16.49%。以上结果表明KLK7小分子抑制剂G284-1264能明显抑制人卵巢癌SKOV3细胞的增殖、侵袭与转移。

KLK7 siRNA对胃癌AGS细胞的抑制作用

目的:体外合成4条靶向人组织激肽释放酶7(kallikrein-related peptidase 7,KLK7)基因的片段,并筛选最有效siRNA片段,观察沉默KLK7表达对胃癌AGS细胞增殖和凋亡的影响。方法:设计4条靶向KLK7的siRNA片段(KLK7-siRNA-416、KLK7-siRNA-596、KLK7-siRNA-474、KLK7-siRNA-795),瞬时转染AGS细胞,qRT-PCR检测各干扰组KLK7 mRNA表达的变化,Western blotting检测AGS细胞中HK7蛋白(由KLK7基因编码)的表达,MTT法检测转染后AGS细胞的增殖,流式细胞术检测AGS细胞的细胞周期及凋亡。结果:4条KLK7-siRNA片段中以KLK7-siRNA-416的干扰效率最高,KLK7-siRNA-416组KLK7 mRNA表达率显著低于NC组[(0.32±0.049)%vs(0.93±0.071)%,P<0.01],KLK7-siRNA-416组转染48 h后AGS细胞HK7蛋白的表达水平显著降低[(1.18±0.198)vs(0.52±0.096),P<0.01]。KLK7-siRNA-416转染72 h后对AGS细胞增殖的抑制率达(37.70±0.12)%(P<0.05),该转染阻滞AGS细胞于G0/G1期但不影响AGS细胞的凋亡。结论:KLK7-siRNA沉默KLK7的表达可抑制AGS细胞的增殖,可阻滞细胞于G0/G1期,对细胞凋亡的作用不明显。

子宫内膜样腺癌中KLK7、E-Cad的表达及其与病情的相关性

目的探讨人角化层糜蛋白酶(KLK7)和E-钙黏蛋白(E-Cad)在子宫内膜样腺癌组织中的表达及其与病情的相关性。方法采用Western印迹检测10例增生期子宫内膜、10例不典型增生子宫内膜、30例子宫内膜样腺癌标本中KLK7、E-Cad蛋白的表达,分析其与各临床病理指标的相关性。结果 (1)KLK7、E-Cad在子宫内膜样腺癌中的蛋白表达与年龄无关;随着临床分期增高、组织分化降低、深肌层浸润、患者手术时有淋巴结转移,KLK7蛋白的阳性表达率呈上升趋势(P<0.01),而E-Cad的阳性表达率呈下降趋势(P<0.01,P<0.05)。(2)在子宫内膜样腺癌中KLK7蛋白和E-Cad表达呈负相关(P<0.05)。结论 KLK7蛋白在子宫内膜样腺癌中呈高表达,E-Cad在子宫内膜样腺癌中表达下降,两者可能与子宫内膜癌的病情进展及侵袭转移相关;KLK7蛋白和E-Cad在子宫内膜样腺癌组织中表达呈负相关,在子宫内膜癌侵袭转移中可能有协同效应。

乳腺癌组织KLK7mRNA的表达及其与临床病理特征的关系

目的建立人KLK7 mRNA荧光定量检测方法,对正常乳腺组织和癌组织KLK7 mRNA进行定量,分析其表达与部分临床病理特征的关系,探讨其临床意义。方法应用实时荧光定量PCR检测48例乳腺癌切除的组织中KLK7基因mRNA的表达量,并分析KLK7 mRNA的表达量与年龄、TNM分期、组织学类型、淋巴结转移、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)等临床病理特征的关系。结果KLK7 mRNA在乳腺正常组织相对表达水平为0.091±0.139,在乳腺癌组织中的相对表达水平为0.107±0.122,无统计学意义(P>0.05)。但KLK7 mRNA在有淋巴结转移的患者乳腺癌组织中的表达水平高于未转移组(P<0.05);在Ⅲ-Ⅳ期患者乳腺癌组织中高于Ⅰ-Ⅱ期患者(P<0.05);ER(+)阳性乳腺癌组织明显低于ER(-)乳腺癌组织(P<0.05)。KLK7 mRNA表达水平与患者年龄、组织病理分类以及孕激素受体状态无相关性(P>0.05)。结论乳腺癌组织KLK7 mRNA表达与TNM分期、ER状态及肿瘤转移情况有关。

Expression level and clinical significance of KLK7 and E-CAD in gastric cancer

Objective:To explore the expression level of klk7 and E-cad in serum of patients with gastric cancer and to explore the relationship of klk7 and E-cad with gastric cancer clinical pathological characteristics.Method: A total of 50 patients with gastric cancer, and 50 healthy persons were selected as the experimental group, benign gastric disease group and healthy group, respectively. A total of 24 patients in experimental group met surgery indications, and agreed to perform gastrectomy. They were divided into preoperative group and postoperative group. The serums levels of KLK7 and E-cad were detected by enzyme-linked immunosorbent assay.Results: The serum levels of KLK7 and E-cad were significantly higher than that of benign gastric disease group and normal control group. Compared with the experimental group after operation, MMP-2 and MMP-9 were decreased, KLK7 was significantly decreased and E-cad increased significantly after operation. Serum levels of KLK7 and E-cad in experimental group stage I were increased and stage IV decreased. Microvascular invasion was significantly correlated with serum KLK7 and E-cad. There was no significant correlation between tumor size, differentiation degree, depth and expression of KLK7 and E-cad. Serum KLK7 were significantly negatively correlated with E-cad expression in gastric cancer patients. Conclusions:KLK7 and E-cad are involved in the development and metastasis of gastric cancer. The serum expression of KLK7 and E-cad are significantly negatively correlated in patients with stomach cancer. There may be an antagonistic effect in gastric cancer development and metastasis. Serum level of KLK7 and E-cad can be used as indexes for progress monitoring.

卵巢上皮性肿瘤的临床病理特征及其KLK7蛋白的相关性研究

目的:研究KLK7蛋白在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及与肿瘤的临床病理特征的相关性。方法:采用免疫组织化学方法检测50份卵巢上皮性癌,20份卵巢交界性肿瘤,10份卵巢良性肿瘤,10份正常卵巢组织中KLK7蛋白的表达,并分析其临床意义。结果:KLK7蛋白在卵巢癌组织中的阳性表达率(68.0%)明显高于交界性肿瘤,良性肿瘤及正常卵巢组织(分别为30.0%,20.0%,10.0%,P<0.05),在卵巢癌组织中,KLK7蛋白阳性表达率与手术病理分期,病理分级,淋巴结转移有关(P<0.05)。结论:KLK7基因可能通过KLK7蛋白促进肿瘤的生长,浸润与转移,临床可以通过检测KLK7蛋白的表达率推断肿瘤的预后,选择治疗方案。

KLK7在胰腺癌中的表达及其对胰腺癌细胞生物学行为的影响

目的探讨KLK7在胰腺癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测92例胰腺癌组织芯片中KLK7的表达水平。分析KLK7与胰腺癌患者临床病理资料及预后的关系，统计学分析采用秩和检验、χ2检验、Logistic回归分析等方法。通过慢病毒载体建立KLK7稳定过表达的胰腺癌细胞株，采用KLK7-siRNA转染胰腺癌细胞株敲低KLK7; CCK-8法检测细胞增殖能力、化疗敏感性；Transwell法检测细胞侵袭和迁移能力。同时建立裸鼠皮下移植瘤模型，观察KLK7在裸鼠体内对肿瘤生长的影响。结果KLK7在胰腺癌组织中的表达水平高于癌旁组织（P〈0.05）。KLK7表达水平与脉管侵犯有相关性（χ2＝7.535，P〈0.05）；单因素及多因素分析结果发现，KLK7表达水平是影响胰腺癌脉管侵犯的独立危险因素（χ2＝7.535，P〈0.05）。在胰腺癌细胞株BxPC-3和CFPAC中过表达KLK7可以促进胰腺癌细胞增殖，降低化疗敏感性，促进其迁移和侵袭能力；降低KLK7的表达水平结果相反。体内实验结果提示，稳定过表达KLK7的胰腺癌裸鼠皮下移植瘤体积大于对照组（t＝4.479，P〈0.05）；过表达KLK7组肿瘤重量大于对照组（t＝2.831，P〈0.05）。结论KLK7在胰腺导管腺癌组织中呈高表达，是胰腺癌脉管侵犯的独立危险因素；KLK7可促进胰腺癌增殖，降低化疗敏感性，增加胰腺癌细胞侵袭迁移能力。

胃癌中基质金属蛋白酶、人组织激肽释放酶7和E-钙粘蛋白的表达及其临床意义

目的:探讨血清中MMPS、KLK7、E-cad在胃癌患者的表达与临床病理参数间的关系,并探讨二者相关性。方法:胃癌患者50例以及50例胃良性疾患者和50例健康体检者,分别命名为实验组、胃部良性疾患组和健康体检组。实验组中有24例符合手术条件同意行胃切除术的患者,细分为术前组和术后组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测胃癌患者术前术后(1月)、胃良性疾患者组、健康体检组血清中MMP-2、MMP-9、KLK7及E-cad水平,分析与各临床病理指标的相关性。结果:实验组血清KLK7及E-cad水平高于胃良性疾患组及正常体检组,差异均显著(P<0.05);实验组术后术前比较,MMP-2、MMP-9均较术前减少,KLK7及E-cad术后分别明显下降和升高,差异显著(P<0.05);实验组Ⅰ~Ⅳ期血清KLK7水平及E-cad水平随癌症的进展分别呈现升高和下降趋势,单因素方差分析结果显示,P<0.05;实验组中胃癌有无微血管转移与血清KLK7及E-cad表达水平有关(P均<0.05)。实验组的年龄分组、肿瘤大小、分化程度、浸润深度等不同病理特征的血清KLK7及E-cad水平的比较显示,KLK7及E-cad表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。胃癌患者血清KLK7及E-cad水平表达呈显著负相关(r=-0.386,P<0.01)。结论:KLK7和E-cad的表达上调或者下调都参与了胃癌的发生发展和转移过程。两者在胃癌患者血清中表达呈负相关,在胃癌发展及转移中可能存在拮抗效应。联合检测KLK7与E-cad可能对监测胃癌患者的病情及估计预后有一定帮助。

人组织激肽释放酶7和E-钙粘蛋白在胃癌中的表达及意义

目的探讨血清中 KLK7、E-cad在胃癌患者的表达与临床病理参数间的关系,并探讨二者相关性.方法胃癌患者 50例以及 50 例胃良性疾患者和 50 例健康体检者,分别命名为实验组、胃部良性疾患组和健康体检组.实验组中有24例符合手术条件同意行胃切除术的患者,细分为术前组和术后组.采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测胃癌患者术前术后（1月）、胃良性疾患者组、健康体检组血清中KLK7及E-cad水平,分析与各临床病理指标的相关性.结果实验组血清KLK7及E-cad水平高于胃良性疾患组及正常体检组,差异均显著（P〈0.05）;实验组术后术前比较,KLK7 及E-cad 术后分别明显下降和升高,差异显著（P〈0.05）; 实验组Ⅰ～Ⅳ期血清KLK7 水平及E-cad水平随癌症的进展分别呈现升高和下降趋势,单因素方差分析结果显示,P〈0.05; 实验组中胃癌有无微血管转移与血清KLK7 及E-cad表达水平有关,P均 〈0.05. 实验组的年龄分组、肿瘤大小、分化程度、浸润深度等不同病理特征的血清KLK7及E-cad水平的比较显示,KLK7及E-cad表达水平差异无统计学意义（P〉0.05）. 胃癌患者血清KLK7及E-cad水平表达呈显著负相关（r=-0.386,P〈0.01）.结论 KLK7和E-cad 的表达上调或者下调都参与了胃癌的发生发展和转移过程.两者在胃癌患者血清中表达呈负相关, 在胃癌发展及转移中可能存在拮抗效应.联合检测KLK7与E-cad可能对监测胃癌患者的病情及估计预后有-定帮助.

组织激肽释放酶7在不同前列腺组织中的表达

目的通过测定组织激肽释放酶7 mRNA(KLK7)在正常前列腺、良性增生前列腺及前列腺癌组织中的表达量,探讨KLK7与前列腺良、恶性病变之间的关系,并阐明其在肿瘤发生发展中的表达状态。方法利用荧光实时定量PCR(quantitative real-time PCR)的方法,检测15例正常前列腺、25例良性增生前列腺和53例前列腺癌组织中KLK7的表达量。比较其在上述前列腺组织中表达量的差异;比较KLK在不同临床分期以及是否存在骨转移的前列腺癌组织间的表达差异。结果 KLK7在前列腺癌组织中的平均表达量低于正常或良性病变的前列腺组织,差异有统计学意义(P<0.05);在晚期前列腺癌组织中的表达低于局限性前列腺癌,差异有统计学意义(P<0.05),在有或无骨转移的前列腺癌组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 KLK7在前列腺癌组织中呈低表达,在晚期前列腺癌组织中的表达低于局限性前列腺癌,提示该基因可能是潜在的诊断前列腺癌及判断预后的分子标志。

hK7多克隆抗体的制备及其在前列腺中的初步应用

目的:构建KLK7原核表达载体,诱导hK7蛋白表达,制备抗hK7多克隆抗体。并利用此抗体研究hK7在正常前列腺,前列腺增生和前列腺癌三种组织中表达的差异及其意义。方法:PCR扩增KLK7基因,和pET-21a载体构建pET-21a-KLK7重组表达质粒。转化大肠杆菌,筛选阳性克隆,IPTG诱导表达,纯化融合蛋白并鉴定,免疫家兔获得抗血清,ELISA检测抗体的效价。免疫组化检测组织芯片中正常前列腺,前列腺增生及前列腺癌组织中hK7蛋白的表达情况。结果:成功构建了pET-21a-KLK7重组表达质粒,经转化、诱导表达和纯化,SDS-PAGE证实重组hK7蛋白与预期结果一致。免疫家兔,得到抗血清,ELISA检测抗体效价为1:200万以上。免疫组化显示在前列腺癌中的表达要比在正常前列腺及前列腺增生中的表达下降(P<0.05)。结论:获得了高纯度的hK7蛋白,及高效价的多克隆抗体,前列腺癌中hK7的表达较正常和增生前列腺组织降低,hK7可能有潜在抑制前列腺癌的作用。

激肽释放酶与特应性皮炎的关系研究进展

特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)是一种反复发作的皮肤炎症性疾病,其发病机制复杂,与遗传、免疫、环境等因素有关。研究表明激肽释放酶5(kallikrein5,KLK5)和激肽释放酶7(kallikrein7,KLK7)在AD患者的表皮中表达上调,且激肽释放酶的抑制剂LEKTI(lympho-epithelial Kazal-type-related inhibitor,LEKTI)表达水平降低,表明激肽释放酶KLK5,KLK7可能与特应性皮炎的发病有关。

HPVE6/E7与KLK8基因联合在宫颈肿瘤中的表达及临床价值

目的:探讨HPVE6/E7联合KLK8基因在宫颈癌中的表达及临床意义。方法:随机选取我院妇产科收治的门诊和住院患者100例,采用免疫组化实验与RT-PCR实验,以分析宫颈肿瘤中HPVE6/E7联合KLK8基因的表达与价值。结果:随着病理分级的提升,患者的HPV-E6/E7 mRNA、KLK8检出阳性率逐渐提升,HPV-E6/E7 mRNA、KLK8对ASCUS、LSIL、HSIL患者的检出阳性率均显著高于炎症/正常患者,对ASCUS诊断的阳性预测值显著高于LSIL、HSIL,阴性预测值显著低于LSIL、HSIL,而对LSIL诊断的阳性预测值又显著高于HSIL,对LSIL诊断的阴性预测值低于HSIL。结论:HPVE6/E7联合KLK8基因在宫颈癌筛查中能够提高诊断的准确率,具有重要的临床意义。

人角化层糜蛋白酶及E钙粘蛋白在宫颈癌中的表达及意义

目的探讨不同宫颈组织中人角化层糜蛋白酶(KLK7)及E钙粘蛋白(E-cad)的表达及意义。方法选取正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)组织及宫颈癌组织各25例,采用Western印迹及免疫组化方法检测各组中KLK7及Ecad的表达,并对KLK7与宫颈癌各临床病理特征进行相关性分析。结果与正常宫颈组织相比,KLK7在CIN及宫颈癌组织中的表达明显升高,而E-cad的表达明显降低(P<0.05)。KLK7在宫颈癌中的表达随着FIGO分期的增加而成逐渐上升趋势。其组织分化程度低、淋巴结转移阳性者,KLK7阳性表达率显著增高(P<0.05)。结论 KLK7与E-cad在宫颈癌中的表达呈负相关,两者在促进宫颈癌侵袭转移方面可能起协同作用。