跨膜蛋白Klotho与纤连蛋白在瘢痕疙瘩表达水平及对术后复发的相关性分析

目的:探究Klotho蛋白结合纤连蛋白(FN)在瘢痕疙瘩术后复发的相关性。方法:选取2020年4月至2023年4月于我科就诊的耳部瘢痕疙瘩患者43例及普通求美者37例,实验对象分为研究组(瘢痕疙瘩组织和血清)及对照组(正常组织和血清)。采用免疫组织化学染色法及酶联免疫吸附法(ELISA)检测比较两组组织和血清标本中Klotho蛋白及上皮间质转化标志物纤连蛋白FN的表达。同时在术后1月、3月、6月、12月对瘢痕疙瘩患者进行随访、记录复发情况,分为复发组及未复发组。应用统计学方法分析Klotho的表达与瘢痕疙瘩纤维化标志物FN的表达及术后复发的相关性。结果:免疫组化结果:研究组Klotho阳性率较对照组低(P<0.05),为37.20%;研究组FN阳性率为72.10%,高于对照组阳性率(P<0.05);复发组Klotho阳性率为21.40%,低于未复发组(P<0.01);复发组FN阳性率为92.90%,高于未复发组(P<0.05)。Klotho和FN两种蛋白水平的相关性存在统计学差异(r=-0.307,P<0.05);ELISA检测血清结果:研究组Klotho表达含量为65.99(55.05,79.06)ng/mL,低于对照组(P<0.05);研究组FN表达含量为83.56(62.67,91.85)ng/mL,较高于对照组(P<0.01);经Logrank检验,在术后复发患者中Klotho阴性表达与FN蛋白阳性表达相关(P均<0.05)。结论:Klotho蛋白结合上皮间质转化标志物FN可作为预测瘢痕疙瘩术后复发的重要标志物。

Klotho、成纤维细胞生长因子23在矮身材儿童的水平变化及其与GH-IGF1轴的关系

目的探讨Klotho、成纤维细胞生长因子23(FGF23)在矮身材儿童的水平变化及其与生长激素(GH)-胰岛素样生长因子1(IGF1)轴的关系。方法选取2021年3月—2021年11月在河北省人民医院儿童保健门诊就诊的身材矮小的67例患儿作为研究组,并分为生长激素缺乏症组(GHD组)、特发性研究组(ISS组),分别有26和41例。另选取同期于该院儿童保健门诊行常规体格检查的正常身材儿童29例作为对照组。检测并比较研究组与对照组血清Klotho、FGF23、IGF1、胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)、血清钙、1,25-二羟维生素D3、磷酸盐水平。结果GHD组、ISS组身高-标准差数值(SDS)、体重-SDS均低于对照组(P<0.05)。各组年龄、性别、性发育分期、BMI-SDS比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。GHD组IGF1、IGFBP3、Klotho、FGF23水平低于ISS组、对照组(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,Klotho与IGF1、IGFBP3、FGF23、磷酸盐均呈正相关(rs=0.628、0.512、0.495和0.266,均P<0.05)。FGF23与IGF1、IGFBP3、磷酸盐均呈正相关(rs=0.440、0.484和0.277,均P<0.05)。结论GHD患儿Klotho、FGF23水平低下。Klotho、FGF23通过参与GH-IGF1轴的调节,在GHD患儿线性生长中发挥一定作用,并且在矮身材儿童血清磷酸盐稳态调节中有重要意义。

腹膜透析患者血清klotho蛋白水平与中医证候的相关性研究

目的:探讨腹膜透析患者血清klotho蛋白水平与中医证候的相关性。方法:选取180例规律腹膜透析患者作为研究对象,均进行中医辨证,分为主证和兼证两类;并根据患者肾小球滤过率(GFR)和血清分泌型klotho蛋白水平的四分位数,分为4组,统计各组中医主证、兼证分布情况。结果:180例腹膜透析患者主证占比,脾肾气虚证>气阴两虚证>肝肾阴虚证>脾肾阳虚证>阴阳两虚证;兼证占比,瘀血证>湿热证>湿浊证;不同主证的GFR和klotho蛋白水平存在显著性差异(P<0.05),GFR、klotho蛋白水平比较,肝肾阴虚证<阴阳两虚证<气阴两虚证<脾肾阳虚证<脾肾气虚证,且GFR与血清klotho蛋白水平呈正相关。不同兼证患者GFR和klotho蛋白水平比较无统计学意义(P>0.05)。按照血清分泌型klotho蛋白水平分布范围分组,发现在klotho蛋白水平较低的患者中,肝肾阴虚证和阴阳两虚证的占比较高;相反,在klotho蛋白水平较高的患者中,脾肾气虚证和脾肾阳虚证的占比较高,各组中医主证比率比较有统计学意义(P<0.05),而兼证比率比较无统计学意义(P>0.05)。结论:腹膜透析患者血清klotho蛋白水平与中医主证呈显著相关性,且肝肾阴虚证、阴阳两虚证者klotho蛋白降低尤其明显,主要与肾精不足或衰退相关。

六味地黄丸干预FGF23/Klotho轴对慢性肾衰竭钙磷代谢紊乱模型大鼠的影响

目的:观察六味地黄丸通过成纤维细胞生长因子23(FGF23)/Klotho轴对慢性肾衰竭钙磷代谢紊乱模型大鼠的影响及其干预机制。方法:50只SPF级SD大鼠随机分为假手术组(10只)、手术组(40只),手术组采用5/6肾切除及高磷饮食喂养构建慢性肾衰竭钙磷代谢紊乱大鼠模型,模型复制成功后将30只造模成功大鼠随机分为模型组、骨化三醇组、六味地黄丸组,每组10只。六味地黄丸组、骨化三醇组大鼠分别予六味地黄丸和骨化三醇灌胃,假手术组及模型组大鼠予等体积的蒸馏水灌胃,持续给药8周。HE染色观察肾组织变化,检测大鼠血清钙(Ca^(2+))、磷(P^(3+))、碱性磷酸酶(ALP)、甲状旁腺激素(PTH)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),免疫组化及Western blotting法检测大鼠肾皮质Klotho、FGF23蛋白的表达。结果:HE染色显示,模型组大鼠肾小球结构紊乱、肾小管扩张,间质有大量炎症细胞浸润;与模型组比较,六味地黄丸组大鼠肾小球轻度增生,肾小管轻度扩张,间质炎症细胞浸润数目减少。模型组大鼠血清Scr、BUN、P^(3+)、PTH、ALP高于假手术组(P<0.01),体质量、血清Ca^(2+)低于假手术组(P<0.01);六味地黄丸组大鼠血清Scr、BUN、P^(3+)、PTH、ALP低于模型组,体质量、血清Ca^(2+)高于模型组(P<0.01)。模型组大鼠肾皮质Klotho蛋白相对表达量低于假手术组(P<0.05),FGF23蛋白相对表达量高于假手术组(P<0.01);六味地黄丸组大鼠肾皮质Klotho蛋白相对表达量高于模型组(P<0.01),FGF23蛋白相对表达量低于模型组(P<0.01)。六味地黄丸组大鼠血Scr、BUN及肾皮质FGF23、Klotho蛋白相对表达量与骨化三醇组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。六味地黄丸组大鼠血P^(3+)、Ca^(2+)高于骨化三醇组(P<0.05)。结论:六味地黄丸可能通过调控FGF23/Klotho轴改善慢性肾衰竭钙磷代谢紊乱模型大鼠的肾功能和钙磷代谢。

血清维生素D结合蛋白、FGF23、Klotho与乳腺癌骨转移的相关性分析

目的骨转移是乳腺癌常见的并发症之一,严重影响患者的生存和预后。本研究旨在探究血清维生素D结合蛋白(vitamin D⁃binding protein,VDBP)、成纤维细胞生长因子23(fibroblast growth factor 23,FGF23)和Klotho蛋白在乳腺癌骨转移中的表达及临床意义。方法收集95例来自本院2019⁃08⁃01至2021⁃08⁃01的女性乳腺癌患者作为研究对象,经影像学和组织病理学方式诊断是否发生骨转移,将患者分为骨转移组36例,非骨转移组59例。分析两组患者的临床病理特征;采集患者外周血样本,通过ELISA对血清中VDBP、FGF23和Klotho进行定量分析;使用Spearman相关分析进行指标间的关联性分析;Logistic回归分析乳腺癌发生骨转移的影响因素;ROC曲线分析血清VDBP、FGF23和Klotho水平预测乳腺癌发生骨转移的价值。结果骨转移和非骨转移乳腺癌病理分级比较有统计学意义(P<0.05)。骨转移和非骨转移乳腺癌患者血清中VDBP、FGF23及Klotho的水平依次为:(80.35±29.34)和(115.18±48.69)ng/mL、(658.35±201.19)和(405.36±154.42)pg/mL以及(155.82±40.29)和(229.35±72.46)pg/mL,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,骨转移乳腺癌患者血清中VDBP水平与乳腺癌病理分级相关(P<0.05);FGF23和Klotho水平与病理分级、是否骨痛以及转移部位有关(P<0.05)。VDBP、FGF23和Klotho水平均为乳腺癌骨转移发生的独立影响因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,VDBP、FGF23及Klotho预测乳腺癌患者发生骨转移的曲线下面积依次为:0.733、0.806、0.761,最佳截断值为:81.56 ng/mL、573.501 pg/mL和201.193 pg/mL;3个指标联合诊断的曲线下面积为0.820,高于单一指标诊断的曲线下面积。结论血清VDBP、FGF23及Klotho水平可作为乳腺癌骨转移的参考指标,在乳腺癌骨转移的临床诊断上具有一定应用前景。

基于Klotho基因浅析肾与命门的关系

古代医家和现代学者对命门众说纷纭,有学者提出“命门”不是实体脏器[1]。本团队前期将Klotho(Kl)基因与肾精进行比较,提出了Kl基因是肾精的主要成分[2],在5/6肾切除大鼠和单侧肾切除大鼠均出现了循环Kl蛋白下降[3,4],为命门的研究提供了一些线索。本文通过梳理古代文献,结合现代医学解剖、临床和基础研究,探讨命门的实质所在。

血清CYR61、IL-17、Klotho蛋白对Graves眼病病情的评估价值

目的 探讨血清高半胱氨酸蛋白61(CYR61)、白细胞介素-17(IL-17)、单向跨膜蛋白(Klotho)对Graves眼病(GO)病情的评估价值。方法 收集2020年1月至2023年10月于郑州大学第一附属医院眼五科诊治的103例患者的临床资料为研究对象,根据临床活动性评分(CAS)评估患者病情,将其分为活动期组42例及非活动期组61例,比较两组患者一般资料、临床基础指标[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)及TSH受体抗体(TRAb)、CYR61、IL-17、Klotho蛋白水平及CAS评分],并通过多因素回归分析和ROC曲线分析GO眼病活动期的相关影响因素以及预测价值。结果 活动组Klotho、TSH、FT3、FT4、TRAb、TNF-α、IFN-γ、CYR61水平及CAS评分相较于非活动组更高,差异有统计学意义(t=7.953,4.364,5.232,6.100,4.364,7.344,4.890,6.541,6.995,13.283,P<0.05);经多因素回归分析得出TSH、FT3、FT4、TRAb、TNF-α、IFN-γ、IL-17、Klotho、CYR61合并CAS评分为影响GO眼病活动期的独立危险因素(OR=1.730,1.667,1.689,1.692,1.742,1.791,1.863,1.887,1.828,1.842,P<0.05);CYR61、IL-17、Klotho联合预测GO活动期的预测价值均高于三者单一检测,曲线下面积(AUC)分别为0.943,0.827,0.817,0.866(P<0.05)。结论 血清CYR61、IL-17、Klotho蛋白与GO活动期密切相关,三者联合联合检测对GO病情预测效能较好,评估价值确切。

瘢痕疙瘩患者瘢痕组织Klotho、MYH9表达变化与术后复发的相关性

目的 观察瘢痕疙瘩患者瘢痕组织Klotho、肌球蛋白重链9(MYH9)表达变化,分析其表达水平与术后复发的相关性。方法 收集71例手术切除耳部瘢痕疙瘩患者(观察组)和39例重睑术切除正常上睑皮肤患者(对照组),采用免疫组化SP法检测两组手术切除组织Klotho、MYH9。采用Kendall's tau-b等级相关系数分析瘢痕组织Klotho与MYH9表达的相关性。观察组术后随访12个月,记录复发情况,比较复发与未复发患者瘢痕组织中Klotho、MYH9水平,采用Kaplan-Meier生存分析法比较观察组瘢痕组织Klotho、MYH9不同表达水平患者的预后。结果 观察组Klotho阳性表达率低于对照组,MYH9阳性表达率高于对照组(P均<0.01)。观察组瘢痕组织Klotho表达水平与MYH9表达水平呈负相关(r=-0.225,P=0.013)。观察组术后复发24例、未复发47例,其中Klotho阳性患者复发率较阴性患者降低、复发时间较阴性患者延长,MYH9阳性患者复发率较阴性患者升高、复发时间较阴性患者缩短(P均<0.01)。结论 瘢痕疙瘩患者瘢痕组织Klotho、MYH9表达异常,Klotho阴性表达且MYH9阳性表达提示瘢痕疙瘩术后易复发。

解毒活血汤对慢性肾脏病大鼠肾脏FGF23、Klotho表达的影响

目的:观察解毒活血汤对慢性肾脏病(CKD)大鼠肾脏FGF23、Klotho的影响。方法:将60只SPF级健康雄性SD大鼠,随机分空白组、模型组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组,每组12只。采用腺嘌呤加高磷饮食制作CKD大鼠伴血管钙化模型。采用生化试剂盒测定血清中肌酐、尿素氮、钙、磷水平;Western blot法检测肾脏组织中FGF23、Klotho的表达。结果:与空白组相比,其余各组血清中肌酐、尿素氮、钙、磷均有明显变化(P<0.05或P<0.01);和模型组相比,中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组CKD大鼠血清中肌酐、尿素氮、磷水平明显改善(P<0.05),FGF23、Klotho蛋白表达量增高(P<0.05),血清钙水平升高(P<0.05)。结论:解毒活血汤可以改善CKD大鼠肾脏功能,可以通过提高CKD大鼠肾脏组织中FGF23、Klotho蛋白的表达影响失衡的FGF23-Klotho轴,进而调节CKD大鼠血中钙、磷浓度。

小于胎龄儿生后血清Klotho和成纤维细胞生长因子23水平变化及其与生长发育的关系

目的:探讨小于胎龄儿(SGA)生后血清Klotho和成纤维细胞生长因子23(FGF23)水平变化,并阐明其与生长发育的关系。方法:选取35例SGA和53例适于胎龄儿(AGA)作为研究对象,分为SGA组(n=35)和AGA组(n=53),其中早产儿组51例,早产SGA组20例,早产AGA组31例;足月儿组37例,足月SGA组15例,足月AGA组22例。收集各组新生儿的临床资料,分别检测新生儿生后第7和14天血清Klotho和FGF23水平及临床生化指标,分析新生儿生后第7和14天血清Klotho及FGF23水平与新生儿体质量、身长、头围、胸围和考普氏(Kapu)指数等各项生长发育指标及钙磷代谢的相关性。结果:与AGA组比较,SGA组新生儿出生体质量、身长、头围、胸围和Kapu指数均明显降低(P<0.05)。生后第7和14天,与早产儿组比较,足月儿组新生儿血清Klotho和FGF23水平均明显升高(P<0.01);与生后第7天比较,生后第14天早产儿组和足月儿组新生儿血清Klotho水平均明显升高(P<0.01),FGF23水平均明显降低(P<0.01)。与AGA组比较,SGA组新生儿生后第7和14天血清Klotho和FGF23水平明显降低(P<0.05或P<0.01);与生后第7天比较,生后第14天AGA组和SGA组新生儿血清Klotho水平明显升高(P<0.01),FGF23水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。与早产AGA组比较,早产SGA组新生儿生后第7和14天血清Klotho和FGF23水平均明显降低(P<0.05或P<0.01)。与足月AGA组比较,足月SGA组新生儿生后第7和14天血清Klotho和FGF23水平均明显降低(P<0.05或P<0.01)。SGA组新生儿生后第7天血清Klotho和FGF23水平与胎龄、体质量、身长、头围、胸围和Kapu指数等生长发育指标均呈正相关关系(P<0.05或P<0.01),血清Klotho水平与FGF23水平呈正相关关系(P<0.05)。钙磷代谢方面,SGA组新生儿生后第7天血清Klotho水平与血清磷水平呈正相关关系(P<0.01);FGF23水平与血清钙和磷水平均呈正相关关系(P<0.05或P<0.01)。结论:Klotho和FGF23蛋白与新生儿生长发育及磷酸盐代谢有密切关联。SGA新生儿生后血清Klotho和FGF23水平较低,但随着各器官发育逐渐完善,Klotho分泌增加,而FGF23水平降低可能是机体的代偿性反应。

Klotho蛋白灌胃对急性脑梗死大鼠脑缺血再灌注损伤的改善作用及其机制

目的观察Klotho蛋白灌胃对急性脑梗死(ACI)大鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)的改善作用,并探讨其作用机制。方法50只SPF级SD雄性大鼠分为假手术组、模型组、Klotho低剂量组、Klotho中剂量组、Klotho高剂量组,每组10只。模型组和Klotho低剂量组、Klotho中剂量组、Klotho高剂量组大鼠建立ACI后CIRI模型。假手术组只做颈动脉血管分离和伤口缝合,不做颈动脉夹闭处理。大鼠继续饲养24 h后,Klotho低、中、高剂量组分别用25、50、100 mg/kg的Klotho蛋白进行灌胃处理,模型组与假手术组均采用等体积生理盐水进行灌胃处理。5组大鼠均每天灌胃处理1次,持续处理14 d。取各组大鼠,采用Longa评分法和平衡木评分法进行神经功能评分。取各组大鼠,断头处死后取脑组织,采用苏木精染色法测算大鼠大脑皮层神经元凋亡率,采用Western Blotting法检测大鼠大脑皮层组织中受体相互作用蛋白激酶1(RIP1)、RIP3蛋白,采用酶联免疫法检测大鼠大脑皮层组织中炎症介质IL-1β、TNF-α、IL-6,采用TBA法检测MDA,采用酶联免疫法检测SOD,采用紫外比色法检测GSH-Px。结果假手术组大鼠神经功能评分、大脑皮层神经元凋亡率均低于其余各组(P均<0.05),模型组均高于其余各组(P均<0.05),Klotho高剂量组均高于Klotho低剂量组、Klotho中剂量组(P均<0.05),Klotho中剂量组均高于Klotho低剂量组(P均<0.05)。假手术组大鼠大脑皮层组织中RIP1、RIP3蛋白相对表达量和IL-1β、TNF-α、IL-6、MDA表达水平均低于其余各组,SOD、GSH-Px表达水平均高于其余各组(P均<0.05),模型组大鼠大脑皮层组织中RIP1、RIP3蛋白相对表达量和IL-1β、TNF-α、IL-6、MDA表达水平均高于其余各组,SOD、GSH-Px表达水平均低于其余各组(P均<0.05),Klotho高剂量组大鼠大脑皮层组织中RIP1、RIP3蛋白相对表达量和IL-1β、TNF-α、IL-6、MDA表达水平均低于Klotho低剂量组、Klotho中剂量组,SOD、GSH-Px表达水平均高于Klotho低剂量组、Klotho中剂量组(P均<0.05),Klotho中剂量组大鼠大脑皮层组织中RIP1、RIP3蛋白相对表达量和IL-1β、TNF-α、IL-6、MDA表达水平均低于Klotho低剂量组,SOD、GSH-Px表达水平均高于Klotho低剂量组(P均<0.05)。结论100 mg/kg Klotho蛋白灌胃对ACI大鼠CIRI具有改善作用,其作用机制可能与抑制大脑皮层组织中RIP1和RIP3蛋白表达、抑制脑损伤部位炎症反应和氧化应激反应有关。

基于FGF23/Klotho稳态观察口服糖皮质激素致生长障碍的临床研究

目的观察长期口服糖皮质激素(glucocorticosteroid,GC)抑制原发性肾病综合征(primarynephrotic syndrome,PNS)儿童生长与FGF23/Klotho比值变化的相关性。方法前瞻性选取已停用GC 3个月以上,于2022年6—12月至河南中医药大学第一附属医院儿科医院复查的56例激素敏感型PNS儿童为研究对象。入院监测尿蛋白定性及定量后,尿蛋白复发者加用GC治疗,为GC组(n=29);尿蛋白未复发者不加用GC治疗,为无GC组(n=27)。同期选取29例3岁至青春期前年龄的健康体检儿童作为对照组。比较各组身高、骨龄、增长速度及FGF23/Klotho比值等指标,并进行相关性分析。结果GC组加用GC 1个月后的FGF23/Klotho比值高于无GC组(P<0.05),半年内的身高增长速度、骨龄增长速度均低于无GC组(P<0.05)。相关性分析显示PNS儿童治疗1个月后的FGF23/Klotho比值与治疗半年内的身高增长速度、骨龄增长速度均呈显著负相关(分别r=-0.356、-0.436,P<0.05)。结论FGF23/Klotho稳态失衡是长期口服GC导致生长障碍的机制之一。

Klotho蛋白与充血性心力衰竭的关联及炎症的介导作用

目的:探讨Klotho蛋白与充血性心力衰竭(CHF)的关联及炎症的介导作用。方法:选取美国国家健康与营养调查2007-2016年的10762例研究对象(男5240例,女5522例),根据Klotho蛋白的四分位数将研究对象分为4组(Q1、Q2、Q3、Q4组),采用Logistic回归模型分析Klotho蛋白及炎症生物标志物与CHF的关系,采用广义线性模型分析Klotho蛋白与炎症生物标志物的关联,中介分析用于评估炎症生物标志物在Klotho蛋白与CHF关联中的中介效应。结果:Klotho蛋白可降低CHF风险(OR=0.695,95%CI为0.513~0.942),且在男性中更显著(OR=0.604,95%CI为0.406~0.898)。炎症生物标志物在Klotho蛋白与CHF的关联中具有中介效应,其中中性粒细胞计数与淋巴细胞计数比值的中介作用最大,在总人群和男性中分别为11.93%和9.92%,中介效应β(95%CI)分别为-0.047(-0.078~-0.026)和-0.050(-0.093~-0.021)。结论:高水平的Klotho蛋白、低水平的炎症生物标志物可降低CHF风险。炎症生物标志物部分介导了Klotho蛋白对CHF的保护作用。

天马颗粒剂通过TLR4/NF-κB/Klotho途径调控大肠癌裸鼠移植瘤研究

目的:观察天马颗粒剂对大肠癌裸鼠移植瘤组织中TLR4、NF-κB、Klotho表达的影响。方法:以SPF级裸鼠为研究对象,通过皮下种植HCT116细胞株构建裸鼠移植瘤模型,随机分为3组:对照组、天马颗粒低剂量组、天马颗粒正常剂量组,对照组予生理盐水20 mL/kg,天马颗粒低剂量5.39 g/kg;天马颗粒正常剂量10.79 g/kg;灌胃给药,隔天1次,持续2周。摘除肿瘤组织,测量肿瘤体重及体积,免疫组化检测TLR4、NF-κB、Klotho表达量。结果:同对照组相比,天马颗粒正常剂量组肿瘤组织中TLR4、NF-κB表达降低,Klotho表达明显增加(P<0.05);天马颗粒正常剂量组与天马颗粒低剂量组相比,肿瘤组织中TLR4、NF-κB表达未见明显差异(P>0.05),Klotho表达升高(P<0.05)。结论:天马颗粒剂可抑制TLR4/NF-κB通路活性,促进Klotho表达,降低肿瘤中炎性因子表达,改善肿瘤炎症微环境。

血清sKlotho、OPN水平与1型糖尿病儿童糖代谢紊乱及微血管并发症的相关性

目的 探讨1型糖尿病(T1DM)儿童血清分泌型Klotho (sKlotho)、骨桥蛋白(OPN)水平与糖代谢紊乱及微血管并发症的关系。方法 选择2021年1月至2023年1月诊治T1DM患儿116例为研究对象(TIDM组),根据是否存在微血管并发症分为并发症组36例和无并发症组80例。另选择同期拟行择期手术的60例腹股沟斜疝患儿为对照组。酶联免疫吸附实验检测各组血清sKlotho、OPN水平。Pearson分析T1DM患儿血清sKlotho、OPN与糖代谢指标[空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、糖化血红蛋白(HbA1c)]的相关性。多因素Logistic回归分析影响TIDM儿童微血管并发症发生的危险因素。受试者工作特征曲线(ROC)分析血清sKlotho、OPN对TIDM儿童微血管并发症发生的预测价值。结果 T1DM组血清sKlotho水平低于对照组,差异有统计学意义(t=42.141,P=0.000)。T1DM组血清OPN水平,高于对照组差异有统计学意义(t=20.629,P=0.000)。并发症组血清sKlotho水平低于无并发症组,而OPN水平高于无并发症组,差异具有统计学意义(均P<0.05)。T1DM患儿血清sKlotho与FPG、FINS、HOMA-IR、HbA1c呈显著负相关,血清OPN与FPG、FINS、HOMA-IR、HbA1c呈显著正相关(均P<0.05)。sKlotho是影响T1DM患儿微血管并发症发生的独立保护因素,OPN是影响T1DM患儿微血管并发症发生的独立危险因素。血清sKlotho、OPN二者联合诊断T1DM患儿并发微血管并发症的曲线下面积为0.850,大于两指标单独检测0.778、0.752,差异有统计学意义(Z=5.183、4.349,P均<0.001)。结论 T1DM患儿血清sKlotho降低,OPN升高,两者与T1DM患儿糖代谢紊乱有关,两者联合有助于评估微血管并发症的发生。

雷火灸、穴位贴敷治疗慢性肾脏病3~4期的疗效及对血清TGF-β1、Klotho、FGF23水平的影响

目的:研究雷火灸、穴位贴敷治疗慢性肾脏病3~4期的疗效及对血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、Klotho蛋白(Klotho)、成纤维生长因子23(FGF23)水平的影响。方法:2022年1月~2023年1月我院收治的慢性肾脏病3~4期患者92例,分为对照组与试验组,各46例,方法为随机数字表法。对照组予以常规西医治疗,试验组在对照组的基础上予以雷火灸、穴位贴敷治疗,两组均治疗2周。比较两组治疗2周后疗效,治疗前、治疗2周后血清TGF-β1、Klotho、FGF23水平、肾功能、免疫功能,治疗期间不良反应发生情况。结果:与对照组治疗2周后的总有效率(71.74%)比较,试验组总有效率更高(91.30%,P<0.05)。较治疗前,治疗2周后两组血清TGF-β1、FGF23、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)水平,全血辅助性T细胞17(Th17)水平,24h尿蛋白定量降低,且试验组更低(P<0.05)。较治疗前,治疗2周后两组全血调节性T细胞(Treg)水平,血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、Klotho水平升高,且试验组更高(P<0.05)。治疗期间,两组不良反应发生率接近,均未影响继续治疗(P>0.05)。结论:雷火灸、穴位贴敷治疗慢性肾脏病3~4期的疗效较好,可改善肾功能、免疫功能,调节血清TGF-β1、Klotho、FGF23水平表达,降低肾脏损伤,安全性良好。

Klotho通过激活AMPK/mTOR信号通路缓解CCH大鼠海马神经元的铁死亡和氧化应激

目的探讨抗衰老基因Klotho对慢性脑低灌注(CCH)大鼠认知障碍的改善作用及对海马区神经元铁死亡和氧化应激的影响和潜在调控机制。方法使用双侧颈总动脉永久性闭塞术(2-VO)建立CCH大鼠,并将大鼠分为5组(每组n=10),其中包括假手术组、CCH组、重组Klotho蛋白(Klotho)+CCH组(重组Klotho蛋白海马区注射10 mg·kg·w^(-1),x4w)、生理盐水+CCH组(生理盐水海马区注射2mg·kg·w^(-1),x4w)、Klotho+阿卡地新(Acadesine,AICAR)+CCH组(Klotho蛋白10 mg·kg·w^(-1),x4w和AICAR 1.5 mg·kg·w^(-1),x4w海马区联合注射)。4 w后行Morris水迷宫实验检测各组大鼠的逃避潜伏期。随后安乐死大鼠,取海马组织。Western blot法检测海马组织中单磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMPK)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化的AMPK(p-AMPK)、磷酸化的(p-mTOR)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁死亡抑制蛋白1(FSP1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋白Tau、神经元特异核蛋白(NeuN)的表达水平。ELISA试剂盒检测海马组织中的活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量。结果与假手术组比,CCH组的逃避潜伏期延长(P<0.05),p-AMPK、MDA、NSE、Tau、ROS的水平显著增加(^(均)P<0.05),但p-mTOR、SOD、GSH、GPX4、NeuN、FSP1的水平显著下调(^(均)P<0.05)。与CCH组比,生理盐水+CCH组的逃避潜伏期以及海马区p-AMPK、p-mTOR、MDA、ROS、SOD、GSH、GPX4、NSE、Tau、NeuN、FSP1的水平差异均无统计学意义(^(均)P>0.05)。与CCH组或生理盐水+CCH组比,Klotho+CCH组的逃避潜伏期缩短(^(均)P<0.05),p-AMPK、MDA、ROS、NSE、Tau的水平显著下调(均P<0.05),但p-mTOR、SOD、GSH、GPX4、NeuN、FSP1的水平显著上调(均P<0.05)。与Klotho+CCH组比,Klotho+AICAR+CCH组的逃避潜伏期延长(P<0.05),p-AMPK、MDA、ROS、NSE、Tau的水平显著增加(^(均)P<0.05),但p-mTOR、SOD、GSH、GPX4、NeuN、FSP1的水平显著下调(^(均)P<0.05)。结论Klotho通过激活AMPK/mTOR信号通路缓解CCH大鼠海马神经元的铁死亡和氧化应激。

血清Klotho、ACA及VEGF水平与PCI患者认知功能的相关性

目的探讨血清Klotho、抗心磷脂抗体(ACA)及血管内皮生长因子(VEGF)水平与进展性脑梗死(PCI)患者认知功能的相关性。方法回顾性分析2021年8月至2023年8月长治医学院附属和平医院收治的80例PCI患者的临床资料,根据蒙特利尔认知评估量表(MoCA)得分将患者分为认知功能障碍(CD)组(MoCA评分<26分,共31例)与非CD组(MoCA评分≥26分,共49例)。收集患者一般资料[性别、年龄、体重指数、吸烟、饮酒、高血压、糖尿病、高血脂、入院时间、MoCA分值、C反应蛋白(CRP)、血肌酐、血小板计数、天冬氨酸转氨酶(AST)、空腹血糖],比较两组Klotho、ACA、VEGF水平;采取多因素非条件Logistic回归分析对PCI患者发生CD的危险因素进行分析;采取Pearson相关系数分析对Klotho、ACA、VEGF水平与PCI患者认知功能评分的相关性进行分析;通过受试者操作特征(ROC)曲线分析Klotho、ACA、VEGF评估PCI患者发生CD的价值。结果两组的性别、体重指数、吸烟、饮酒、糖尿病、高血脂、入院时间、CRP、血肌酐、血小板计数、AST、空腹血糖组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。CD组的年龄、高血压人数占比、ACA分别为(65.13±7.08)岁、64.52%、(1.46±0.41)mg/L,均明显高于非CD组[(58.67±8.42)岁、40.82%、(0.86±0.19)mg/L],CD组MoCA评分、Klotho水平、VEGF水平分别为(21.14±2.06)分、(284.19±73.37)pg/mL、(193.21±7.05)pg/mL,均明显低于非CD组[(28.05±1.79)分、(428.46±92.58)pg/mL、(208.43±7.72)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素非条件Logistic回归分析结果显示,年龄、高血压、Klotho水平、ACA水平、VEGF水平是PCI患者发生CD的危险因素(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,Klotho水平、VEGF水平与PCI患者认知功能评分呈正相关,ACA水平与PCI患者认知功能评分呈负相关,且均有P<0.05。ROC曲线分析结果显示,Klotho水平、ACA水平、VEGF水平评估PCI患者发生CD的曲线下面积分别为0.876、0.888、0.852,敏感度分别为0.816、0.898、0.857,3项指标曲线下面积差异无统计学意义(Z=0.861,P=0.574)。结论Klotho水平、VEGF水平与PCI患者认知功能呈正相关,ACA水平与PCI患者认知功能呈负相关,以上指标可用于临床评估患者是否发生CD。

清通补肾方脐疗对血液透析患者Klotho/FGF23轴的影响

目的:观察清通补肾方脐疗对血液透析患者慢性肾脏病矿物质与骨异常的疗效及Klotho蛋白/成纤维细胞生长因子23轴的作用。方法:80例维持性血液透析的慢性肾脏病矿物质与骨异常患者随机分为对照组和清通补肾方脐疗组,对照组采用西医常规治疗方法加血液透析治疗加骨化三醇口服,清通补肾方脐疗组采用西医常规治疗方法加血液透析治疗加骨化三醇口服加清通补肾方脐疗,疗程共12周,观察治疗前后两组血钙、血磷、血甲状旁腺素(PTH)及Klotho蛋白、成纤维细胞生长因子23(FGF23)的水平。结果:清通补肾方脐疗组12周后血钙水平明显升高(P<0.01),血磷、PTH的水平低于于对照组(P<0.01或P<0.05),且血清Klotho蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.01),同时血清FGF23水平明显低于对照组(P<0.01)。结论:清通补肾方能够明显改善并发CKD-MBD的血透患者的血钙、血磷、PTH等常规生化指标的水平,其作用机制可能与影响Klotho/FGF23轴的功能有关。

血清FGF23-Klotho轴对多发性骨髓瘤患者合并肾损伤的预测价值

目的:探讨分析血清FGF23-Klotho轴对多发性骨髓瘤(MM)患者合并肾损伤的预测价值。方法:选择我院收治的104例MM患者作为MM组,并根据患者是否存在肾损伤,将其分为肾损伤组(n=34)和非肾损伤组(n=70)。同期选取在我院健康体检的受试者80例作为对照组。检测各组受试者肾功能相关性指标血清胱抑素C(Cys-C)、血肌酐(Scr)、β2微球蛋白(β2-MG)表达,以及血清FGF23以及Klotho表达,并计算FGF23/Klotho比值。采用二元Logistic回归分析血清FGF23、Klotho对MM患者并发肾损伤的影响;采用ROC曲线分析血清FGF23、Klotho对MM合并肾损伤的预测价值;并分析肾损伤组患者血清FGF23、Klotho与Cys-C、Scr、β2-MG相关性。结果:MM组患者血清Cys-C、Scr、β2-MG以及FGF23水平均显著高于对照组,而MM组患者血清Klotho水平显著低于对照组(P<0.05),MM组患者FGF23/Klotho比值显著高于对照组(P<0.05)。在MM患者中,肾损伤组患者血清Cys-C、Scr、β2-MG以及FGF23水平均显著高于非肾损伤组(P<0.05),而肾损伤组患者血清Klotho水平显著低于非肾损伤组(P<0.05)。采用二元Logistic回归分析血清FGF23、Klotho对MM并发肾损伤的影响,结果显示血清FGF23、Klotho均进入回归模型(P<0.05),为影响MM并发肾损伤的重要因素。采用ROC曲线分析血清FGF23、Klotho以及FGF23/Klotho比值对MM合并肾损伤的预测价值,曲线下面积分别为0.839、0.831以及0.962。相关性分析结果显示,肾损伤组患者血清FGF23、FGF23/Klotho比值与Cys-C、Scr、β2-MG呈显著正相关关系(P<0.05),血清Klotho与Cys-C、Scr、β2-MG呈显著负相关关系(P<0.05)。结论:血清FGF23-Klotho轴在多发性骨髓瘤并发肾损伤中具有重要调控价值,与患者肾功能密切相关,对多发性骨髓瘤患者肾损伤的发生具有着重要的预测价值,值得临床进一步深入研究。