建立一种适合本实验室快速检测产KPC酶肺炎克雷伯菌的方法

目的运用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)检测产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP),筛选并验证其特征峰,建立一种适用于本实验室快速检测产KPC酶型CRKP的方法。方法收集临床耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌39株,运用PCR方法检测出其中23株产KPC酶,再采用MALDI-TOF MS技术检测KPC酶阳性CRKP菌株,得到质谱图后用Flex Analyst软件分析筛选出其中特征峰,并进行重复性实验和临床验证评估。结果综合筛选出产KPC酶CRKP最佳特征峰为m/z 6432,特征峰验证实验和重复性实验的特异性和敏感性分别为96.67%和100%。临床验证评估特异性和敏感性分别为92.31%和100%。结论利用MALDI-TOF MS技术可检出产KPC酶CRKP的最佳特征峰为m/z 6432,经实验证实该特征峰特异性和敏感性高,可为临床快速诊断和治疗产KPC酶CRKP提供理论基础。

四种清热解毒中药注射液对血培养产KPC酶肺炎克雷伯菌感染的干扰实验及应对策略

目的研究痰热清、清开灵、热毒宁及喜炎平中药注射液对体外血培养产KPC酶肺炎克雷伯菌(KPC酶)感染时产生药物干扰后,血培养阳性报警时间差异以及应对药物干扰策略。方法分别将痰热清、清开灵、热毒宁及喜炎平注射液建立实验组,按照不同浓度注入到血培养瓶内,观察和比较实验组与对照组血培养阳性报警时间。结果痰热清注射液100%、50%浓度实验组与对照组比较,产KPC酶肺炎克雷伯菌阳性报警时间延长为41.9%、25.6%;清开灵注射液100%、50%浓度实验组与对照组比较,阳性报警时间延长为9.3%、4.7%;热毒宁注射液100%、50%、25%、12.5%浓度实验组与对照组比较,阳性报警时间延长为62.8%、51.1%、32.6%、27.9%;喜炎平注射液100%、50%、25%、12.5%浓度实验组与对照组比较,阳性报警时间延长均为0%。结论痰热清、清开灵和热毒宁注射液对血培养产KPC酶肺炎克雷伯菌感染报警时间延长,喜炎平注射液不产生干扰;血培养阳性报警延长时间结果热毒宁>痰热清>清开灵>喜炎平;送检血培养避免药物干扰,并且建立应对策略。

产KPC酶肺炎克雷伯菌对头孢他啶/阿维巴坦耐药机制研究进展

头孢他啶/阿维巴坦(Ceftazidime/Avibactam,CZA)是头孢他啶和一种新型β-内酰胺酶抑制剂(阿维巴坦)的组合,已被美国食品药品监督管理局和国家市场监督管理总局批准,主要用于治疗复杂的腹部和尿道感染、医院获得性细菌性肺炎和呼吸机相关的细菌性肺炎,特别是由肺炎克雷伯菌引起的感染和炎症。然而,CZA临床应用导致了多重耐药肺炎克雷伯菌的出现。其耐药机制主要有三种:blakpc基因的突变、细菌细胞膜孔蛋白突变和KPC酶的表达量增加。本文就耐CZA的肺炎克雷伯菌流行情况和耐药机制进行综述,旨在为临床防治CZA的耐药菌株提供科学依据,并为新药开发提供指导。

产KPC酶肺炎克雷伯菌的感染分布特点及中西医药物结合对其的抑制效果

目的探讨产KPC酶肺炎克雷伯菌的临床感染分布特点及中西医结合的干预效果。方法收集临床多个科室标本,共筛查出产KPC酶肺炎克雷伯菌株523株,分析其临床分布情况及病区分布情况。将配置好的头孢三嗪、鱼腥草注射液、穿琥宁注射液分别单独或与西药配伍加入适当浓度的产KPC酶肺炎克雷伯菌落中,经动态比浊法测定内毒素含量。结果在临床分离出的523例产KPC酶肺炎克雷伯菌株中,来自于呼吸道标本所占的比率最高,其次为中段尿液、脓液及伤口分泌物、血液。在各标本中产ESBLs阳性率最高的为呼吸道标本,其次为脓液及伤口分泌物、血液、中段尿液。产KPC酶肺炎克雷伯菌的临床病区分布情况:呼吸科所占比率最高,其次为ICU、感染科、泌尿外科。产ESBLs情况也存在明显差异,ICU所占百分比最高,其次为肿瘤科、呼吸科、感染科。鱼腥草组、穿琥宁组及与西药配伍组内毒素产生的量均明显低于西药组(P<0.01)。结论产KPC酶肺炎克雷伯菌的临床分布有一定特点,中药抗菌药物配伍西药对产KPC酶肺炎克雷伯菌内毒素的释放有明显的抑制作用。

产KPC酶肺炎克雷伯菌9株的药敏试验结果分析

目的分析产KPC酶肺炎克雷伯菌的耐药性和基因型及对替加环素的敏感性,为临床治疗该类菌感染提供依据。方法收集2012年2月—2013年5月自临床科室分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌9株,采用VITEK2 Compact全自动微生物鉴定系统进行细菌鉴定及药敏试验,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶,聚合酶链反应(PCR)法检测菌株的KPC酶基因型,E试验法检测替加环素对菌株的体外抗菌活性。结果所分离的9株肺炎克雷伯菌对所测试的19种抗菌药物均显耐药,7株改良Hodge试验阳性。9株肺炎克雷伯菌均扩增出KPC目的基因条带,均为KPC-2型基因。9株耐药菌对替加环素均敏感。结论产KPC酶肺炎克雷伯菌耐药形势严峻,替加环素作为新一代抗生素对其有良好的体外抗菌活性。

产KPC酶肺炎克雷伯菌中ESBL的检测

目的了解某医院产KPC酶肺炎克雷伯菌中产ESBL的情况，并建立一种有效的ESBL表型检测方法。方法收集82株产KPC酶的肺炎克雷伯菌，纸片扩散法进行药物敏感试验；PCR和DNA测序鉴定超广谱口内酰胺酶基因型；脉冲场凝胶电泳进行同源性分析；CLSI推荐的ESBL表型确证试验、利用3-氨基苯酚硼酸的改良ESBL表型确证试验和改良Hodge试验进行表型试验。结果含blaESBL的产KPC菌株对β-内酰胺类药物耐药率普遍高于单产KPC菌株。ESBL基因检出率为79．3％，基因型以SHV型和CTX-M型为主。PFGE显示菌株间的相似性系数≥94％。改良Hodge试验均为阳性结果。ESBL表型确证试验检出率低，改良ESBL表型确证试验的检出率与PCR结果相符。结论大多数产KPC菌株含ESBL基因，因此对β内酰胺类药物具备了更强的耐药性。利用3-氨基苯酚硼酸的改良ESBL表型确证试验能有效地检测合并产KPC菌株中ESBL的表型。

产KPC酶肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类药物的分子机制研究

目的研究临床分离肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类药物的分子耐药机制,为临床合理用药提供理论及实验依据。方法收集2020年1月—2020年12月皖南医学院弋矶山医院临床分离非重复肺炎克雷伯菌株923株,利用全自动微生物分析系统进行菌种鉴定及药敏分析,并用16S rRNA PCR扩增产物测序验证菌种,K-B法复核碳青霉烯类药物耐药情况;胶体金法对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumonia,CRKP)菌株进行碳青霉烯酶的表型检测,并用碳青霉烯酶PCR扩增结果进行验证;同时利用全自动微生物分析系统对产KPC酶CRKP产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrumβ-lactamases,ESBLs)进行检测,并用ESBLs耐药相关基因PCR扩增结果进行验证;多位点序列分型技术(MLST)对产KPC酶CRKP进行序列分型(ST)。结果923株肺炎克雷伯菌中256株(27.74%)为CRKP,其中183株携带bla_(KPC),ST分型为ST11型和ST12型,产KPC酶CRKP携带3种ESBLs基因bla_(TEM-1)、bla_(SHV-11)和bla_(CTX-M-1)。结论CRKP产碳青霉烯酶以KPC酶型为主,bla_(KPC)可合并3种ESBLs的产生。

产KPC酶肺炎克雷伯菌耐药情况及基因型分析

目的分析我院产KPC酶肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型。方法收集2012年2月至2013年5月期间分离自我院临床科室的对亚胺培南耐药的肺炎克雷伯菌9株,采用VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定系统进行细菌鉴定及药敏试验,采用改良Hodges试验对KPC酶表型进行检测,采用PCR法对菌株的KPC酶基因型进行检测。结果所分离的9株肺炎克雷伯菌对所选用的19种抗生素均100.0%耐药,有7株改良Hodges试验呈现阳性结果,阳性率77.8%。9株肺炎克雷伯菌均扩增出KPC目的基因条带,且均为KPC-2型基因。结论产KPC酶肺炎克雷伯菌耐药形势严峻,合理使用抗菌药物,加强感染者的消毒与隔离,是控制此类细菌感染的有效措施。

替加环素和多黏菌素对产KPC酶肺炎克雷伯菌的抗菌效应研究

目的评价替加环素、多黏菌素对产KPC酶肺炎克雷伯菌的体外抗菌效应研究,指导临床正确选择并合理使用抗菌药物。方法收集2012—2016年期间分离自温州医科大学附属第三医院临床样本中对碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌109株,采用Vitek-2 compact和Vitek MS进行菌种鉴定及药敏试验;采用聚合酶链反应(PCR)法检测菌株的KPC酶耐药基因并采用琼脂稀释法药敏试验分别检测替加环素、多黏菌素等药物的单药最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)值。结果所分离的109株均为产KPC-2肺炎克雷伯菌,经过Vitek-2 compact和KB法试验可知109株肺炎克雷伯菌对阿米卡星的耐药率为82.57%,对亚胺培南、美罗培南等其他药物的耐药率均为100%。琼脂稀释法药敏结果显示109株肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南耐药率均为100%;对阿米卡星耐药率为89%;对替加环素的敏感率为65.1%,29.4%中介;对多黏菌素的敏感率为100%。结论产KPC-2型肺炎克雷伯菌对多黏菌素和替加环素较为敏感,可作为临床用药参考。

丽水市中心医院产KPC酶肺炎克雷伯菌的分子流行病学研究

目的明确丽水市中心医院产KPC酶肺炎克雷伯菌的分子流行病学特征,为临床抗感染治疗提供实验依据。方法收集2011年3月至2015年10月丽水市中心医院分离的碳青霉烯类抗生素耐药肺炎克雷伯菌(CR-KP)。采用Vitek2-compact系统鉴定菌株并联合纸片扩散法(K-B法)检测其药敏,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;PCR法扩增KPC基因,测序后利用BLAST比对确定基因型;肠杆菌科基因间重复序列分型法(ERIC-PCR)联合多位点序列分型(MLST)鉴定菌种同源性;进而探讨产KPC酶肺炎克雷伯菌的分子流行病学特征。结果共收集到70株CR-KP,其中68株改良Hodge试验阳性,扩增产物测序结果均为blaKPC-2基因。ERIC-PCR结果显示,70株KPC型肺炎克雷伯菌分为A、B、C、D、E5个克隆群分别为63株(90.0%)、3株、2株、1株、1株;MLST分成6个ST型,其中ST11型63株(90.0%),ST35型2株,ST1型2株,ST592、ST1883、ST494型均1株。结论丽水市中心医院碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的主要克隆群为ST11型,是我院流行感染的主要原因。

徐州地区三级医院产KPC酶肺炎克雷伯菌的检测与流行状况分析

目的：了解徐州地区三级医院肺炎克雷伯菌产KPC酶流行状况。方法收集徐州地区三级医院临床分离非重复肺炎克雷伯菌130株，予VITEK-32型全自动微生物分析系统鉴定，筛选出对亚胺培南耐药或中介菌株，对初筛阳性菌予改良Hodge试验进行表型确认，PCR方法检测KPC基因。结果初筛41株肺炎克雷伯菌可疑产碳青霉烯酶，经改良Hodge试验测定35株KPC酶阳性，检出率为26.9%（35/130），PCR方法检测有33株KPC酶阳性，检出率为25.4%（33/130）。结论徐州地区三级医院产KPC酶肺炎克雷伯菌发生率相对较高，需引起临床关注。

KL47型和KL64型产KPC酶肺炎克雷伯菌的菌株特征和体外药物敏感性分析

目的分析KL47型和KL64型荚膜血清型产KPC酶肺炎克雷伯菌(KPC-KP)的菌株特点,比较多黏菌素B、替加环素、头孢他啶-阿维巴坦对KL47型和KL64型KPC-KP菌株的体外抗菌活性。方法纳入2019年1月—2020年12月南部战区总医院216例患者不同部位分离的280株经PCR确认携带blaKPC的KPC-KP菌株。用wzi测序法进行荚膜血清型测定,采用肉汤微量稀释法检测多黏菌素B、替加环素、头孢他啶-阿维巴坦以及临床常用抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)。结果280株KPC-KP中168株为患者单一部位分离的菌株,另112株来自48例患者2~5个不同部位分离到菌株。168株荚膜血清分型以KL47型和KL64为主,分别占44.6%(75/168)和38.7%(65/168),其他荚膜血清型(KL10、KL12、KL19、KL27、KL28、KL105、KL110)占14.9%(25/168),3株(1.8%)菌株无法归类于以上血清型。112株KPC-KP中82株来自37例患者不同部位分离的菌株荚膜血清型均为同一型,另30株来自11例患者不同部位分离的菌株荚膜血清型为不同型;KL47型和KL64型分别为54.5%(61/112)和27.7%(31/112),其他荚膜血清型为12.5%(14/112),有6株(5.4%)无法归类于以上血清型。KL47型和KL64型两组患者患有基础疾病中,除慢性阻塞性肺疾病患病率差异有统计学意义(P<0.01),其余临床危险因素差异均无统计学意义(P>0.05),KL47和KL64型患者14 d及28 d死亡率差异无统计学意义(P>0.05)。136株KL47对多黏菌素B、替加环素和头孢他啶-阿维巴坦敏感率为95.6%、97.8%和98.5%,MIC_(90)分别为16、2、8 mg/L;96株KL64对多黏菌素B、替加环素和头孢他啶-阿维巴坦敏感率为88.5%、91.7%和100%,MIC_(90)分别为16、2、4 mg/L。多黏菌素B和头孢他啶-阿维巴坦对KL47和KL64体外抗菌活性相当(P>0.05),而替加环素对KL47和KL64型KPC-KP菌株体外抗菌活性差异有统计学意义(P=0.04)。结论该院KPC-KP荚膜血清型以KL47和KL64型为主。多黏菌素B和头孢他啶-阿维巴坦对KL47和KL64体外抗菌活性差异无统计学意义,替加环素对KL47具有更好的体外抗菌优势。KL64的高流行率、高耐药率可能带来临床难治愈及高死亡率,亟需感染防控措施的加强及临床流行病学监控。

MALDI-TOF MS技术快速检测产KPC酶肺炎克雷伯菌的研究

应用常规细菌分离方法分离肺炎克雷伯菌,全自动微生物分析仪鉴定肺炎克雷伯菌并进行药物敏感试验,改良Hodge法检测菌株产碳青酶烯酶的能力,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)检测产碳青霉烯酶(KPC)肺炎克雷伯菌和不产KPC酶肺炎克雷伯菌.结果显示,38株产KPC酶肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南和哌拉西林/他唑巴坦的耐药率为100.0%;产KPC酶肺炎克雷伯菌与不产KPC酶肺炎克雷伯菌的质谱峰不同,7个质谱峰的分布频率有统计学差异(P<0.01);质荷比为8309.74和2209.78处的质谱峰联合诊断产KPC酶肺炎克雷伯菌的敏感度为89.5%,特异性为96.3%.结果提示,MAALDI-TOF MS可以快速、准确地鉴别产KPC酶肺炎克雷伯菌.

产KPC肺炎克雷伯菌感染治疗的研究进展

近年来全国耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)分离率逐年上升,且由于其多重耐药、病死率高的特点,给临床治疗带来了严峻挑战。CRKP耐药最主要机制为产碳青霉烯酶,在CRKP中常见的碳青霉烯酶类型为Ambler A、B、D类,C类少见。碳青霉烯酶中最常见的是肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC),属于A类。产KPC肺炎克雷伯菌(KPC-KP)在全球范围内广泛扩散,临床有效治疗药物非常有限。本文就KPC-KP感染治疗的研究进展进行总结,以期为临床治疗提供借鉴意义。

肺炎克雷伯菌噬菌体裂解酶的研究进展

随着耐药性肺炎克雷伯菌的增多,噬菌体的潜力逐步被发掘。裂解酶在噬菌体裂解宿主菌时起到了重要作用,作为外源纯化蛋白使用时,防控效果更为显著。现有研究中,针对革兰阳性菌噬菌体裂解酶的表达更多,因其不具有革兰阴性菌细胞壁外层的肽聚糖层,而对肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌等革兰阴性菌的噬菌体裂解酶研究仍较为罕见。但已有研究表明,多种策略可以克服其肽聚糖层带来的阻碍。本文主要综述了近年来用于防控肺炎克雷伯菌的噬菌体裂解酶及其作用机制和防控优势,旨对其后续研究提供思路。

多重耐药肺炎克雷伯菌中碳青霉烯酶的检测和分析

探究多重耐药肺炎克雷伯菌中碳青霉烯酶的检测和分析。方法 在2021年1月至2023年11月期间,本研究对黄河中心医院采集的78株肺炎克雷伯菌(一种多重耐药菌)进行深入研究。为了探究这些菌株中是否存在碳青霉烯酶基因,进行碳青霉烯酶表型试验。随后,为了进一步验证这些基因的存在,利用聚合酶链反应对它们进行检测,并对扩增产物进行DNA测序,确保能够准确地确定它们的基因型。经分析发现这78株肺炎克雷伯菌中,有48株被明确鉴定为超广谱β内酰胺酶(ESBL)阳性菌,而另外30株则为ESBL阴性菌。这一研究结果对肺炎克雷伯菌的耐药机制提供了更为精确的认识,对于指导临床用药和防控耐药菌的传播具有重要意义。结果 经过严格的检测,发现所检测的菌株中,产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的阳性率高达61.54%。药敏分析结果显示,产ESBL菌株对第一,二代头孢菌素及青霉素类抗菌药物具有较高的耐药性。特别是针对单环类氨曲南,耐药率达到惊人的100.00%。值得注意的是,除了亚胺培南、厄他培南、美罗培南及左氧氟沙星外,产ESBL菌株相较于非产ESBL菌株具有更高的耐药性。在78株肺炎克雷伯菌中,Hodg试验阳性菌共有10株,占比12.82%;阴性菌68株,占比87.18%。在10株Hodg试验阳性菌中,仅有1株金属酶试验呈阳性。通过PCR扩增技术,成功确认10株阳性菌中的4株,其中3株为KPC型,阳性率为3.85%,另1株为IMP型,阳性率为1.28%。进一步的PCR产物测序分析显示,3株产KPC型菌株均携带KPC-2基因亚型,而产IMP型菌株携带的基因亚型为MP4。这些数据为研究和应对肺炎克雷伯菌的抗药性提供宝贵的线索和依据。结论 碳青霉烯酶在克雷伯菌中的检出率较高,尤其以KPC-2为最高,因此,在临床用药时应给予足够的关注,合理应用碳青霉烯,尽量减少耐药株,提高治疗效果,具有一定的意义。

黄芩消除产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌耐药质粒的研究

目的研究中药黄芩对产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(Carbapenemase-producing Klebsiella pneumoniae,CRKP)的抑菌及质粒消除作用。方法用肉汤稀释法测得黄芩、亚胺培南对CRKP的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC);用质粒消除试验测定黄芩对CRKP的质粒消除率;用质谱检测系统对质粒消除菌株的菌种进行鉴定,用K-B纸片琼脂扩散法(Kirby-Bauerdiscagar diffusion method,K-B法)确认消除子对亚胺培南、美罗培南的敏感性,用碳青霉烯灭活试验/乙二胺四乙酸碳青霉烯灭活试验(mCIM/eCIM)确认消除子是否产碳青霉烯酶,用聚酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测消除子是否携带blaKPC基因。结果黄芩对CRKP的MIC值为6.25mg/mL,在24、48、72h的质粒消除率分别为0%、0.3%、1%;消除子经全自动微生物质谱检测系统鉴定为肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KPN),对亚胺培南、美罗培南敏感,mCIM/eCIM实验阴性,PCR未检测到blaKPC基因。结论黄芩对CRKP有一定的抑菌作用及质粒消除作用。

2021-2023年某院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药性和产酶表型分析

目的:分析某三甲医院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(Carbapenem-Resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)的临床分布、耐药特点和碳青霉烯酶表型,为制定有效的CRKP控制策略提供参考。方法:回顾性分析2021—2023年某三甲医院住院患者标本中分离的非重复CRKP菌株的分布、常用抗菌药物的耐药性变迁和产酶表型。结果:2021—2023年共检出183株CRKP,主要来源于痰液(65.0%)、尿液(11.5%)和血液(10.4%)。科室分布以ICU(33.3%)为主,其次是呼吸科(24.0%)和神经外科(15.3%)。其中,神经外科构成比呈逐年下降趋势(P<0.05),而康复科构成比则呈逐年上升趋势(P<0.05)。药敏检测结果显示CRKP对β-内酰胺类、氟喹诺酮类和氨基糖苷类药物高度耐药,对替加环素、多黏菌素B和头孢他啶/阿维巴坦较敏感;对左氧氟沙星和环丙沙星的耐药率均呈上升趋势(P<0.05)。大多数CRKP产生碳青霉烯酶,以丝氨酸酶为主,其中产D类丝氨酸酶的(OXA-48)菌株呈逐年下降趋势(P<0.05)。结论:该院临床分离的CRKP菌株主要分布在ICU病房,以肺部感染最为常见。这些菌株对多数常用抗菌药物表现出较高的耐药性,主要与产丝氨酸酶有关。医院需加强重点科室的监控,优化抗菌药物的使用策略,实施精准的防控措施,以有效遏制CRKP的传播。

外科ICU与内科ICU碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌耐药性、碳青霉烯酶基因检测及流行病学研究

目的分析外科ICU和内科ICU碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药性、常见的碳青霉烯酶基因及菌株之间的亲缘性关系。方法收集2019年1月至2020年12月从某三甲医院外科ICU和内科ICU分离鉴定的CRKP非重复菌株,采用自动仪器法对菌株进行药物敏感性试验;采用mCIM联合eCIM试验进行碳青霉烯酶表型检测,并通过PCR技术联合DNA测序检测碳青霉烯酶基因;利用多位点序列分型(MLST)方法对碳青霉烯酶阳性菌株进行同源性分析。结果共收集15株CRKP菌株,其中外科ICU 8株,内科ICU 7株。CRKP菌株对临床多数抗菌药物表现高耐药性,仅对替加环素表现较高敏感性。mCIM联合eCIM试验并经PCR验证,共有14株CRKP携带碳青霉烯酶基因,其中7株单纯携带KPC⁃2基因,主要来源于内科ICU;5株单纯携带NDM⁃5基因,来源于外科ICU;1株携带KPC⁃2基因合并少见金属酶基因来源于内科ICU;1株携带NDM⁃1基因合并OXA⁃181基因来源于外科ICU。MLST结果显示,医院ICU分离的CRKP菌株为ST11、ST15、ST163个序列型别。内科ICU优势序列为ST11(6/6),全部携带KPC⁃2基因;外科ICU优势序列为ST15(5/8),主要携带NDM⁃5基因。结论医院外科ICU和内科ICU分离的CRKP菌株耐药性高,其携带的耐药基因和优势流行菌株存在差异。应加强多重耐药菌的监测及流行病学研究,及时采取有效治疗方案和防控策略,防止耐药菌株产生和流行播散。

肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌产KPC酶的检测研究

目的了解肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌产KPC酶的情况和耐药关系。方法收集2007年3月至2008年10月临床分离的肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌681株,采用KB纸片法进行药敏试验,以亚胺培南,美罗培南,厄他培南为检测药物,筛选出碳青霉烯类耐药菌株,采用改良的Hodge试验、聚合酶链反应(PCR)扩增检测细菌产KPC酶及基因分型。结果在491大肠埃希菌株和190肺炎克雷伯菌株中,对碳青霉烯类耐药的大肠埃希菌6株,肺炎克雷伯杆菌6株。进行Hodge试验,12株菌全部阴性,聚合酶链反应(PCR)扩增没出现目的基因片段。结论在12株对碳青霉烯类抗生素耐药的细菌中未发现产KPC酶的菌株。据国内的同类研究报道,目前我国主要以产KPC-2酶为主,而且产KPC酶存在地域性差异,课题研究显示本区域暂时没发现产KPC酶的菌株,有待进一步监测研究。