KRT8对HBV复制影响的体外研究

目的:研究宿主蛋白KRT8对HBV复制的影响.方法:体外培养稳定表达HBV的肝癌细胞株(HepG2.2.15),分别用干扰KRT8基因的siRNA转染HepG2.2.15细胞和高表达KRT8基因的质粒转染HepG2.2.15细胞.RT-PCR验证转染效率,荧光定量PCR检测转染48小时后的细胞上清液HBV DNA水平.用拉米夫定抑制HepG2.2.15细胞HBV复制,RT-PCR检测基因表达水平.对数据采用t检验和方差分析,p<0.05为差异有统计学意义.结果:干扰KRT8基因表达后,HepG2.2.15细胞上清液中HBV DNA水平与对照组相比下降34%～38%(p<0.05).高表达KRT8基因后,HepG2.2.15细胞上清液中HBV DNA水平是对照组的28倍(p<0.01).抑制细胞HBV DNA复制后,HepG2.2.15细胞KRT8mRNA水平与对照组相比,下降了24%,但统计学无明显差异.结论:抑制宿主KRT8基因表达具有抗病毒作用.

冠心病患者血浆ANK1及KRT8的表达及临床意义

目的:探讨细胞锚蛋白(ankyrin 1,ANK1)和角蛋白(keratin 8,KRT8)在冠心病患者血浆中的表达及临床意义。方法:收集2014年6月至2015年12月我院收治的139例冠心病患者为病例组,按照临床资料将其分为稳定型心绞痛组(38例)、不稳定型心绞痛组(45例)和心肌梗死组(56例),根据Gensini评分标准将冠心病患者分为轻度狭窄组(29例)、中度狭窄组(72例)和重度狭窄组(38例);并于同期随机选取80例健康体检者为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定病例组和对照组血浆ANK1和KRT8水平。结果:病例组不同组别患者血浆ANK1和KRT8水平均高于对照组,其中稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛组和心肌梗死组患者血浆ANK1和KRT8水平依次增大,差异均有统计学意义(P<0.05)。病例组不同冠脉狭窄组患者的血浆ANK1和KRT8水平均明显高于对照组,轻度狭窄组、中度狭窄组、重度狭窄组患者血浆ANK1和KRT8水平依次增大,差异均有统计学意义(P<0.05)。血浆ANK1、KRT8水平与Gensini评分呈正相关关系(P<0.05)。结论:ANK1和KRT8在冠心病患者血浆中明显升高,并且冠状动脉病变越严重,两种蛋白的表达水平越高。

长链非编码RNA-Keratin 8的调控通路分析

目的运用生物信息学分析方法,分析长链非编码RNA-细胞角蛋白8(KRT8)在细胞内的调控靶基因及信号通路,并对其进行生物学功能注释,阐述lncRNA-KRT8在细胞内的功能作用。方法在miRDB数据库和Starbase3.0数据库中预测与lncRNA-KRT8有miRNA-lncRNA互作关系的miRNA,将结果取交集;在Starbase3.0数据库中预测miRNAs靶基因,并进行GO功能注释和Pathway通路富集。结果在miRDB数据库预测到15个miRNAs与lncRNA-KRT8相作用,Starbase3.0数据库预测到60个miRNAs与之相作用,取2个数据库的交集共获得2个miRNAs;GO功能注释显示lncRNA-KRT8通过hsa-miR-150-5p作用的靶基因主要调控蛋白结合、RNA结合、金属离子结合信号通路、转录调控作用及蛋白质的磷酸化过程;通过hsa-miR-512-3p作用的靶基因主要调控蛋白结合、DNA结合、金属离子的结合信号通路、蛋白质的泛素化降解过程;通过hsa-miR-150-5p主要调控ErbB信号通路、肿瘤中糖蛋白信号通路、miRNAs、胃癌信号通路等;通过hsa-miR-512-3p作用的信号通路主要是乙型肝炎、人T细胞白血病病毒、前列腺癌、胰岛素抵抗和MAPK信号通路等。结论长链非编码RNA-KRT8在细胞内的调控作用具体与蛋白质的结合和金属离子结合及糖蛋白、脂代谢信号通路密切相关,其可通过上述作用通路调控疾病的病理进展。