肺炎克雷伯菌KP1_2626基因突变株的构建及其对细胞毒性的影响

为探讨KP12626基因对菌株毒力的影响,本研究通过构建KP12626基因缺失的突变株Kp-Δ2626及其回补株Kpc-Δ2626,以野生株NTUH-K2044为对照,分析突变株和回补株对细胞毒性的差别,为进一步研究KP12626对菌株毒力的的调控机制提供基础。通过同源重组得到突变株Kp-Δ2626,然后将含有KP12626基因片段的重组质粒转化入突变株中得到回补株Kpc-Δ2626。分别测定3株菌株的生长曲线,了解KP12626基因对细菌生长的影响。用野生株、突变株和回补株3种菌株感染A549细胞,通过检测细胞乳酸脱氢酶LDH释放量来反应细菌对细胞的毒性。本实验成功构建了突变株Kp-Δ2626和回补株Kpc-Δ2626。生长曲线的测定结果表明KP12626基因的缺失不影响细菌的生长。与野生株比较突变株的细胞毒性明显减弱,回补株的细胞毒性介于野生株和突变株之间,表明突变株的细胞毒性减弱是由KP12626基因的缺失引起的,KP12626基因影响菌株的毒力。