抗纤灵冲剂调控基因与蛋白表达干预肾间质纤维化的机制研究

目的从MMP-9调节COL4α3基因及Ⅳ型胶原蛋白表达的角度,研究抗纤灵冲剂干预肾间质纤维化的机制。方法72只SD大鼠,成功制备单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)模型后,再随机分为模型组、抗纤灵组、氯沙坦组。另24只大鼠,制备假手术模型。药物干预后处死,留取左侧肾组织。应用免疫组化法测定MMP-9、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)蛋白在肾间质的阳性表达;采用PCR Array法,检测肾组织COL4α3基因的表达。结果UUO假手术组大鼠MMP-9表达极微;在模型组大鼠其阳性表达显著增加;与模型组比较,抗纤灵组4个时间点MMP-9的阳性表达均明显增加;氯沙坦组各时间点MMP-9阳性表达均较模型组增加,但无统计学差异。14d、28d时MMP-9阳性表达抗纤灵组显著高于氯沙坦组。各时间点模型组COL4α3基因水平分别较假手术组上调10.37倍、10.27倍及14.34倍。各时间点抗纤灵组COL4α3的基因表达水平,分别较模型组下调1.5倍、1.52倍和1.48倍。假手术组大鼠Col-Ⅳ只有极少量表达;模型组大鼠肾小球基底膜及肾间质表达显著增加,与假手术组相比有统计学意义;与模型组相比较,抗纤灵组及氯沙坦组各时间点阳性表达均显著减少;与氯沙坦组比较,7 d,14 d,28 d时间点Col-Ⅳ蛋白阳性表达,抗纤灵组均显著减低;21d阳性表达也明显低于氯沙坦组。结论抗纤灵冲剂干预肾间质纤维化的可能机制是通过MMP-9下调COL4α3基因及Col-Ⅳ蛋白在肾间质的表达。

抗纤灵冲剂对5/6肾切除大鼠尿微量蛋白干预作用

目的:探讨5/6肾切除大鼠尿微量蛋白的改变以及抗纤灵冲剂干预作用。方法:将40只SD大鼠中30只行5/6肾切除,造模成功后分为正常组、模型组、抗纤灵组、氯沙坦组。药物干预12周后分批处死,留取血液及24小时尿液,检测肾功能(尿素氮、肌酐)以及尿转铁蛋白(TRF)、α1微球蛋白(α1-MG)、β2微球蛋白(β2-MG)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)以及24小时尿蛋白定量。结果:抗纤灵组及氯沙坦组较模型组肌酐、尿素氮有所下降,降低α1-MG、β2-MG、NAG、TRF。结论:抗纤灵冲剂可明显改善5/6肾切除大鼠的肾功能,在降低尿微量蛋白方面与氯沙坦等效,可能是抗纤灵冲剂通过改善肾小球通透性,加强肾小管的重吸收来降低各种蛋白尿。

抗纤灵对慢性肾功能衰竭骨代谢影响的临床研究

目的观察抗纤灵治疗早中期慢性肾功能衰竭(CRF)的临床疗效及其对骨代谢的影响。方法将早中期61例CRF患者随机分为治疗组31例和对照组30例,分别给予抗纤灵冲剂和蒙诺治疗,疗程两个月。观察治疗后各组患者肾功能、钙磷代谢、血甲状旁腺激素(PTH)的变化及临床症状改善情况。结果抗纤灵能降低血肌酐(Scr)、PTH,升高血钙(P<0.05),临床总体疗效优于蒙诺(P<0.05)。结论抗纤灵可改善CRF患者的肾功能及负钙平衡,具有降低早中期慢性肾衰PTH水平的作用。

抗纤灵颗粒剂对尿毒症维持性血液透析患者微炎症状态的影响

目的观察抗纤灵颗粒剂对尿毒症维持性血液透析患者微炎症状态的影响。方法将尿毒症维持性血液透析患者78例随机分为治疗组40例和对照组38例,并设15名健康组进行对照。治疗组和对照组均予对症处理,治疗组在此基础上口服抗纤灵颗粒剂,8周为1个疗程,治疗2个疗程后检测C反应蛋白(CRP)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平及血浆白蛋白(AlB)、前白蛋白(PAB)、血红蛋白(Hb)、转铁蛋白(TF),并计算患者体重指数(BMI)、透析充分性(Kt/V)等指标。结果尿毒症维持性血液透析患者各项指标与健康组比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后治疗组血IL-6、CRP、TNF-α水平有明显下降,与治疗前及对照组治疗后比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗组AlB、PAB、TF、BMI均有提高,与治疗前及对照组治疗后比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论应用抗纤灵颗粒剂可以在一定程度上改善尿毒症维持性血液透析患者的微炎症状态。

抗纤灵冲剂对肾间质纤维化大鼠结缔组织生长因子蛋白表达的影响

目的:从结缔组织生长因子(CTGF)蛋白表达的角度,研究抗纤灵冲剂干预肾间质纤维化的作用机制。方法:将96只SPF级SD大鼠随机分为假手术组24只,造模组72只,造模组大鼠应用UUO法制备肾间质纤维化大鼠模型,造模成功后分为模型组、抗纤灵组、氯沙坦组。药物干预后分批处死,留取尿液、左侧肾组织。应用免疫组化法测定CTGF在肾间质细胞及肾小管基底膜的蛋白表达;用放射免疫法测定尿β2-MG水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠CTGF蛋白表达和尿β2-MG水平显著增加(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,抗纤灵组和氯沙坦组各时间点CTGF蛋白表达显著减少(P<0.05,P<0.01),抗纤灵组各时间点尿β2-MG水平显著降低(P<0.01,P<0.05);氯沙坦组尿β2-MG水平7d时显著降低(P<0.01);抗纤灵组各时间点CTGF蛋白表达显著低于氯沙坦组(P<0.01);抗纤灵组14d及28d时尿β2-MG水平显著低于氯沙坦组(P<0.01)。结论:抗纤灵冲剂通过调控CTGF基因表达,下调CTGF在肾间质细胞及肾小管基底膜的蛋白表达,从而达到改善肾间质纤维化、保护肾小管功能的作用。