基于斑马鱼模型研究康达心口服液对阿霉素心脏毒性的预防和作用机制

目的基于斑马鱼模型探究复方中药康达心口服液对阿霉素(doxorubicin,DOX)所致心脏毒性的预防及作用机制。方法将实验对象分为空白对照组、阿霉素造模组、康达心低浓度组、康达心中浓度组和康达心高浓度组。设计阿霉素和康达心浓度梯度,筛选出35μg/mL的阿霉素作为诱导浓度,5.9325×10^(-2)μg/mL、11.875×10^(-2)μg/mL和23.75×10^(-2)μg/mL的康达心分别作为低浓度、中浓度和高浓度治疗浓度。显微镜观察斑马鱼的畸形和心率等情况;TUNEL荧光观察心脏细胞的凋亡情况;Q-PCR和Western blot检测心脏发育相关基因及蛋白(SOX9b、GATA4、NKX2.5)的表达和凋亡相关基因及蛋白(P53、Caspase-9、bcl2、Bax、TNF-α)的表达。结果与空白对照组比较,阿霉素造模组和康达心低浓度组斑马鱼心率显著下降(P<0.05),而康达心中浓度组和高浓度组斑马鱼心率显著升高(P<0.05);荧光染色显示,与空白对照组比较,阿霉素造模组心脏细胞凋亡升高(P<0.05),不同浓度康达心共处理组心脏细胞凋亡显著降低(P<0.05);Q-PCR和Western blot检测显示,与空白对照组比较,阿霉素造模组心脏发育相关基因及蛋白表达、凋亡相关基因表达显著下降(P<0.05);与阿霉素造模组比较,不同浓度康达心处理组使心脏发育相关基因及蛋白表达、凋亡相关基因表达升高(P<0.05)。结论康达心口服液对阿霉素诱导的心脏毒性具有显著的预防作用,对心肌具有保护作用,也为其临床应用提供了科学依据。

康达心口服液对射血分数保留心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响

目的探讨康达心口服液对射血分数保留心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响。方法将30只SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、射血分数保留心力衰竭组(HFpEF组)和心力衰竭干预组(HFpEF+I组)。采用心脏彩超测量各组大鼠舒张早期二尖瓣血流速度与舒张晚期二尖瓣血流速度比值(E/A)、舒张早期二尖瓣血流速度与舒张早期二尖瓣环运动速度比值(E/e′);采用酶联免疫吸附法检测血清N末端B型钠尿肽原(NT-proBNP)水平;测量并计算心脏重量/总重量比值(Hw/W)和左室重量/总重量比值(LVw/W),同时观察各组大鼠心肌纤维化程度。应用Western Blotting检测各组大鼠心脏组织转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白表达水平。结果与sham组比较,HFpEF组和HFpEF+I组大鼠E/A比值均下降,NT-proBNP水平、E/e′升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与HFpEF组比较,HFpEF+I组E/A比值明显升高,NT-proBNP水平、E/e′降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与sham组比较,HFpEF组Hw/W、LVw/W均升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与HFpEF组比较,HFpEF+I组Hw/W、LVw/W降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与sham组比较,HFpEF组和HFpEF+I组大鼠心脏组织TGF-β1蛋白表达均升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与HFpEF组比较,HFpEF+I组大鼠心脏组织TGF-β1蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论康达心口服液可能通过减少心肌组织TGF-β1蛋白表达水平,抑制心肌纤维化,从而改善射血分数保留心力衰竭大鼠心脏舒张功能。

康达心对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞损伤的影响研究

目的探讨康达心对异丙肾上腺素(ISO)诱导的心肌细胞凋亡及内质网应激的影响。方法体外培养H9c2细胞,并将其分为对照组、ISO组和康达心组,采用流式细胞仪、蛋白印记法进行检测,比较各组H9c2细胞凋亡率及半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达水平。结果ISO组H9c2细胞凋亡率为36%,明显高于对照组的18%,差异有统计学意义(P<0.05)。康达心组H9c2细胞凋亡率为25%,明显低于ISO组,差异有统计学意义(P<0.05)。ISO组Caspase-3、Caspase-9及GRP78表达水平明显高于对照组和康达心组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论康达心通过抑制ISO诱导的内质网应激而有效抑制H9c2细胞凋亡,从而达到抑制氧化应激损伤的作用。

康达心口服液对心肾综合征大鼠氧化应激的影响

目的探讨康达心口服液对心肾综合征(CRS)大鼠的影响及潜在机制。方法将60只SD大鼠随机分为5组:假手术(sham)组、心力衰竭(HF)组、CRS组、HF干预(HF+I)组、CRS干预(CRS+I)组,通过心脏彩超测量各组大鼠左室射血分数(LVEF)、左室缩短分数(FS);通过ELISA法检测血清氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、肌酐(Cr)、尿素氮(Bun)、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平。结果HF组、HF+I组、CRS组、CRS+I组大鼠的FS及LVEF值低于sham组,血清NT-proBNP水平高于sham组,差异有统计学意义(P<0.05)。HF+I组的FS及LVEF值高于HF组,NT-proBNP水平低于HF组,差异有统计学意义(P<0.05)。CRS+I组的FS及LVEF值高于CRS组,NT-proBNP水平低于CRS组,差异有统计学意义(P<0.05)。CRS组、CRS+I组大鼠的血清Cr及Bun水平高于sham组,差异有统计学意义(P<0.05)。CRS+I组的血清Cr及Bun水平低于CRS组,差异有统计学意义(P<0.05)。HF组、HF+I组、CRS组、CRS+I组的血清T-AOC、SOD水平低于sham组,MDA水平高于sham组,差异有统计学意义(P<0.05)。HF+I组大鼠的血清T-AOC、SOD水平高于HF组、MDA水平低于HF组,差异有统计学意义(P<0.05)。CRS+I组大鼠的血清TAOC、SOD水平高于CRS组,MDA水平低于CRS组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论康达心改善CRS大鼠心功能的效应,可能是通过提高抗氧化能力、抑制氧化应激实现的。

康达心口服液对缺血性心肌病患者sST2的影响

目的:探讨康达心口服液对缺血性心肌病患者血清人可溶性生长刺激表达基因蛋白2(sST2)水平的影响。方法:收集在福建中医药大学附属人民医院就诊的阳虚水泛型缺血性心肌病患者60例,按随机数字表法分为对照组和观察组各30例,对照组参照《稳定性冠心病诊断与治疗指南2018》和《中国心力衰竭诊断和治疗指南2018》推荐的治疗方案治疗,观察组在对照组基础上加用康达心口服液治疗,两组观察期均为4周,两组治疗前、后分别进行心脏彩超、6分钟步行试验,检测sST2、N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)等指标。结果:两组患者治疗前各观察指标无统计学差异(P均>0.05),用药4周后观察组与对照组比较sST2、NT-proBNP下降,LVEF、6分钟步行试验评级提高,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论:联合使用康达心口服液能在优化治疗基础上进一步降低阳虚水泛型缺血性心肌病患者sST2,起到抑制心肌纤维化作用,治疗效果好。

康达心对冠心病心力衰竭患者外周血干细胞的影响

目的探讨康达心对缺血性心力衰竭患者外周血干细胞(peripheral blood stem cell,PBSC)的影响。方法 131例缺血性心力衰竭患者随机分为对照组和治疗组,对照组采用硝酸酯、血管紧张素转换酶抑制剂、β受体阻滞剂、利尿剂等常规治疗。治疗组在以上常规治疗的基础上加服康达心(10ml/次,3次/天)。两组疗程均为4周,比较两组患者外周血干细胞及心功能差异。结果治疗后两组患者左室射血分数与PBSC均较治疗前升高,NT-proBNP较治疗前下降(P<0.05);两组患者治疗后左室射血分数,NT-proBNP,PBSC存在统计学差异,经4周治疗后治疗组PBSC高于对照组(P<0.05)。结论康达心可促进缺血性心力衰竭患者外周血干细胞的生成,在常规心力衰竭治疗的基础上加用康达心可进一步改善患者的心功能。

康达心口服液治疗慢性心力衰竭阳虚血瘀证的临床研究

目的观察康达心口服液治疗慢性心力衰竭阳虚血瘀证患者临床疗效及对心功能和运动耐量的影响。方法选取80例慢性心力衰竭阳虚血瘀证患者,按随机数字表法分成对照组和观察组,对照组按照指南使用ACEI、β受体阻滞剂、利尿剂等西药常规治疗,观察组在对照组治疗方案的基础上加用康达心口服液治疗。8周后比较两组中医证候积分、治疗前后血清N末端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)、可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)。治疗前后进行心肺运动试验(CPET),比较无氧阈值(AT)、峰值摄氧量(peakVO_(2))的变化。结果观察组与对照组治疗后NT-proBNP、sST2均较治疗前显著下降(P<0.01),观察组比对照组下降显著(P<0.05)。对照组与观察组治疗后AT和peakVO_(2)均较治疗前升高(P<0.05),观察组比对照组升高显著(P<0.05)。在中医证候疗效方面,观察组较对照组改善显著(P<0.05)。结论康达心口服液能进一步改善慢性心力衰竭阳虚血瘀证患者的中医临床证候及其心功能和运动耐量。

康达心口服液质量标准提高研究

目的:改进并提高康达心口服液的质量标准。方法:采用薄层色谱法对康达心口服液中的白术进行定性鉴别,并通过改进展开剂,提升黄芪的鉴别速度;采用高效液相法进行定量检测,色谱柱为Sapphire-C_(18)反相硅胶柱(250mm×4.6mm,5μm),采用梯度洗脱法,流动相为乙腈-甲醇-0.1%磷酸溶液,流速为1mL/min,柱温为30℃,进样量10μL,紫外检测波长设为230nm,同时测定康达心口服液中芍药苷、阿魏酸及丹酚酸B的含量。结果:白术TLC斑点清晰,分离良好;黄芪薄层鉴别操作时间由2.5h缩短至1.5h,且专属性强,斑点明显;测定的各组分在一定范围内呈良好线性关系(r≥0.9951),回收率在99.42%~102.68%之间、RSD在0.40%~1.11%之间,精密度、重复性、稳定性试验的RSD也均符合要求。结论:该方法准确可靠,可行性及重复性好,可为提高康达心口服液的质量评价提供参考依据。

康达心口服液对慢性心力衰竭患者血浆NO及TNF-α含量的影响

目的 探讨慢性心力衰竭(CHF)患者血浆一氧化氮(NO)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量的变化。观察CHF患者血浆NO及TNF-α含量在分别用西药常规治疗和中西医结合治疗前后的变化,以及两种治疗方法的差异。方法 选择76例CHF患者,随机分为两组(每组38例),即西药组和中药组。西药组进行西药常规治疗,中药组在西药常规治疗的基础上加用康达心口服液。记录患者治疗前后的HRV。选择24例健康体检者作为正常对照组。结果 CHF患者血浆NO及TNF-α含量较正常对照组增高(P<0.01);中西医结合治疗后,CHF患者血浆NO及TNF-α含量较治疗前明显降低(P<0.01)。各指标接近正常值(P>0.05)。与常规治疗组比较,血浆NO及TNF-α含量降低明显(P<0.01)。结论 CHF患者血浆NO及TNF-α含量变化可作为判定CHF严重程度的参考指标。康达心口服液可降低CHF患者血浆NO及TNF-α含量。

康达心对心肾综合征大鼠心脏保护效应的机制研究

目的研究康达心对心肾综合征大鼠心功能的影响,并基于ASK1-JNK/p 38通路探讨其保护机制。方法将60只SD大鼠分为假手术组、心力衰竭组(HF组)、心肾综合征组(CRS组)、心力衰竭干预组及心肾综合征干预组。假手术组、心力衰竭组、心肾综合征组给予0. 9%Na Cl灌胃,心力衰竭干预组、心肾综合征干预组分别给予2. 7 m L·kg^(-1)·d^(-1)康达心口服液灌胃。造模或治疗后通过心脏超声测量左心室缩短分数和左心室射血分数;处死大鼠后,计算心脏重量/体重指数(Hw/W)和左心室重量/体重指数指数(LVw/W);通过实时定量聚合酶链式反应(q PCR)和免疫印迹法检测各组大鼠心脏组织中ASK1、JNK及p38的基因和蛋白表达水平;用流式细胞仪检测各组大鼠心肌细胞凋亡率。结果假手术组大鼠左心室缩短分数、左心室射血分数、Hw/W和LVw/W分别为(31. 17±2. 15)%,(61. 08±3. 45)%,(3. 43±0. 31) mg·g^(-1)和(2. 50±0. 27)mg·g^(-1);心力衰竭组以上各指标分别为(24. 42±1. 98)%,(42. 08±4. 57)%,(4. 10±0. 21) mg·g^(-1)和(2. 89±0. 26) mg·g^(-1),心肾综合征组以上各指标分别为(18. 50±2. 84)%,(38. 25±3. 96)%,(4. 84±0. 32) mg·g^(-1)和(3. 89±0. 18)mg·g^(-1),与假手术组相比,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。心力衰竭干预组和心肾综合征干预组大鼠的左心室缩短分数分别为(27. 33±3. 14)%和(22. 67±2. 66)%,左心室射血分数分别为(50. 00±3. 70)%,(43. 83±3. 78)%,LVw/W分别为(2. 60±0. 25)和(3. 63±0. 22) mg·g^(-1),与心力衰竭组和心肾综合征组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。心力衰竭组和心肾综合征组心脏组织中ASK1、JNK、p38 mRNA和蛋白表达与假手术组比较均明显降低(均P <0. 05)。心力衰竭组和心肾综合征组大鼠心肌细胞凋亡率分别为(24. 14±5. 51)%和(35. 60±8. 75)%,均明显高于假手术组(7. 87±3. 13)%,差异均有统计学意义(均P <0. 05);心力衰竭干预组和心肾综合征干预组大鼠心肌细胞凋亡率分别为(14. 12±5. 98)%和(26. 50±7. 22)%,与心力衰竭组和心肾综合征组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论康达心口服液对心肾综合征大鼠具有心脏保护作用,通过降低心脏组织中ASK1,JNK及p38 mRNA及蛋白的表达,抑制ASK1-JNK/p38信号通路,降低心肌细胞凋亡。