抗纤益心方联合美托洛尔治疗扩张型心肌病的临床疗效

目的观察抗纤益心方联合不同剂量美托洛尔对扩张型心肌病的临床疗效。方法随机将79例扩张型心肌病患者分为对照组(n=24)、低剂量组(n=26)、高剂量组(n=29),对照组口服基础西药(包括美托洛尔),低剂量组口服基础西药+抗纤益心方+低剂量美托洛尔(≤100 mg/d),高剂量组口服基础西药+抗纤益心方+高剂量美托洛尔(>100 mg/d)。3组美托洛尔起始剂量均为12.5 mg,2次/d,每7 d增加12.5 mg,低剂量组美托洛尔增至100 mg/d或静息心率≥55次/min后不再加量,对照组与高剂量组增加至最大可耐受剂量(静息心率≥55次/min)后维持治疗。6个月疗程后比较治疗前后3组中医证候评分、心功能、血压、心率变化情况。结果治疗前后比较,在降低中医证候评分、改善心功能、稳定血压与心率方面,联用抗纤益心方两组明显优于对照组(P<0.05)。6个月疗程后美托洛尔服用剂量由大到小依次为高剂量组>低剂量组>对照组,差异显著(P<0.05)。结论抗纤益心方能增加扩张型心肌病患者对美托洛尔的耐受剂量,有效降低患者的中医证候评分,稳定血压、心率,改善心功能。

软肝抗纤方联合恩替卡韦与维生素D3治疗乙型肝炎肝硬化代偿期患者的临床疗效及对其免疫功能的影响

目的 探讨软肝抗纤方联合恩替卡韦与维生素D3对乙型肝炎肝硬化(Hepatitis B cirrhosis, HBC)代偿期患者的临床疗效及免疫功能的影响。方法 选取2021年1月—2022年1月期间华北石油管理局总医院门诊收治的代偿期HBC患者120例,按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组各60例。对照组予恩替卡韦加维生素D3治疗,观察组在对照组基础上联用软肝抗纤方治疗。治疗24周后,观察比较两组患者临床疗效,治疗前后肝功能指标[天门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase, AST)、丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase, ALT)、白蛋白(Albumin, ALB)和总胆红素(Total bilirubin, TBil)]、肝纤维化指标[层黏连蛋白(Laminin, LN)、透明质酸(Hyaluronic acid, HA)、Ⅲ型前胶原(Type III procollagen, PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Type IV collagen,Ⅳ-C)]、免疫功能指标[CD4^(+)、CD8^(+),并计算CD4^(+)/CD8^(+)],评价中医证候评分与慢性肝脏疾病特异性量表(The chronic liver disease-specific questionnaire, CLDQ)评分。结果 治疗24周后两组患者中医证候评分较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗24周后观察组总有效率96.67%(58/60)高于对照组83.33%(50/60),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗24周后肝功能指标AST、ALT和TBil均较治疗前降低,ALB较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组肝功能指标ALT、AST和TBil低于对照组,ALB高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗24周后,两组患者肝纤维化指标LN、HA、PCⅢ和Ⅳ-C均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗24周后两组患者CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)均较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);CD8^(+)与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗24周后两组患者生活质量CLDQ评分均较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组不良反应率5.00%(3/60)与对照组1.67%(1/60)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 软肝抗纤方联合恩替卡韦与维生素D3治疗HBC可提高临床疗效,调节免疫功能,改善临床症状及肝功能,改善肝纤维化。

软肝抗纤方治疗慢性乙型肝炎的疗效观察

目的 探讨软肝抗纤方治疗慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)的临床效果,并分析对患者肝功能的影响。方法 选取2018年1月—2020年12月期间华北石油管理局总医院门诊收治的172例CHB患者作为观察对象,采用随机数字表法将患者分为2组,对照组86例服用恩替卡韦和复方益肝灵片,观察组86例服用恩替卡韦和中药软肝抗纤方,疗程为3个月。观察并分析用药前与用药后患者的中医症候积分[纳呆、乏力、胁痛、腹胀和便溏]、肝纤维化指标[透明质酸(Hyaluronic acid, HA)、层黏蛋白(Laminin, LN)、IV型胶原(Type IV collagen, C-IV)和肝硬度值(Liver stiffness measurement, LSM)]、氧化应激指标[丙二醛(Malondialdehyde, MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)和晚期蛋白氧化产物(Advanced oxidation protein products, AOPPs)]和肝功能指标[丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase, ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase, AST)、谷氨酰转肽酶(γ-glutamyltranspeptidase, GGT)和总胆红素(Total bilirubin, TBil)]变化情况,比较两组病毒学指标[乙肝病毒脱氧核糖核酸(Hepatitis B virus-deoxyribonucleic acid, HBV-DNA)转阴率、乙肝e抗原(Hepatitis B e antigens, HBeAg)血清学转换率],评估疗效。结果 治疗后两组患者各项中医证候积分均较治疗前下降,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组各项中医证候积分均较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者肝纤维化指标均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组HA、LN、C-IV和LSM指标明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者氧化应激MDA、AOPPs指标均较治疗前明显降低,SOD指标均较治疗前明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组MDA、AOPPs指标明显低于对照组,SOD指标明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者肝功能指标均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者肝功能指标组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后观察组HBV-DNA转阴率和HBeAg血清学转换率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后观察组治疗总有效率为94.19%(81/86)明显高于对照组84.88%(73/86),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 基于抗病毒药物恩替卡韦,辅以软肝抗纤方治疗CHB抗病毒效果显著,疗效突出,能抑制肝纤维化,改善氧化应激和肝功能。

抗纤抑癌方调控HGF/c-Met mRNA干预肝癌前病变的实验研究

目的:观察抗纤抑癌方对肝癌前病变大鼠HGF/c-Met mRNA的影响,探讨抗纤抑癌方防治肝癌前病变的作用机制。方法:75只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、抗纤抑癌组、鳖甲软肝组和秋水仙碱组。以二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌前病变模型,用抗纤抑癌方进行干预,并以复方鳖甲软肝片、秋水仙碱片作为对照,采用免疫组化检测肝组织α-SMA的表达情况,实时荧光定量PCR检测各组大鼠肝脏的HGF和c-Met mRNA的表达量。结果:免疫组化显示,与模型组及秋水仙碱组比较,抗纤抑癌组能明显减少α-SMA表达量,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,HGF mRNA的相对表达量抗纤抑癌组与模型组比较有统计学意义(P<0.05),与秋水仙碱组比较亦有统计学意义(P<0.05),抗纤抑癌方能显著提高肝癌前病变大鼠HGF mRNA的表达水平。c-Met mRNA在DEN造模的各组中均低表达,各组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:抗纤抑癌方能够提高肝癌前病变大鼠HGF mRNA的表达水平,这可能是其防治肝癌前病变的作用机制之一。

抗纤抑癌方对肝癌前病变大鼠Ras/Erk信号通路的调控作用研究

目的观察抗纤抑癌方对肝癌前病变大鼠Ras/Erk信号通路的调控作用,探讨抗纤抑癌方防治肝癌前病变的作用机制。方法雄性Wistar大鼠55只,随机分为正常组10只,模型组、扶正化瘀组及抗纤抑癌组各15只。模型组、扶正化瘀组及抗纤抑癌组均以二乙基亚硝胺(50 mg/kg)腹腔注射诱导肝癌前病变形成,每周1次,持续14周。正常组予生理盐水腹腔注射作为对照。同时,连续给予相应药物灌胃干预,1次/d,在第14周末取材。采用HE和Masson染色以观察大鼠肝癌前病变情况及纤维化程度;采用Western-Blot方法检测大鼠肝脏中Ras、Erk及p-Erk蛋白的表达情况。结果 HE和Masson染色显示模型组肝脏细胞异常增生明显,纤维化程度较重。与模型组比较,抗纤抑癌组和扶正化瘀组肝脏纤维堆积及肝细胞异常增生情况明显减轻,尤其以抗纤抑癌组作用明显。Western-Blot结果显示,p-Erk在模型组中高表达,与正常组比较,两者之间差异有统计学意义(P <0. 05);抗纤抑癌组p-Erk表达低于模型组、扶正化瘀组,分别与之比较,差异均具有统计学意义(P <0. 05);扶正化瘀组与模型组之间比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。Erk表达在各组间差异无统计学意义(P> 0. 05)。Erk磷酸化率(p-Erk/Erk)在模型组中最高,与正常组比较,两者之间差异有统计学意义(P <0. 05);抗纤抑癌组p-Erk/Erk低于模型组、扶正化瘀组,分别与之比较,差异均具有统计学意义(P <0. 05);扶正化瘀组与模型组之间差异比较无统计学意义(P> 0. 05)。Ras表达在各组间比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论抗纤抑癌方具有抗纤维化、阻断肝癌前病变的作用,并能抑制肝癌前病变大鼠Ras/Erk信号通路的激活,这可能是其防治肝癌前病变的作用机制之一。

基于线粒体凋亡通路探讨抗纤益心方对转基因扩张型心肌病小鼠的影响

目的:探讨抗纤益心方对转基因扩张型心肌病小鼠(DCM)的影响及作用机制。方法:将30只cTnT^(R141W)转基因小鼠随机分为模型组、抗纤益心方(20.4 g/kg)组及辅酶Q10(1.5 mg/kg)组,每组10只,选择同期C57BL/6J小鼠10只作为正常对照组。适应性喂养1 w后开始灌胃,正常对照组和模型组灌胃相应体积生理盐水。连续干预8 w后检测小鼠心脏超声相关指标,HE和Masson染色观察心肌组织病理学变化,电镜检查心肌细胞线粒体超微结构,Western Blot检测心肌组织Cyp-D、Cyt-C、Caspase-3蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠心功能显著降低(P<0.01),心肌病理损害严重,线粒体结构紊乱,Cyp-D、Cyt-C、Caspase-3蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,抗纤益心方组和辅酶Q10组心功能显著好转(P<0.05或P<0.01),心肌组织病理损伤明显减轻,心肌细胞线粒体结构较完整,Cyp-D、Cyt-C、Caspase-3蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:抗纤益心方能通过调节线粒体凋亡通路改善DCM小鼠心肌损害,从而发挥治疗作用。

扶正化瘀抗纤方对肝硬化大鼠TGF-β1及PDGF表达的研究

目的:通过观察扶正化瘀抗纤方对肝硬化大鼠TGF-β1及PDGF表达的影响,探讨扶正化瘀抗纤方保肝抗纤的可能机制。方法:本研究中运用随机设计,将40只SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、熊去氧胆酸组和扶正化瘀抗纤方组,每组各10只大鼠。采用复合因素复制肝硬化大鼠模型,造模时给予30%食用酒精为唯一饮料,并结合皮下注射CCl_4(首次剂量给予5 mL/kg,以后每隔3 d皮下注射40%CCl_4油剂3 mL/kg)联合造模,连续给药6周成模。动物成模后模型组给予生理盐水灌胃,熊去氧胆酸组和扶正化瘀抗纤方组分别给予相应药物灌胃。治疗6周后,光镜下观察大鼠肝组织病理变化,运用RT-PCR检测大鼠肝脏组织中TGF-β1及PDGF的表达。结果:与模型组相比,熊去氧胆酸组和扶正化瘀抗纤方组肝纤维化程度明显减轻,TGF-β1和PDGF的表达显著降低(P <0. 05);以扶正化瘀抗纤方组降低最为明显。结论:扶正化瘀抗纤方可明显降低肝硬化大鼠肝组织中TGF-β1和PDGF的表达水平,同时改善大鼠肝损伤及纤维化程度,其机制可能与抑制肝脏组织中致纤细胞因子TGF-β1、PDGF的表达水平有关。

复方991抗纤方对大鼠实验性肝纤维化的影响

目的观察复方991抗纤方对大鼠肝纤维化模型的生化酶学改变。方法对高脂饮食CCl4造模大鼠进行干预,分为模型组、预防组、秋水仙碱组、991治疗组,检测ALT、AST、ALB、GLB、TP、PCⅢ、HA,观察各组对肝纤维化的影响。结果复方991抗纤方可明显降低血清ALT、AST水平,升高白蛋白,降低球蛋白,预防组PCⅢ和HA水平低于其他组,991治疗组明显低于秋水仙碱组。结论复方991抗纤汤有预防和治疗肝纤维化的作用。

抗纤抑癌方介导FN/整合素α5β1干预大鼠肝硬化病变的实验研究

目的:观察抗纤抑癌方对肝硬化大鼠FN/整合素α5β1的影响。方法:将Wistar大鼠46只,随机分为4组,分别为正常组、模型组、复方鳖甲组、抗纤抑癌组,除正常组外,其余各组大鼠均以二乙基亚硝胺腹腔注射,诱导肝硬化病变形成,每周1次,持续12周。同时每天分别以等计量蒸馏水、复方鳖甲片及抗纤抑癌颗粒的水溶剂灌胃给药。在第12周末取材,进行大鼠肝脏HE、Masson染色,FN、整合素α5、β1指标的免疫组化检测。结果:通过对肝脏大体表现、HE及Masson染色发现抗纤抑癌方组大鼠肝硬化病变改善明显优于复方鳖甲组。免疫组化结果显示抗纤抑癌方可显著减少肝硬化大鼠FN的表达(P<0.01),降低整合素α5、β1表达(P<0.05),结论:抗纤抑癌方具有改善大鼠肝脏组织纤维增生,在一定程度上抑制肝硬化病变的形成,其作用机制可能与下调整合素α5、β1表达相关。

抗纤益心方逆转扩张型心肌病心室重构的影响因素

目的:分析影响抗纤益心方逆转扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)心室重构的关键因素。方法:选取已完成的《抗纤益心方治疗扩张型心肌病的队列研究》课题中所纳入的抗纤益心方治疗队列中的患者,其中达到DCM左心室逆重构(left ventricular reverse remodeling,LVRR)标准的患者(LVRR组)30例,按照巢式病例对照研究的方法以及1:4的比例,在同队列中筛选出未发生心室逆重构(no left ventricular reverse remodeling,NLVRR)组(NLVRR组)120例。收集两组患者的入组前一般情况、病程情况、中医证候积分、心脏超声结果、用药情况等信息。采用多因素Logistic回归方法分析抗纤益心方逆转DCM心室重构的影响因素,ROC曲线评价所筛选出的影响因素对LVRR达标的预测价值。结果:多因素Logistic回归分析结果显示,基线收缩压(OR=0.932,95%CI:0.868~1.000,P=0.049)、病程(OR=1.124,95%CI:1.032~1.223,P=0.007)、左室舒张末期内径(left ventricular end diastolic dimension,LVEDD)(OR=3.219,95%CI:1.499~6.913,P=0.003)、β受体阻滞剂目标剂量(OR=0.009,95%CI:0~0.236,P=0.005)是抗纤益心方逆转DCM心室重构的独立影响因素。ROC曲线分析结果显示,LVEDD(AUC=0.958,P<0.001)、病程(AUC=0.828,P<0.001)、β受体阻滞剂目标剂量(AUC=0.667,P=0.005)对抗纤益心方逆转DCM心室重构具有预测价值,其灵敏度分别为82.5%、69.2%、53.3%,特异度分别为100%、83.3%、80%,病程临界值为10.5个月,LVEDD临界值为68.5 mm,收缩压临界值为116 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)。对多因素Logistic回归分析中有意义的4个独立预测因子进行联合预测准确率高于单个因素(AUC=0.988,95%CI:0.973~1.000,P<0.001),灵敏度为99.2%,特异度为90%。结论:基线收缩压、病程、LVEDD以及β受体阻滞剂目标剂量是抗纤益心方逆转DCM心室重构的独立影响因素。

抗纤益心方调节MCP-1/CCR2信号通路对扩张型心肌病大鼠心功能的影响

目的:探讨抗纤益心方调节单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)/趋化因子C-C-基元受体2(C-C-subunit receptor 2,CCR2)信号通路对扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)大鼠心功能的影响。方法:取SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、抗纤益心方(18.8 g·kg^(-1))组、抗纤益心方(18.8 g·kg^(-1))+空载(空载质粒)组、抗纤益心方(18.8 g·kg^(-1))+MCP-1过表达(MCP-1过表达质粒)组,模型组和给药干预组大鼠以腹腔注射阿霉素法诱导建立DCM模型,对照组大鼠于腹腔内注射等剂量生理盐水,以抗纤益心方(每天1次)和质粒(每周2次)分组干预3周后检测各组大鼠心功能指标左室舒张末期内径(left ventricular end diastolic diameter,LVEDD)、左室收缩末期内径(left ventricular end systolic diam⁃eter,LVESD)、左心射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左室短轴缩短率(left ventricular short axis shortening rate,FS)、心脏指数、心肌组织病理形态及纤维化、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β1(TGF-β1)及MCP-1水平、心肌组织胶原[Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(Col-Ⅲ)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]生成及MCP-1/CCR2通路相关蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠心肌组织发生严重损伤,心脏指数、LVEDD、LVESD、胶原容积分数(CVF)、血清TNF-α、TGF-β1及MCP-1水平,心肌组织Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、α-SMA、MCP-1、CCR2蛋白表达显著升高(P<0.05),LVEF、FS显著降低(P<0.05)。与模型组比较,抗纤益心方组大鼠心肌组织损伤减轻,心脏指数、LVEDD、LVESD、CVF、血清TNF-α、TGF-β1及MCP-1水平,心肌组织Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、α-SMA、MCP-1、CCR2蛋白表达降低(P<0.05),LVEF、FS升高(P<0.05);抗纤益心方+空载组大鼠各指标无明显变化(P>0.05)。过表达MCP-1可减弱抗纤益心方对DCM大鼠各指标的影响。结论:抗纤益心方可通过降低MCP-1/CCR2信号通路活性而抑制DCM大鼠炎症,进而减轻大鼠心肌损伤及纤维化,改善其心功能。

罗伟生以“化瘀四法”辨治慢性肝病

肝郁是慢性肝病发病的始动因素,脾胃虚弱是慢性肝病发展的根本原因,气虚血瘀,痰瘀阻络是慢性肝病的重要病理过程。辨治慢性肝病要遵循健脾益气、补气生血、补血活血的法则,同时不忘疏肝利胆、利湿祛痰。故基于“因虚致瘀”理论提出化瘀四法,即补气健脾、活血散瘀法适用于慢性肝病之气虚血瘀证;疏肝行气、祛痰通络法适用于气滞血瘀、痰瘀阻络证;养血活血化瘀法适用于慢性肝病之气血不足、瘀血阻络证;软坚消癥化瘀法主要用于重度肝纤维化、肝硬化结节、肝脾肿大、肝内胆汁淤积、肝癌等慢性肝病患者。临证根据慢性肝病的症状体征及病因病机,随症加减药物,创立八珍荔核抗纤方。

抗纤益心方通过调控线粒体动力学对扩张型心肌病小鼠心肌细胞凋亡的作用机制研究

目的探讨抗纤益心方对扩张型心肌病(DCM)小鼠心肌细胞线粒体动力学及细胞凋亡的影响。方法40只cTnT^(R141W)转基因DCM小鼠按照随机数字表法分为模型组、抗纤益心方低剂量组(2.7 g/kg)、抗纤益心方高剂量组(5.4 g/kg)、卡托普利组(10.1 mg/kg),每组10只。另设10只C57BL/6J小鼠为正常组,各组小鼠分别灌胃8周。小动物超声仪检测小鼠左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、射血分数(EF)、缩短率(FS),HE染色观察心肌病理形态,透射电子显微镜观察心肌线粒体超微结构,TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况,荧光探针检测心肌组织活性氧(ROS)含量,蛋白质印迹法检测心肌线粒体融合蛋白2(MFN2)、视神经萎缩因子1(OPA1)、发动蛋白相关蛋白1(DRP1)、线粒体分裂蛋白1(FIS1),以及B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达。结果与正常组比较,模型组小鼠LVESD和LVEDD升高、FS和EF降低(均P<0.05),心肌损伤明显,线粒体排列紊乱、肿胀伴空泡样变化,细胞凋亡增多,ROS含量增加,线粒体融合蛋白MFN2、OPA1及抗凋亡因子Bcl-2表达降低,线粒体分裂蛋白DRP1、FIS1及凋亡因子Bax、Caspase-3表达增加(均P<0.05)。与模型组比较,抗纤益心方低、高剂量组LVESD和LVEDD降低、FS和EF增加(均P<0.05),心肌损伤减轻,线粒体排列紊乱与肿胀减轻,细胞凋亡减少,ROS含量降低,Bcl-2、MFN2、OPA1蛋白表达增加,Bax、Caspase-3、DRP1、FIS1蛋白表达降低(均P<0.05)。结论抗纤益心方能够抑制DCM小鼠心肌细胞凋亡,改善心脏功能,其作用机制可能与调控线粒体动力学平衡相关。

抗纤益心方通过AMPK/mTOR通路改善扩张型心肌病大鼠心功能的作用机制

目的探讨抗纤益心方通过腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路对扩张型心肌病(DCM)大鼠心肌细胞自噬、心功能的影响及其机制。方法将60只Wistar大鼠随机分为正常组,模型组,抗纤益心方高、低剂量组和卡托普利组,每组各12只。模型组、抗纤益心方组和卡托普利组经呋喃唑酮水溶液诱导扩张型心肌病模型,药物治疗8周。超声心动仪检测各组大鼠心脏左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、缩短分数(FS)、左室射血分数(LVEF)的变化;HE染色观察心肌细胞排列及形态;透射电镜观察线粒体超微结构及自噬;Western blot检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin1、p62与AMPK、mTOR表达及其磷酸化水平。结果与正常组比较,模型组LVESD和LVEDD增加,FS和EF降低;与模型组比较,抗纤益心方高剂量组和卡托普利组LVESD和LVEDD降低,FS和EF增加;模型组心肌细胞线粒体排列紊乱,局部肌丝断裂,线粒体肿胀伴空泡样变化,边界模糊不清,抗纤益心方高剂量治疗后线粒体超微结构的损伤改善;与正常组比较,模型组心肌LC3-II/LC3-I、Beclin1蛋白表达降低、p62表达升高;与模型组比较,抗纤益心方高剂量组和卡托普利组LC3-II/LC3-I、Beclin1蛋白表达增加,p62表达降低;与正常组比较,模型组p-AMPK/AMPK降低,p-mTOR/mTOR升高;与模型组相比,抗纤益心方高剂量组和卡托普利组p-AMPK/AMPK升高,p-mTOR/mTOR降低。结论抗纤益心方通过促进扩张型心肌病大鼠心肌细胞自噬,改善心脏功能,其作用机制可能与调控AMPK/mTOR通路有关。

扶正通络消积三方分期治疗肺纤维化大鼠疗效评价

目的:观察扶正通络消积三方(养清抗纤方、保肺化纤方、金水缓纤方)在肺纤维化大鼠不同时期的疗效。方法:180只SD大鼠分为空白组、模型组、吡啡尼酮组、养清抗纤组、保肺化纤组、金水缓纤组,每组30只(每个时间点10只)。建立肺纤维化大鼠模型,各组大鼠于造模后第1~13天、15~27天、29~41天采用相应的药物灌胃后,分别于第14、28、42天取材。观察大鼠肺功能、肺组织病理、肺组织羟脯氨酸(HYP)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-6、IL-13及血清内转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-SMA等。采用R值综合评价法进行综合评价。结果:养清抗纤方在各个时间点均能减轻炎症,在第14天较为显著,降低IL-6、IL-1β优于吡啡尼酮(P<0.01,P<0.05),保肺化纤方和金水缓纤方在第28、42天改善纤维化程度,其综合评价R值低于吡啡尼酮(P<0.01)。结论:三方可在肺纤维化的不同时期改善大鼠肺功能、减轻炎症、改善纤维化程度,养清抗纤方、保肺化纤方、金水缓纤方分别在早、中、晚期疗效较好。

康氏抗纤方联合干扰素、利巴韦林治疗慢性丙型肝炎33例临床观察

目的观察康氏抗纤方联合聚乙二醇化干扰素α-2a(PEG-IFNα-2a)、利巴韦林对慢性丙型肝炎(CHC)患者抗病毒治疗应答及生活质量的影响。方法选择CHC患者64例,随机分为治疗组33例与对照组31例。对照组给予PEG-IFNα-2a注射液180μg/次,皮下注射,每周1次;利巴韦林0.3 g/次,口服,每天3次。治疗组在对照组基础上口服康氏抗纤方,每日1剂。两组均治疗24周。观察两组患者治疗前后肝组织病理、肝纤维化瞬时弹性测定值、血清丙氨酸氨基转氨酶(ALT)水平、丙肝病毒定量(HCV RNA)及慢性肝病问卷(CLDQ)积分的变化。结果两组患者病毒学应答与生化应答比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后两组肝脏炎症及纤维化程度均较本组治疗前显著改善(P<0.05);治疗组改善肝纤维化程度方面显著优于对照组(P<0.05);治疗组治疗后肝纤维化瞬时弹性测定值改善程度显著优于对照组(P<0.05)。治疗组治疗后CLDQ各项积分与治疗前比较均明显提高(P<0.01),而对照组仅在系统症状、活动能力和情感方面得分明显提高(P<0.05),治疗组治疗后在腹部症状、困乏、情感、焦虑方面积分改善程度明显优于对照组(P<0.01)。结论康氏抗纤方联合PEG-IFNα-2a、利巴韦林治疗CHC在抗病毒治疗应答的同时,具有显著改善肝纤维化的程度及提高患者生活质量的作用。

抗纤益心方对扩张型心肌病心力衰竭大鼠心肌基质金属蛋白酶-1及其抑制剂表达的影响

目的观察抗纤益心方对扩张型心肌病心力衰竭大鼠心肌基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其抑制剂(TIMP-1)表达的影响。方法将100只Wistar雄性大鼠随机分为正常组10只、模型组90只,采用自主饮用呋喃唑酮水溶液建立动物模型。8周后造模成功70只,随机分为模型组、卡托普利组、抗纤益心方高剂量组、抗纤益心方低剂量组、中西药联用组,每组14只,每日分别灌胃生理盐水、卡托普利10.125mg/kg、抗纤益心方18.8g/kg、抗纤益心方4.7g/kg、抗纤益心方高剂量和卡托普利混合溶液,干预8周。每组大鼠随机选取6只进行免疫组化法染色,检测心肌基质MMP-1及TIMP-1的表达。结果与模型组比较,中西药联用组、抗纤益心方高剂量组和卡托普利组均明显下调MMP-1表达(P<0.05),上调TIMP-1表达(P<0.05);抗纤益心方低剂量组能下调MMP-1表达(P<0.05),但TIMP-1表达与模型组差异无统计学意义(P>0.05)。结论抗纤益心方能够下调与心肌纤维化有关的MMP-1的表达,并上调TIMP-1的表达,可能是通过减轻扩张型心肌病心力衰竭大鼠心肌组织纤维化,从而抑制心室重构的作用机制之一。

抗纤益心方对去甲肾上腺素诱导H9c2心肌细胞凋亡及凋亡相关因子表达的影响

目的探讨抗纤益心方对去甲肾上腺素(NE)诱导的H9c2心肌细胞凋亡的影响及可能作用机制。方法采用CCK-8法筛选抗纤益心方最佳给药浓度。大鼠H9c2心肌细胞常规培养,饥饿8 h后细胞进行分组,正常组未做处理,模型组加100μmol/L的NE 100μl,抗纤益心方组加入筛选最佳浓度抗纤益心方溶液2μl+100μmol/L的NE 100μl、卡托普利组加入2×10^-5mol/L卡托普利5μl+100μmol/L的NE 100μl,各组设3个复孔,作用24 h。流式细胞仪检测细胞凋亡率,并检测凋亡相关因子Bax、Bcl-2、Caspase-3 mRNA和蛋白的表达。结果最终筛选以0.25 mg/ml的抗纤益心方为干预浓度进行实验。与正常组比较,模型组细胞凋亡率升高,Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白表达升高,Bcl-2 mRNA和蛋白表达降低(P<0.01)。与模型组比较,抗纤益心方组和卡托普利组细胞凋亡率降低,Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白表达降低,Bcl-2 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01)。结论抗纤益心方可抑制NE诱导的H9c2心肌细胞凋亡,其作用机制可能与调节凋亡相关因子Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达有关。

抗纤抑癌方对肝癌前病变大鼠整合素α5β1/FAK信号通路的影响

目的:基于整合素α5β1/FAK信号通路探讨抗纤抑癌方干预肝癌前病变的作用机制。方法:雄性Wistar大鼠85只,随机分为正常组、模型组、抗纤抑癌低、中、高剂量组及鳖甲软肝组。采用二乙基亚硝胺腹腔注射制备肝癌前病变模型,用抗纤抑癌方进行干预,以复方鳖甲软肝片作为对照;采用HE、Masson染色观察大鼠肝脏组织病理情况,实时荧光定量PCR及Western blot法检测肝组织中ITG-α5、ITG-β1、FN及FAK mRNA及蛋白的表达水平。结果:抗纤抑癌方可明显改善大鼠肝脏组织纤维化程度,降低肝细胞的变性、坏死;与模型组相比,抗纤抑癌中、高剂量组能显著降低ITG-α5、ITG-β1、FN、FAK mRNA的表达及ITG-α5、ITG-β1蛋白的表达(P<0.01,P<0.05);与鳖甲软肝组相比,抗纤抑癌中、高剂量组能显著降低ITG-α5、ITG-β1、FN mRNA的表达及ITG-β1蛋白的表达(P<0.05)。结论:抗纤抑癌方可通过调控整合素α5β1/FAK信号抑制肝癌前病变。

抗纤益心方对扩张型心肌病大鼠血浆血管紧张素Ⅱ和醛固酮的影响

目的:探讨抗纤益心方抑制扩张型心肌病(DCM)大鼠血浆血管紧张素Ⅱ和醛固酮的机制。方法:采用自主饮用呋喃唑酮水溶液(按1 kg水加700 mg呋喃唑酮配置)建立DCM大鼠模型,分为模型组、抗纤益心方高、低剂量组、卡托普利对照组、中西药联用组。每日分别给予生理盐水,抗纤益心方18.8,4.7 g·kg-1,卡托普利10.125 mg·kg-1,抗纤益心方高剂量和卡托普利混合溶液,ig干预8周,用放射免疫法检测血浆血管紧张素Ⅱ和醛固酮含量。结果:模型组大鼠血浆中血管紧张素Ⅱ(159.94±12.03)ng·L-1和醛固酮(1.23±0.09)μg·L-1明显高于正常组(69.47±7.79)ng·L-1和(0.34±0.11)μg·L-1(P<0.05);与模型组比较,所有给药组(抗纤益心方小剂量组除外)血浆中血管紧张素Ⅱ和醛固酮明显下降(P<0.05);抗纤益心方18.8 g·kg-1组与卡托普利10.125 mg·kg-1组相比无显著差异,血管紧张素Ⅱ分别为(85.23±5.18),(87.90±6.02)ng·L-1,醛固酮分别为(0.69±0.06),(0.74±0.42)μg·L-1(P>0.05),与中西药联用组比较有统计学意义(P<0.05),与小剂量组比较有显著差异(P<0.05)。结论:抗纤益心方能够干预扩张型心肌病大鼠左室重构,其作用可能与抑制血浆中血管紧张素Ⅱ及醛固酮的水平有关。