康脑液1号对大鼠脑缺血再灌注细胞凋亡及GFAP表达的影响

目的观察康脑液1号对SD大鼠脑缺血再灌注细胞凋亡及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响,探讨其对脑缺血再灌注保护作用的可能机制。方法采用栓线法复制SD大鼠大脑中动脉梗死模型(MCAO),分别于缺血2h后再灌注1d、3d、7d。将180只大鼠随机分为5组(每组36只):假手术组,模型(缺血再灌注)组,盐酸法舒地尔注射液组,康脑液1号A组,康脑液1号B组。观察康脑液1号对大鼠脑缺血再灌注神经功能、脑梗死面积和病理形态学的影响。采用TUNEL法检测缺血半暗带和灶中心区凋亡细胞,采用免疫组化法检测缺血半暗带和灶中心区GFAP表达的变化。结果模型组与假手术组相比,缺血半暗带凋亡细胞及GFAP阳性细胞数目增多(P<0.05)。康脑液1号可不同程度地降低实验性脑缺血大鼠的神经功能评分、减小梗死灶面积并减轻脑组织病理形态改变(P<0.05);康脑液1号2组大鼠脑组织缺血半暗带凋亡细胞和GFAP表达减少,而梗死灶中心凋亡细胞和GFAP表达却增多。结论康脑液1号可能通过调节脑缺血再灌注细胞凋亡和GFAP表达而促进脑损伤修复及重塑,从而发挥脑保护作用。

康脑液对局灶性脑缺血再灌注大鼠Pi3k mRNA与Akt mRNA的影响

目的观察康脑液对SD大鼠脑缺血再灌注(I/R)损伤的治疗效果并研究其对I/R大鼠Pi3k mRNA及Akt mRNA的影响。方法 180只雄性SD大鼠随机分为6组:假手术组,模型组,康脑液高、中、低剂量组和尼莫地平组。药物治疗组分别给予康脑液24、12、6 g/(kg·d),尼莫地平1 mg/(kg·d),每天灌胃1次,其他组每天给予等量蒸馏水,给药7 d后,除假手术组外,线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉闭塞模型。大鼠缺血2 h,于再灌注24 h后观察各组神经功能,再灌注12、24、48、72、168 h原位杂交技术观察各组脑组织Pi3k mRNA、Akt mRNA表达。结果与模型组相比,康脑液各剂量组神经功能明显改善,Pi3k mRNA及Akt mRNA的表达明显高于模型组,尼莫地平组Pi3k mRNA及Akt mRNA的表达也明显高于模型组,但较康脑液高、中剂量组低。结论康脑液可能通过增加脑缺血再灌注大鼠缺血周围区域Pi3k mRNA及Akt mRNA的表达,从而实现其对脑组织的保护作用。

康脑液1号对大鼠脑缺血再灌注病理学改变及神经细胞凋亡的影响

目的观察康脑液1号对SD大鼠脑缺血再灌注后组织病理学改变及神经细胞凋亡的影响,探讨其对脑缺血再灌注保护作用的可能机制。方法采用栓线法复制SD大鼠大脑中动脉梗死模型(MCAO),分别于缺血2h后再灌注6、24、72h。将150只大鼠随机分为5组,每组30只,假手术组、模型(缺血再灌注)组、盐酸法舒地尔组、康脑液1号A组、康脑液1号B组。观察康脑液1号对大鼠脑缺血再灌注神经功能、脑梗死面积和病理形态学的影响。采用TUNEL凋亡法检测分析脑缺血半暗带和灶中心区凋亡阳性细胞的数目。结果模型组与假手术组比较,凋亡细胞阳性数目增多;康脑液1号可不同程度地降低实验性脑缺血大鼠的神经功能评分、脑梗死面积及减轻脑组织病理形态改变(P<0.05);康脑液1号2组大鼠梗死灶面积减小,脑组织缺血半暗带凋亡细胞阳性数目减少,而梗死灶中心凋亡细胞阳性数目增多;康脑液1号A组与康脑液1号B组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论康脑液1号可能通过调节脑缺血再灌注后神经细胞凋亡而促进脑损伤修复及重塑,从而发挥脑保护作用。

康脑液2号对局灶性脑缺血再灌注大鼠的治疗作用及其机制

目的观察康脑液2号对局灶性脑缺血再灌注(I/R)大鼠的治疗作用。方法 150只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、康脑液2号高、中、低剂量组。线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。大鼠缺血2 h,于再灌注24 h后观察神经功能,再灌注1、3、7,14,21 d,HE染色观察病理变化,免疫组织化学法观察各组大鼠血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素-1(Ang-1)表达,再灌注21 d免疫组织化学法标记CD105检测血管密度。结果与模型组相比,康脑液2号治疗组神经功能及病理改变明显改善,各种促血管生成因子明显多于模型组(P<0.05或P<0.01),脑组织血管显著增多(P<0.05或P<0.01)。结论康脑液2号能治疗脑I/R大鼠,可能促进脑I/R大鼠缺血周围区域血管新生。

康脑液对脑缺血大鼠Fas、Caspase-3蛋白表达的影响

目的观察康脑液对脑缺血再灌注大鼠Fas、Caspase-3蛋白表达的影响,探讨其脑保护作用及机制。方法用线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型,将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组、康脑液高、中、低剂量组,于缺血后2 h再灌注6、12、24、48 h后处死,免疫组化法观察Fas、Caspase-3蛋白的表达。结果与模型组比较,康脑液高、中、低剂量组能下调各时间点损伤侧Fas、Caspase-3蛋白表达。结论康脑液下调Fas、Caspase-3蛋白的表达,可能是其促进脑损伤区神经修复的重要机制之一。

康脑液对大鼠脑缺血再灌注损伤后海马LC3、Beclin 1表达的影响

目的观察康脑液对脑缺血再灌注损伤大鼠海马中LC3、Beclin 1的影响,探讨其保护机制。方法 48只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组、康脑液组[14.30 g/(kg·d)]及依达拉奉组[10.00 mg/(kg·d)],每组12只。康脑液组和依达拉奉组采用灌胃法给药,假手术组及模型组灌胃等体积生理盐水。给药7 d后除假手术组外,其余各组采用线栓法制作大脑中动脉阻断(MCAO)模型,缺血2 h后再灌注24 h。再灌注结束后各组随机抽取6只观察神经功能状态,TTC染色观察脑组织形态并计算梗死百分比。剩余动物采用HE染色观察大鼠脑皮质及海马神经细胞形态,免疫组化染色法检测海马组织中LC3、Beclin 1的表达情况。结果与假手术组比较,模型组神经功能缺损症状明显,脑梗死百分比显著升高,大脑皮质和海马神经细胞变性坏死明显,周围间质出现水肿,海马组织中LC3、Beclin 1的表达显著上调(P<0.05)。与模型组比较,康脑液组及依达拉奉组神经功能缺损症状明显减轻,脑梗死百分比降低,神经元形态改变较轻,海马组织中LC3、Beclin 1表达降低(均P<0.05)。结论康脑液可能通过降低大鼠脑缺血再灌注后海马组织中自噬相关蛋白的表达,从而改善脑缺血再灌注损伤,起到脑保护作用。

康脑液对局灶性脑缺血再灌注大鼠的脑保护作用机制研究

目的观察康脑液对SD大鼠脑缺血再灌注后血管新生和碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(Pi3k/akt)表达的影响。方法雄性SD大鼠随机分为6组:3个剂量康脑液组[24,12,6g·(kg·d)-1]、尼莫地平组[1 mg·(kg·d)-1]、模型组及假手术组。栓线制备大鼠右侧大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。于缺血2 h再灌注12,24,48,72,168 h,用免疫组化法观察b FGF、Pi3k及akt的表达。再灌注72 h用免疫组化法观察血管性血友病因子(v WF)的表达,计算微血管密度(MVD)。结果与模型组相比,康脑液组b FGF、Pi3k及akt表达明显增多,脑组织血管显著增多(P<0.05或P<0.01)。结论康脑液通过增加b FGF、Pi3k/akt的表达从而促进缺血区血管新生及减少缺血区神经功能损害,起到脑保护作用。

康脑液对脑缺血大鼠Fas、FasL蛋白表达的影响

目的观察康脑液对脑缺血再灌注损伤大鼠Fas、FasL蛋白表达的影响。方法线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型,将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组(2.7 mg·kg-1)、康脑液高、中、低(24,12,6 g·kg-1.d-1)剂量组;于缺血后2 h再灌注3,6,12,24,48 h后处死,用免疫组化法观察Fas、FasL蛋白的表达。结果与模型组比较,康脑液高、中、低剂量组均能明显下调Fas、FasL蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。结论康脑液可通过抑制Fas、FasL蛋白的表达,减轻脑缺血后神经功能损伤,从而保护脑组织。