腹膜透析患者血清klotho蛋白水平与中医证候的相关性研究

目的:探讨腹膜透析患者血清klotho蛋白水平与中医证候的相关性。方法:选取180例规律腹膜透析患者作为研究对象,均进行中医辨证,分为主证和兼证两类;并根据患者肾小球滤过率(GFR)和血清分泌型klotho蛋白水平的四分位数,分为4组,统计各组中医主证、兼证分布情况。结果:180例腹膜透析患者主证占比,脾肾气虚证>气阴两虚证>肝肾阴虚证>脾肾阳虚证>阴阳两虚证;兼证占比,瘀血证>湿热证>湿浊证;不同主证的GFR和klotho蛋白水平存在显著性差异(P<0.05),GFR、klotho蛋白水平比较,肝肾阴虚证<阴阳两虚证<气阴两虚证<脾肾阳虚证<脾肾气虚证,且GFR与血清klotho蛋白水平呈正相关。不同兼证患者GFR和klotho蛋白水平比较无统计学意义(P>0.05)。按照血清分泌型klotho蛋白水平分布范围分组,发现在klotho蛋白水平较低的患者中,肝肾阴虚证和阴阳两虚证的占比较高;相反,在klotho蛋白水平较高的患者中,脾肾气虚证和脾肾阳虚证的占比较高,各组中医主证比率比较有统计学意义(P<0.05),而兼证比率比较无统计学意义(P>0.05)。结论:腹膜透析患者血清klotho蛋白水平与中医主证呈显著相关性,且肝肾阴虚证、阴阳两虚证者klotho蛋白降低尤其明显,主要与肾精不足或衰退相关。

Klotho蛋白灌胃对急性脑梗死大鼠脑缺血再灌注损伤的改善作用及其机制

目的观察Klotho蛋白灌胃对急性脑梗死(ACI)大鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)的改善作用,并探讨其作用机制。方法50只SPF级SD雄性大鼠分为假手术组、模型组、Klotho低剂量组、Klotho中剂量组、Klotho高剂量组,每组10只。模型组和Klotho低剂量组、Klotho中剂量组、Klotho高剂量组大鼠建立ACI后CIRI模型。假手术组只做颈动脉血管分离和伤口缝合,不做颈动脉夹闭处理。大鼠继续饲养24 h后,Klotho低、中、高剂量组分别用25、50、100 mg/kg的Klotho蛋白进行灌胃处理,模型组与假手术组均采用等体积生理盐水进行灌胃处理。5组大鼠均每天灌胃处理1次,持续处理14 d。取各组大鼠,采用Longa评分法和平衡木评分法进行神经功能评分。取各组大鼠,断头处死后取脑组织,采用苏木精染色法测算大鼠大脑皮层神经元凋亡率,采用Western Blotting法检测大鼠大脑皮层组织中受体相互作用蛋白激酶1(RIP1)、RIP3蛋白,采用酶联免疫法检测大鼠大脑皮层组织中炎症介质IL-1β、TNF-α、IL-6,采用TBA法检测MDA,采用酶联免疫法检测SOD,采用紫外比色法检测GSH-Px。结果假手术组大鼠神经功能评分、大脑皮层神经元凋亡率均低于其余各组(P均<0.05),模型组均高于其余各组(P均<0.05),Klotho高剂量组均高于Klotho低剂量组、Klotho中剂量组(P均<0.05),Klotho中剂量组均高于Klotho低剂量组(P均<0.05)。假手术组大鼠大脑皮层组织中RIP1、RIP3蛋白相对表达量和IL-1β、TNF-α、IL-6、MDA表达水平均低于其余各组,SOD、GSH-Px表达水平均高于其余各组(P均<0.05),模型组大鼠大脑皮层组织中RIP1、RIP3蛋白相对表达量和IL-1β、TNF-α、IL-6、MDA表达水平均高于其余各组,SOD、GSH-Px表达水平均低于其余各组(P均<0.05),Klotho高剂量组大鼠大脑皮层组织中RIP1、RIP3蛋白相对表达量和IL-1β、TNF-α、IL-6、MDA表达水平均低于Klotho低剂量组、Klotho中剂量组,SOD、GSH-Px表达水平均高于Klotho低剂量组、Klotho中剂量组(P均<0.05),Klotho中剂量组大鼠大脑皮层组织中RIP1、RIP3蛋白相对表达量和IL-1β、TNF-α、IL-6、MDA表达水平均低于Klotho低剂量组,SOD、GSH-Px表达水平均高于Klotho低剂量组(P均<0.05)。结论100 mg/kg Klotho蛋白灌胃对ACI大鼠CIRI具有改善作用,其作用机制可能与抑制大脑皮层组织中RIP1和RIP3蛋白表达、抑制脑损伤部位炎症反应和氧化应激反应有关。

Klotho蛋白与充血性心力衰竭的关联及炎症的介导作用

目的:探讨Klotho蛋白与充血性心力衰竭(CHF)的关联及炎症的介导作用。方法:选取美国国家健康与营养调查2007-2016年的10762例研究对象(男5240例,女5522例),根据Klotho蛋白的四分位数将研究对象分为4组(Q1、Q2、Q3、Q4组),采用Logistic回归模型分析Klotho蛋白及炎症生物标志物与CHF的关系,采用广义线性模型分析Klotho蛋白与炎症生物标志物的关联,中介分析用于评估炎症生物标志物在Klotho蛋白与CHF关联中的中介效应。结果:Klotho蛋白可降低CHF风险(OR=0.695,95%CI为0.513~0.942),且在男性中更显著(OR=0.604,95%CI为0.406~0.898)。炎症生物标志物在Klotho蛋白与CHF的关联中具有中介效应,其中中性粒细胞计数与淋巴细胞计数比值的中介作用最大,在总人群和男性中分别为11.93%和9.92%,中介效应β(95%CI)分别为-0.047(-0.078~-0.026)和-0.050(-0.093~-0.021)。结论:高水平的Klotho蛋白、低水平的炎症生物标志物可降低CHF风险。炎症生物标志物部分介导了Klotho蛋白对CHF的保护作用。

血清可溶性Klotho蛋白、肌腱蛋白-C与IgA肾病患儿病情严重程度及氧化应激的相关性

目的 分析血清可溶性Klotho蛋白(sKL)、肌腱蛋白-C(TN-C)与免疫球蛋白A(IgA)肾病患儿病情严重程度及氧化应激的相关性。方法 选取2019年7月至2022年8月就诊于该院的85例IgA肾病患儿作为IgA肾病组,另选取同期在该院体检的85例健康者作为健康组,对比两组血清sKL、TN-C水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清sKL、TN-C及二者联合预测IgA肾病发生的价值。IgA肾病组按照24 h尿蛋白定量又分为轻度组(28例)、中度组(39例)、重度组(18例),对比3组血清sKL、TN-C水平及氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、终末氧化蛋白产物(AOPP)],经Spearman等级相关性分析血清sKL、TN-C水平与氧化应激指标的相关性,经Kendall的Tau-b检验血清sKL、TN-C水平与IgA肾病患儿的病情严重程度关系。结果 IgA肾病组血清sKL水平比健康组低,TN-C水平比健康组高,差异有统计学意义(P<0.05)。绘制ROC曲线发现,血清sKL、TN-C及二者联合预测IgA肾病发生的曲线下面积及95%CI为0.726(95%CI:0.648~0.803)、0.853(95%CI:0.796~0.909)、0.891(95%CI:0.845~0.937)。重度组血清sKL水平低于中度组、轻度组,而血清TN-C水平高于中度组、轻度组,差异有统计学意义(P<0.05)。重度组血清SOD水平低于中度组、轻度组,血清AOPP、MDA水平高于中度组、轻度组,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman等级相关性显示,sKL水平与SOD呈正相关(r>0,P<0.05),与AOPP、MDA呈负相关(r<0,P<0.05);TN-C水平与SOD呈负相关(r<0,P<0.05),与AOPP、MDA呈正相关(r>0,P<0.05)。结论 IgA肾病患儿血清sKL、TN-C水平与IgA肾病患儿病情严重程度、氧化应激反应有关,且二者联合可有效预测IgA肾病的发生。

达格列净对老年糖尿病肾病患者Klotho蛋白及肾功能的影响

目的观察达格列净对老年糖尿病肾病患者Klotho蛋白及肾功能的影响,探究影响Klotho蛋白水平的相关因素。方法选取2021年1~11月于徐州医科大学附属医院诊治的老年糖尿病肾病患者88例,按随机数字表法分为达格列净组和对照组,疗程12周,分别于治疗前和治疗结束时测定体重、血压、血糖、Klotho蛋白、肾功能水平,尿白蛋白/尿肌酐(urinary albumin/creatinine,UACR),记录不良反应。结果治疗后,达格列净组患者的体重、体重指数、收缩压、舒张压、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血尿酸、胱抑素C、UACR下降幅度大于对照组,Klotho蛋白升高幅度大于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。多元线性回归分析结果显示,年龄、BUN、UACR是影响Klotho蛋白水平的独立相关因素。两组不良反应比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论达格列净治疗可以降低体重、血压,改善肾功能,升高Klotho蛋白水平。达格列净对Klotho蛋白的调节作用可能是其肾脏保护作用的重要机制之一。

血清FGF23、Klotho蛋白与维持性血液透析患者心脏瓣膜钙化的相关性

目的探讨血清成纤维细胞生长因子23(fibroblast growth factor-23,FGF23)、Klotho蛋白水平与维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者心脏瓣膜钙化(cardiac valve calcification,CVC)的相关性。方法选取2022年1月至2023年1月期间复旦大学附属金山医院血液净化中心MHD患者169例,采用心脏超声检查患者CVC情况。结果169例MHD患者中CVC者共111例,占65.68%。与非CVC组相比,CVC组FGF23、β2微球蛋白、B型脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)水平、年龄、男性占比显著高,Klotho、透前肌酐、血红蛋白、血浆白蛋白、iPTH水平显著低(均P<0.05)。Pearson/Spearman相关系数分析提示FGF23、年龄、男性、β2微球蛋白、BNP与CVC正相关(r=0.20、0.41、0.15、0.28、0.12),Klotho、透前肌酐、血红蛋白、血浆白蛋白、iPTH与CVC负相关(r=﹣0.16、﹣0.17、﹣0.16、﹣0.17、﹣0.16)。非条件二元logistic回归分析显示FGF23、Klotho、年龄、β2微球蛋白是MHD患者CVC的独立影响因素(P<0.05)。结论MHD患者易发生CVC,血清FGF23水平与CVC正相关,Klotho蛋白水平与CVC负相关,FGF23、Klotho、年龄、β2微球蛋白是MHD患者CVC的独立影响因素。

血清Klotho蛋白、AngⅡ与2型糖尿病肾病病情进展的相关性

目的 探讨血清Klotho蛋白、血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)与糖尿病肾病病情进展的相关性,旨在为临床控制糖尿病肾病提供新的靶点。方法 选取2018年5月—2019年10月无锡人民医院确诊为糖尿病肾病的104例患者和同期体检的56名健康志愿者为研究对象。其中糖尿病肾病患者依其疾病严重程度分为3组,健康志愿者设为对照组。比较4组血清Klotho蛋白、AngⅡ表达情况;应用Pearson分析法分析血清Klotho蛋白、AngⅡ与糖尿病肾病病情进程的相关性。结果 糖尿病肾病各组血清Klotho蛋白水平下降,低于健康对照组,AngⅡ水平升高,高于健康对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。Pearson相关分析结果显示,血清Klotho蛋白与糖尿病肾病病情进展呈负相关(r=-0.611,P<0.05),AngⅡ表达与糖尿病肾病病情进展呈正相关(r=0.529,P<0.05)。结论 血清Klotho蛋白、AngⅡ与糖尿病肾病病情进展密切相关,糖尿病患者可定期监测血清Klotho蛋白、AngⅡ水平。

精神分裂症患者血清Klotho蛋白水平与炎症因子的相关性研究

目的:目的:观察精神分裂症患者血清Klotho蛋白水平及其与炎症因子的相关性。方法:纳入精神分裂症患者45例(观察组),健康对照45例(对照组),采用阳性与阴性症状量表(PANSS)评定患者精神症状严重程度,采用酶联免疫吸附技术(ELISA)测定所有受试者血清中Klotho蛋白和炎症因子IL-6、IL-10水平,使用全自动血细胞分析仪和生化分析仪测定其他炎症及抗炎指标。结果:观察组血清Klotho蛋白水平明显高于对照组(P<0.05);观察组炎症指标IL-6、WBC、CRP、MONO、NLR、MLR明显高于对照组(P<0.05),HNR明显低于对照组(P<0.05),但炎症指标IL-10、PLR在两组之间无显著差异;相关性分析显示精神分裂症患者血清Klotho蛋白水平与炎症因子IL-6和NLR成正相关(r=0.517,P<0.001;r=0.330,P<0.05)。结论:精神分裂症患者Klotho蛋白表达异常,且与炎症因子相关,Klotho蛋白可能参与精神分裂症的神经炎症反应过程。

持续非卧床腹膜透析患者血清FGF-23及可溶性klotho蛋白与颈动脉中膜厚度相关性

目的探讨持续非卧床腹膜透析(CAPD)患者血清FGF-23及可溶性klotho蛋白与颈动脉内膜-中膜厚度(CIMT)的相关性。方法选择2021年1月至2023年4月CAPD患者60例。将CIMT≥1.2 mm的患者纳入观察组(n=36),CIMT<1.2 mm的患者纳入对照组(n=24),比较两组患者一般资料及颈动脉彩超检查结果;分别测定并比较两组患者胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、血清肌酐、超敏C反应蛋白(Hs-CRP)、β2-微球蛋白、甲状旁腺激素、同型半胱氨酸、可溶性Klotho蛋白、血清FGF-23等指标。结果观察组患者年龄、血清FGF-23及Hs-CRP水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者血清可溶性Klotho蛋白水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组CIMT水平、存在粥样硬化斑块比例均明显高于对照组(P<0.05);两组间颈动脉狭窄比例比较,差异无统计学意义(P>0.05);Logistic回归分析结果显示,年龄、血清FGF-23及Hs-CRP是CAPD患者发生CIMT增厚的独立的危险因素,而可溶性Klotho蛋白是CAPD患者出现CIMT增厚的保护因素。结论CAPD伴有CIMT增厚的患者易形成动脉粥样硬化斑块,患者年龄、血清FGF23、超敏C反应蛋白是CAPD患者颈动脉中膜增厚的独立危险因素,而Klotho蛋白则为其保护因素。

Klotho蛋白对肾缺血再灌注大鼠急性肾损伤及纤维化的保护作用

目的探讨Klotho蛋白在缺血再灌注(I/R)大鼠引起的急性肾损伤及纤维化进程中的作用。方法60只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(Sham组)、肾脏缺血再灌注组(I/R组)和Klotho蛋白干预组(I/R+Kl组),每组20只。I/R组采用夹闭右侧肾蒂40 min再灌注法建立肾缺血再灌注急性肾损伤模型。Sham组游离出右侧肾动脉,但不夹闭右侧肾蒂,暴露40 min后缝合腹腔。I/R+Kl组手术方法同I/R组,造模成功后,腹腔注射Klotho蛋白(0.01 mg/kg)。3组分别于造模成功后第1、7、14、28天收集大鼠血、肾组织标本,分别检测大鼠血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平;HE染色观察肾组织损伤情况,Masson染色观察肾纤维化情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清及肾组织Klotho蛋白水平,Western blot法检测肾脏组织Klotho蛋白的表达。结果与Sham组比较,I/R组及I/R+Kl组血Scr及BUN水平均升高(P<0.05),与I/R+Kl组比较,I/R组各时间点血Scr及BUN水平均升高(P<0.05)。HE染色结果显示,第1天时I/R组肾小管出现广泛急性坏死,I/R+Kl组损伤较轻微。Masson染色结果显示,I/R组第14天出现了轻度的纤维化,第28天时纤维化程度更为显著,I/R+Kl组纤维化程度较轻微(P<0.05)。ELISA结果显示,第1、14、28天时与Sham组比较,I/R+Kl组及I/R组血清及肾组织Klotho水平下降(P<0.05),I/R组血清及肾组织Klotho水平均低于I/R+Kl组(P<0.05)。Western blot结果显示,与Sham组比较,各时间点I/R组及I/R+Kl组Klotho水平均下降,而I/R+Kl组Klotho水平均高于I/R组(P<0.05)。结论肾缺血再灌注肾损伤时Klotho表达下调;外源性补充Klotho蛋白可缓解缺血再灌注肾损伤大鼠的急性肾损伤及纤维化,起到肾保护作用。

慢性肾衰患者血清FGF-23、klotho蛋白水平与疾病严重程度的关系

目的检测Klotho蛋白及成纤维细胞生长因子-23(fibroblast growth factor-23,FGF-23)在慢性肾衰竭(chronic kidney disease,CKD)患者血清中的表达,探究其与CKD严重程度的关系。方法选取2019年1月至2021年1月就诊的120例CKD患者纳入CKD组,选取同期健康体检者120例纳入对照组。比较2组研究对象的基本临床资料、klotho蛋白及FGF-23含量、肾小球滤过率及相关生化指标。结果2组患者在性别、年龄方面无统计学差异(P>0.05),具有可比性;CKD组klotho蛋白、血红蛋白(Hb)、肾小球滤过率(GFR)均低于对照组;FGF-23、血磷(P)水平均高于对照组;且随着CKD分期的进展,klotho蛋白、Hb、GFR水平逐渐降低;FGF-23、P水平逐渐升高,差异均有统计学意义(P<0.05);CKD组患者治疗后14天,随着病情的缓解,klotho蛋白、FGF-23均有不同程度改善,差异有统计学意义(P<0.05)。结论FGF23与Klotho蛋白可能与CKD严重程度具有一定相关性,可成为CKD预后及治疗的新靶标。

Klotho蛋白、FGF-23和慢性心力衰竭合并衰弱的关系

目的:分析klotho蛋白、成纤维细胞生长因子-23(fibroblast growth factor-23,FGF-23)和慢性心力衰竭(心衰)合并衰弱的关系。方法:选取2022年9月—2023年6月福建省立医院收治的200例慢性心衰患者为研究对象。收集所有患者的临床资料。根据有无衰弱将患者分为慢性心衰合并衰弱组和单纯慢性心衰组,并将慢性心衰合并衰弱患者分为轻度衰弱组、中度衰弱组和重度衰弱组。比较慢性心衰合并衰弱组和单纯慢性心衰组临床资料。比较轻度衰弱组、中度衰弱组和重度衰弱组klotho蛋白、FGF-23水平。分析慢性心衰合并衰弱患者klotho蛋白、FGF-23水平与营养指标、炎症因子、衰弱程度的关系。结果:慢性心衰合并衰弱组Ⅱ级占比、klotho蛋白、白蛋白及血红蛋白均低于单纯慢性心衰组,N末端B型利钠肽原(N-teminal-pro-B-tye natriunetic peptide,NT-proBNP)、FGF-23、红细胞体积分布宽度、超敏C反应蛋白及肿瘤坏死因子-α水平均高于单纯慢性心衰组,差异有统计学意义(P<0.05)。重度衰弱组、中度衰弱组klotho蛋白水平低于轻度衰弱组,重度衰弱组klotho水平低于中度衰弱组;重度衰弱组、中度衰弱组FGF-23水平高于轻度衰弱组,重度衰弱组FGF-23水平高于中度衰弱组,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman结果显示,Klotho蛋白与衰弱程度呈负相关(r_(s)=-0.286,P<0.001),FGF-23与衰弱程度呈正相关(r_(s)=0.373,P<0.001)。Pearson相关性分析显示,klotho蛋白与白蛋白、血红蛋白呈正相关,与红细胞体积分布宽度、超敏C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α呈负相关;FGF-23与白蛋白、血红蛋白呈负相关,与红细胞体积分布宽度、超敏C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α呈正相关(P<0.05)。结论:慢性心衰合并衰弱患者血清FGF-23水平升高、klotho蛋白水平降低,klotho蛋白、FGF-23水平与慢性心衰合并衰弱患者营养指标及炎症因子相关,测定血清klotho蛋白、FGF-23水平可能有助于临床慢性心衰合并衰弱患者病情的评估,进而为临床治疗提供参考。

Klotho蛋白对急性心肌梗死小鼠肠道菌群及心功能的影响

目的研究Klotho(KL)蛋白对急性心肌梗死(以下简称心梗)小鼠肠道菌群及心功能的影响。方法将24只6周龄雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为3组,即心梗组、KL组和对照组。心梗组和KL组小鼠接受急性心肌梗死手术,对照组小鼠接受假手术,术后每组均存活7只小鼠。术后第2天起对KL组小鼠腹腔注射KL(20ng/kg),每两天注射1次,心梗组和对照组小鼠腹腔注射0.9%氯化钠溶液(15ml/kg),30天后对小鼠进行超声心动图检查;取小鼠肠道内粪便进行16S rDNA基因测序,分析菌群的α多样性、β多样性和菌群结构;采集小鼠心肌组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)技术检测小鼠心肌B型脑钠肽(B-type natriuretic peptide,BNP)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和转化生长因子-β1(trarisforming growth factor-β1,TGF-β1)的mRNA的表达水平。结果主成分分析(principal component analysis,PCA)表明,KL组与心梗组小鼠肠道菌群构成上存在明显差异。门水平上,心梗组较对照组小鼠拟杆菌门相对丰度增高,厚壁菌门相对丰度降低;属水平上,心梗组小鼠Muri菌增加,毛螺菌科NK4A136组菌群减少。经过KL治疗后,上述菌群相对丰度均得到一定的改善。KL组较其他两组Epsilonbacteraeota菌门、杜氏杆菌和幽门螺杆菌相对丰度均明显升高。在BNP、TNF-α和TGF-β1mRNA的表达上,KL组较心梗组有明显下降。超声心动图结果显示,KL组左心室射血分数和缩短分数均较心梗组明显改善。结论KL具有改善急性心肌梗死小鼠肠道菌群紊乱和心功能的作用,为KL的实际应用提供了新的思路和依据。

不同血液透析模式对维持性血液透析患者成纤维生长因子23、Klotho蛋白及钙磷代谢的影响

目的探讨不同透析模式对维持性血液透析患者成纤维细胞生长因子23、Klotho蛋白及钙磷代谢的影响。方法选取2020年11月至2022年4月蚌埠医学院第一附属医院血液净化中心慢性肾脏病5期、维持性血液透析患者117例,按照血液透析模式组合的差异,将其分为单纯血液透析(Hemodialysis,HD)组(30例)、HD+血液透析滤过(Hemodiafiltration,HDF)组(42例)、HD+HDF+血液灌流(Hemoperfusion,HP)组(45例),比较各组患者治疗6个月前后血清成纤维细胞生长因子23(FGF-23)、Klotho蛋白、肌酐(Scr)、尿素(BUN)、碱性磷酸酶(ALP)、钙(Ca)、磷(P)、甲状旁腺激素(PTH)等指标。结果HD+HDF组、HD+HDF+HP组的FGF-23、ALP、PTH、P水平较治疗前均明显降低,且低于HD组(P<0.05),Klotho水平明显升高,且高于HD组(P<0.05)。结论相较于单纯HD治疗,HD+HDF及HD+HDF+HP治疗均能有效清除中、大分子毒素,HD+HDF+HP净化效果较好,有助于纠正钙磷代谢紊乱及改善血液透析相关并发症。

Klotho蛋白与Wnt信号通路在骨代谢中的研究进展

Klotho蛋白可通过调节磷酸盐、骨矿化、维生素D及成骨细胞和破骨细胞的分化成熟、生物活性与细胞凋亡等机制影响骨代谢过程。而Wnt信号通路在成骨细胞分化成熟、骨骼发育和骨量维持中起关键作用。Klotho蛋白可能通过Wnt信号通路参与骨代谢过程。本文对Klotho蛋白与Wnt信号通路在骨代谢中的相互作用及其机制作一综述,为骨质疏松症的早期干预与治疗提供新的思路。

血清MLT、Klotho蛋白与原发性闭角型青光眼患者促炎症因子和疗效的关系

目的探讨血清褪黑素(MLT)、Klotho蛋白与原发性闭角型青光眼(PACG)患者促炎症因子和手术治疗效果的关系。方法选取2018年6月至2021年6月自贡市第四人民医院收治的PACG患者149例为病例组,另选取同期在该院体检的健康者149例为对照组,比较两组血清MLT、Klotho蛋白及促炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,采用Pearson相关分析血清MLT、Klotho蛋白与促炎症因子水平的相关性,采用单因素和多因素Logistic回归模型分析手术治疗效果的影响因素。结果与对照组比较,病例组血清MLT、Klotho蛋白水平降低(P<0.05),IL-1β、IL-6、TNF-α水平升高(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,血清MLT、Klotho蛋白均与促炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平呈负相关(P<0.05)。149例患者手术治疗12个月后,手术治疗效果无效患者30例(无效组),占20.13%;手术治疗效果有效患者119例(有效组),占79.87%。单因素分析结果显示,与有效组比较,无效组术前眼压(IOP)、慢性PACG比例、术前最佳矫正视力、术前房角粘连>160°比例升高(P<0.05),术前前房深度、MLT、Klotho蛋白水平降低(P<0.05)。多因素Logistic回归模型结果显示,术前IOP升高、慢性PACG、MLT水平降低、Klotho水平降低是手术治疗效果无效的独立危险因素(P<0.05)。结论血清MLT、Klotho蛋白在PACG患者中水平降低,与促炎症因子关系密切,是影响手术治疗效果的相关因素。

阿仑膦酸钠治疗骨质疏松对骨密度与血清Klotho蛋白水平的影响

目的探讨阿仑膦酸钠治疗骨质疏松对骨密度与血清Klotho蛋白水平的影响。方法选择2020年6月至2021年12月就诊于北京市隆福医院的150例骨质疏松患者,按照随机数字表法分成对照组与观察组,每组75例。对照组予以常规治疗,观察组予以常规治疗+阿仑膦酸钠治疗,均治疗6个月。比较2组治疗前后骨密度(L_(1~4)椎体、股骨颈、Ward′s三角区、大转子)、骨转换指标(骨碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原N末端肽、骨钙素)、血清Klotho蛋白水平、临床疗效和不良反应发生情况。结果2组治疗后L1~4椎体、股骨颈、Ward′s三角区、大转子的骨密度均高于治疗前,且观察组均高于对照组(均P<0.05)。2组治疗后骨碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原N末端肽、骨钙素水平均高于治疗前,且观察组均高于对照组(均P<0.05)。对照组与观察组治疗后血清Klotho蛋白水平均低于治疗前[(737±45)ng/L比(884±50)ng/L、(673±41)ng/L比(884±51)ng/L],且观察组治疗后血清Klotho蛋白水平低于对照组(均P<0.05)。观察组总有效率高于对照组[93.3%(70/75)比82.7%(62/75)](P=0.044)。2组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P=0.754)。结论阿仑膦酸钠治疗骨质疏松的效果较好,可改善患者骨密度、骨转换指标,降低血清Klotho蛋白水平,且不良反应少,有效性与安全性均较好。

Klotho蛋白在子痫前期患者胎盘外泌体中表达及其对血管内皮细胞氧化应激的影响

目的:探讨Klotho在子痫前期(PE)患者来源的胎盘外泌体(Exo)中的表达,阐明其对血管内皮细胞氧化应激的影响。方法:收集40例孕产妇的临床资料,其中正常妊娠(NP)者20名,PE患者20例,设为NP组和PE组,分离2组研究对象外周血中胎盘Exo。将oe-Klotho和oe-NC质粒转染入人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo中,作为oe-Klotho组和oe-NC组,收集HTR-8/SVneo细胞Exo。采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法和Western blotting法检测2组研究对象胎盘Exo和2组HTR-8/SVneo细胞Exo中Klotho mRNA及蛋白表达水平。取生长状态良好的人脐静脉内皮细胞(HUVECs),按Exo来源不同将HUVECs分为PE-Exo组(与PE患者胎盘Exo共培养)、NP-Exo组(与NP胎盘Exo共培养)、oe-Klotho-Exo组(与转染oe-Klotho的HTR-8/SVneo细胞Exo共培养)和oe-NC-Exo组(与转染oe-NC的HTR-8/SVneo细胞Exo共培养)。采用透射电子显微镜(TEM)观察Exo形态表现,Western blotting法检测Exo标记分子CD63、TSG101和胎盘Exo标记分子PLAP蛋白表达水平以鉴定Exo,荧光显微镜观察HUVECs对Exo的摄取情况。酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组HUVECs中一氧化氮(NO)、活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性,RT-qPCR法检测各组HUVECs中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组HUVECs中eNOS蛋白表达水平。结果:与NP组比较,PE组患者收缩压和舒张压升高(P<0.05),新生儿体质量和胎盘质量均明显降低(P<0.05或P<0.01)。TEM观察,来源于NP组和PE组研究对象的胎盘Exo均呈圆形和椭圆形的囊泡盘状结构,包膜完整,形状相似,直径为50~100 nm;2组研究对象胎盘Exo均高表达Exo标记蛋白CD63和TSG101及胎盘Exo特异性蛋白PLAP。纳米示踪分析(NTA)检测,胎盘Exo的粒径为50~200 nm,提示由外周血分离的囊泡均是胎盘来源Exo。TEM、Western blotting和NTA检测,来源于oe-NC组和oe-Klotho组滋养层细胞的囊泡具有Exo的典型结构、分子标志物和粒径大小特征。HUVECs中均可见到明显的Exo绿色荧光表达,提示Exo可被HUVECs摄取。ELISA法检测,与NP-Exo组比较,PE-Exo组HUVECs中NO水平和SOD活性均明显降低(P<0.05或P<0.01),ROS和MDA水平明显升高(P<0.05或P<0.01);与oe-NC-Exo组比较,oe-Klotho-Exo组HUVECs中NO水平和SOD活性升高(P<0.05),ROS和MDA水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。RT-qPCR法检测,与NP组比较,PE组研究对象胎盘Exo中Klotho mRNA表达水平明显降低(P<0.01);与NP-Exo组比较,PE-Exo组HUVECs中eNOS mRNA表达水平明显降低(P<0.01);与oe-NC组比较,oe-Klotho组滋养层细胞Exo中Klotho mRNA表达水平明显升高(P<0.01);与oe-NC-Exo组比较,oe-klotho-Exo组HUVECs中eNOS mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。Western blotting法检测,与NP组比较,PE组研究对象胎盘Exo中Klotho蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与NP-Exo组比较,PE-Exo组HUVECs中eNOS蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与oe-NC组比较,oe-Klotho组滋养层细胞Exo中Klotho蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与oe-NC-Exo组比较,oe-Klotho-Exo组HUVECs中eNOS蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。结论:来源于PE患者的胎盘Exo可能通过抑制HUVECs中NO的产生和促进氧化应激反应以损伤内皮细胞功能,过表达Klotho的滋养层细胞Exo可减少HUVECs中NO的产生和氧化应激水平。

Klotho蛋白在脓毒症性急性肾损伤发病机制及诊治中研究进展

脓毒症是宿主对感染反应失控引起的器官功能障碍,是急危重症患者常见的死亡原因之一^([1])。脓毒症性急性肾损伤(sepsis associated acute kidney injury,SA-AKI)是由脓毒症引起短时间内肾功能快速减退而导致的临床综合征,是脓毒症常见的并发症。有研究显示,SA-AKI发病率为51.0%~66.9%,病死率高达70.0%^([2-4])。

老年脑梗死后认知功能障碍患者血清OC、ACA、Klotho蛋白变化及预后相关性

目的探讨老年脑梗死后认知功能障碍骨钙素(osteocalcin,OC)、抗心磷脂抗体(anti cardiolipin antibody,ACA)、Klotho蛋白水平变化及与预后相关性,以期为临床评估认知功能障碍、早期预测预后提供参考。方法选取泉州市第一医院2020年8月—2022年8月就诊的老年脑梗死患者200例作为研究对象,根据有无认知功能障碍分为认知功能障碍组(n=68)与非认知功能障碍组(n=132)。比较两组血清OC、ACA、Klotho蛋白水平及蒙特利尔认知评估量表(Montreal cognitive assessment,MoCA)评分,并进行相关性分析;随访6个月,比较不同预后患者血清OC、ACA、Klotho蛋白水平,分析其对老年脑梗死预后评估价值。结果与非认知功能障碍组比较,认知功能障碍组血清OC、Klotho、Mo CA评分较低,血清ACA水平较高(P<0.05)。血清OC、Klotho与老年脑梗死患者MoCA评分呈正相关,血清ACA与MoCA评分呈负相关(P<0.05)。与预后良好患者比较,预后不良患者血清OC、Klotho水平较低,血清ACA水平较高(P<0.05)。血清OC、ACA、Klotho预测老年脑梗死患者预后不良的AUC分别为0.832、0.795、0.856,各指标联合预测AUC为0.927,高于单一指标预测。结论血清OC、Klotho、ACA与老年脑梗死患者认知功能障碍显著相关,临床可通过其水平变化初步预测患者预后,以针对性展开后续治疗、改善预后。