基于“亢害承制”理论探讨化瘀软肝胶囊对肝纤维化大鼠细胞自噬的影响

目的基于“亢害承制”理论探讨化瘀软肝胶囊干预肝纤维化模型大鼠细胞自噬的作用机制。方法以SD雄性大鼠为研究对象,采用复合多因素方法(40%CCl_(4)花生油溶液皮下注射+高脂饲料+5%乙醇溶液饮水)复制肝纤维化大鼠模型8周,模型评价成功后依据随机数字表法分为正常组(NC)、模型组(Model)、秋水仙碱组(Col)、化瘀软肝胶囊低、中、高剂量组(HYRG-L、HYRG-M、HYRG-H),药物干预6周后处死,取血浆和肝组织,检测各组大鼠血清中ALT、AST,计算Liver Index水平,ELISA法检测IL-6含量的表达,天狼猩红染色观察肝组织胶原纤维沉积状况,Western Blot与免疫组织化学染色法检测α-SMA、LC3-B、Beclin-1的蛋白表达情况,RT-qPCR观察LC3-B、Beclin-1、α-SMA的基因水平变化。结果与NC组比较,Model组大鼠肝脏组织中央静脉周围大量肝细胞脂肪变性、结缔组织增生、胶原纤维沉积,不同静脉间互相连接,形成纤维桥接,并可见炎性细胞浸润;Model组大鼠血清中ALT、AST及Liver Index水平增高(P<0.05),IL-6水平升高(P<0.05),肝脏组织中LC3-B、Beclin-1、α-SMA的蛋白与mRNA水平上升(P<0.05),与Model组相比较,Col组与化瘀软肝胶囊不同剂量组可不同程度调节ALT、AST及Liver Index水平(P<0.05,P<0.01),降低IL-6细胞因子水平,改善肝纤维化大鼠的纤维化程度,下调LC3-B、Beclin-1、α-SMA的蛋白与mRNA表达水平(P<0.05)。结论中医学“亢害承制”理论指导下化瘀软肝胶囊抗肝纤维化的作用机制与其抑制炎症反应、阻碍HSC的过度增殖与活化、下调细胞自噬等途径有关。