紫甘薯花色苷通过调控KTN1-AS1表达对肺癌细胞的增殖和凋亡的影响

目的探讨紫甘薯花色苷对肺癌细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法体外培养肺癌A549细胞,分为对照组、紫甘薯花色苷不同剂量(200,400,800μg/ml)组、si-NC组、si-KTN1-AS1组、紫甘薯花色苷800μg/ml+pc DNA组、紫甘薯花色苷800μg/ml+pc DNA-KTN1-AS1组,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞中KTN1-AS1表达水平,蛋白印迹法(Western blot)检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p21、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)表达水平。结果与对照组比较,紫甘薯花色苷不同剂量组细胞增殖抑制率、凋亡率及p21和Bax蛋白表达升高(P<0.05),cyclin D1和Bcl-2蛋白表达及KTN1-AS1表达降低(P<0.05),且呈剂量依赖性。与si-NC组比较,si-KTN1-AS1组细胞抑制率、凋亡率及p21和Bax蛋白表达升高(P<0.05),cyclin D1和Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。与紫甘薯花色苷800μg/ml+pc DNA组比较,紫甘薯花色苷800μg/ml+pcDNA-KTN1-AS1组细胞抑制率、凋亡率及p21和Bax蛋白表达降低(P<0.05),KTN1-AS1及cyclin D1和Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05)。结论紫甘薯花色苷可能通过下调KTN1-AS1表达抑制肺癌A549细胞增殖,并促进细胞凋亡。

薯莨提取物通过KTN1反义RNA 1对食管癌细胞生物行为的影响

目的研究薯莨提取物是否影响食管癌细胞的生物学行为。方法自2019年1月至2020年1月,采用(10、20和30 mg/L)浓度的薯莨提取物处理食管癌Eca109细胞,分别记为薯莨-L组、薯莨-M组、薯莨-H组,另以未加薯莨提取物的Eca109细胞作为对照组。细胞计数试剂盒8(CCK-8)测定细胞增殖,克隆形成实验分析细胞克隆能力,蛋白质印迹法检测周期素依赖激酶抑制剂p21(P21)、上皮钙黏素(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白表达,Transwell分析细胞迁移、侵袭,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测长链非编码RNA(lncRNA)KTN1反义RNA 1(KTN1-AS1)表达。在Eca109细胞中转染KTN1-AS1小干扰RNA(si-KTN1-AS1),或转染KTN1-AS1过表达质粒(pcDNA3.1-KTN1-AS1)并使用薯莨提取物处理,观察其对细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果与对照组相比,薯莨-L组、薯莨-M组、薯莨-H组Eca109细胞的抑制率[(1.06±0.21)%比(19.25±1.68)%比(38.57±3.69)%比(62.14±6.06)%]、P21、E-cadherin蛋白水平明显提高,细胞的克隆形成数、迁移细胞数[(142.00±11.59)比(121.00±11.07)比(94.00±9.26)比(73.00±7.15)]、侵袭细胞数[(81.00±8.03)比(67.00±6.21)比(50.00±5.04)比(37.00±3.56)]、MMP-2蛋白表达量、KTN1-AS1表达量显著减少(P<0.05),均呈浓度依赖性。抑制KTN1-AS1明显增加Eca109细胞的抑制率[(1.04±0.17)%比(47.81±4.55)%]、E-cadherin、P21蛋白表达量,显著降低迁移细胞数[(144.00±13.52)比(85.00±8.51)]、侵袭细胞数[(80.00±8.11)比(47.00±4.36)]、克隆形成数和MMP-2蛋白水平(P<0.05)。过表达KTN1-AS1能减弱薯莨提取物对食管癌细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用。结论薯莨提取物通过下调食管癌细胞中KTN1-AS1的表达,发挥抑制细胞增殖、迁移和侵袭的作用。