MPTP对C57BL/6小鼠脑内kappa受体表达的影响

目的观察MPTP对C57BL/6帕金森病(PD)小鼠脑内kappa受体表达的影响。方法将24只C57BL/6小鼠随机分为生理盐水对照组(NS+NS)、模型组(MPTP+NS),每组12只,模型组颈部皮下注射MPTP(20 mg/kg)8 d,生理盐水对照组只注射等量的生理盐水。免疫细胞化学观察脑内kappa受体的表达,Western印迹法观察kappa受体蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组小鼠脑内kappa受体免疫反应阳性细胞数目明显减少(P<0.05),kappa受体免疫反应阳性细胞的平均灰度明显降低(P<0.05);kappa受体蛋白表达明显减少。结论 kappa受体表达的减少与PD病密切相关。

mu、kappa受体在泻剂结肠大鼠离体肠肌条收缩反应中的作用

目的:探讨mu、kappa阿片受体激动剂和拮抗剂对泻剂结肠大鼠离体肌条收缩反应的作用.方法:以泻剂复制大鼠泻剂结肠模型,采用电刺激离体肌条收缩反应实验,观察mu、kappa阿片受体激动剂和拮抗剂对“泻剂结肠”大鼠离体肌条的收缩反应的影响.结果:与对照组相比,外源性不同浓度的mu、kappa阿片受体激动剂明显抑制电刺激泻剂结肠离体肌条收缩反应,收缩波幅非常明显降低对照组(8.50,6.24,3.35vs11.40mm,P<0.01;8.98,6.89,4.43vs11.40mm,P<0.01).与对照组相比,不同浓度的mu阿片受体拮抗剂显著加强电刺激泻剂结肠离体肌条收缩反应(13.18,15.87,19.46vs11.40mm,P<0.01).kappa阿片受体拮抗剂无明显的作用.结论:mu、kappa阿片受体参与了泻剂结肠的动力学的调节.

Mu、Kappa受体激动剂、拮抗剂对大鼠肠道传输功能的影响

目的 :观察 Mu、 Kappa阿片受体激动剂、拮抗剂对大鼠肠道传输功能的影响。方法 :采用大鼠泻剂结肠模型 ,采用活性炭悬液推进法测定肠道传输功能。结果 :“泻剂结肠”组的肠道炭沫推进距离较对照组显著缩短 (P <0 .0 5 )。不同剂量的 Mu阿片受体激动剂均使肠道炭沫推进距离非常显著的短于对照组 (P <0 .0 1)。随 Mu阿片受体拮抗剂剂量的增加 ,测定的炭沫推进距离显著长于对照组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。 kappa阿片受体激动剂和拮抗剂对“泻剂结肠”大鼠肠道传输功能无明显的作用。结论 :阿片受体激动剂和拮抗剂参与了对“泻剂结肠”肠道传输功能的影响 ,主要是通过 Mu阿片受体 ,Kappa阿片受体无明显的作用。

癫痫敏感大鼠内嗅皮层GABA及Kappa受体免疫反应活性的变化

目的研究癫痫敏感大鼠内嗅皮层(EC)GABA及Kappa受体免疫反应活性的变化。方法用惊厥剂量(10mg／kg．sc)的红藻氨酸(Kainic acid,KA)制备癫痫发作敏感大鼠,用免疫组化方法观察内嗅皮层(EC)GA- BA和Kappa受体免疫反应活性的变化。结果与对照组比较,KA后4周,癫痫敏感动物EC部位GABA免疫反应活性(GABA-IR)及Kappa受体免疫反应活性(Kappa-R-IR)均明显减少(P<0．05)。结论 EC处GABA-IR及Kap- pa-R-IR的长期下调很可能是大鼠癫痫发作敏感性长期增强的重要原因。

大鼠海马内Kappa阿片受体在电针抑制电惊厥中的作用

大鼠海马内微量注射Kappa受体激动剂U-50488H可以抑制电惊厥的发作，并加强电针对电惊厥的抑制作用，而注射该受体的拮抗剂MR2266或强啡肽A1-13抗血清，均使发作加剧，并可消除电针对电惊厥的抑制作用。结果显示：海马内的Kappa受体及强啡肽与电惊厥发作及电针抑制效应密切相关。

共表达人Kappa阿片受体与Gq嵌合体GqG66Di5的稳定细胞株构建与鉴定

Kappa阿片受体(Kappa Opioid Receptor,KOR)是新药研究的重要靶标之一,建立稳定表达相应受体的细胞株是实现快速高效筛选靶向化合物的前提。通过构建人KOR过表达质粒,将其分别与5种不同的Gq嵌合体质粒共转染至CHO-FlpIn细胞,筛选出最佳Gq嵌合体;通过抗生素加压筛选以及单克隆化获得稳转细胞株;采用Western Blot检测KOR表达,并进一步通过FLIPR钙信号对细胞株的药理学功能进行鉴定。基于以上途径,本研究构建了稳定共表达人KOR与Gq嵌合体GqG66Di5的稳定细胞株CHO-OPRK1-Gq。该细胞株高表达KOR,具有对特异性激动剂U-69593(EC50=0.039μmol/L±0.006μmol/L)和抑制剂Naloxone(IC50=0.43μmol/L±0.28μmol/L)响应的药理学功能,实现了基于Gq途径介导信号转导的KOR功能检测。在CHOOPRK1-Gq细胞株的基础上,建立了体外高通量筛选靶向KOR配体的新方法,为研发靶向KOR的药物奠定了基础。

Kappa阿片受体的抗缺血性心脏保护作用——信息机制(英文)

有证据表明 ,心脏细胞产生强腓肽和强腓肽类多肽 ,它们是kappa阿片受体 (κ OR)的激动剂。κ OR是心脏一种优势的阿片受体 ,其激活可改变在体和离体心脏的功能。在正常和病理情况下 ,内源性κ 阿片肽可能通过自分泌或旁分泌的方式调节心脏功能。心肌缺血是导致心脏功能紊乱的一个常见原因 ,主要表现为心肌功能减弱 ,心律失常及心肌梗塞等。心肌缺血时 ,交感神经发放增强 ,从而增加作功负荷及氧消耗量 ;而这又使缺血引发的状况更为恶化。机体抵抗缺血引发心肌损害 /心律失常的保护机制之一是抑制 β 肾上腺素受体 ( β AR)的兴奋。κ OR确实能抑制β AR的激动。这种抑制主要是由于GS蛋白受到抑制 ,也在较小程度上由于信息通路的腺苷酸环化酶的抑制。因为该种酶能通过对百日咳毒素敏感的G蛋白转导β AR的激动。另一保护心肌对抗缺血性损害的机制是预处理。预处理是指预先受到缺血等损伤使心脏对随后更严重的损伤产生较强的耐受能力。这种保护作用可以在预处理后即时产生 ,也可延至预处理后 1- 3天。在采用缺血或其产生的后果之一代谢抑制作为预处理而致的心脏保护中 ,κ OR参与媒介预处理的作用。用κ OR的特异性激动剂U5 0 488H激活κ OR (U5 0 488H药理性预处理 ,UP)可激活蛋白激酶C (PKC) 。

猪Kappa阿片受体基因外显子部分序列单核苷酸多态性分析

应用PCR SSCP的方法对大白猪、长白猪和杜洛克猪的Kappa阿片受体 (Kappaopioidreceptor,简称KOR)基因进行单核苷酸多态性检测和分析 ,研究Kappa阿片受体基因作为候选基因 ,影响母猪行为规癖性状的可能性。根据Kappa阿片受体基因外显子的部分序列设计 3对引物 ,发现F1/R1引物对扩增的片段有多态性。对两种纯合子片段克隆并测序表明 ,mRNA第 10 5处有一C→T的单碱基突变 ,为沉默突变。统计结果发现 ,3种基因型 (AA、AB、BB)在各品种中的分布不一致 ,χ2 独立性检验差异极显著 (P <0 0 1)。将 3种基因型同行为规癖性状进行统计分析 ,结果表明BB基因型与其他两种基因型相比表现较高的静止站立行为 ,同AA和AB型比较差异极显著 (P<0 0 1) ,其他 4种行为性状基因型间差异不显著。因此 。

Kappa阿片受体激动剂salvinorin A调节血管内皮生长因子减轻大鼠前脑缺血后脑水肿的研究

目的探讨kappa阿片受体(KOR)激动剂salvinorin A(SA)对前脑缺血再灌注(I/R)损伤大鼠脑水肿和神经功能的改善作用及机制。方法成年雄性SD大鼠经夹闭颈动脉联合低血压建立前脑I/R损伤模型,并根据不同处理方式分为I/R组、I/R+DMSO组、I/R+SA组和I/R+SA+nor BIN(KOR拮抗剂),另设立假手术组。采用Western blotting和免疫组织化学方法检测各组大鼠脑组织血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达;评估脑水肿情况;I/R后1、2、5 d对各组大鼠神经功能进行评定。结果前脑I/R损伤后,I/R组和I/R+DMSO组脑水含量显著高于假手术组(P<0.05),I/R+SA组脑水含量显著低于I/R组(P<0.05),I/R+SA+nor-BIN组脑水量显著高于I/R+SA组(P<0.05)。脑组织VEGF蛋白表达检测结果显示:I/R+SA组显著高于I/R组(P<0.01),I/R+SA+nor-BIN组显著低于I/R+SA组(P<0.05)。I/R+SA组I/R损伤后1、2、5 d神经运动功能评分均显著高于I/R组、I/R+DMSO组和I/R+SA+nor BIN(P<0.05)。结论 SA可以减轻I/R损伤造成的脑组织水肿并改善神经功能,其机制可能与通过KOR上调VEGF蛋白表达有关。

外周选择性kappa阿片受体激动剂的最新研究进展

综述最新报道的外周选择性kappa阿片受体激动剂的结构类型及其药理作用和临床开发,为该类新药研究提供借鉴和参考。外周kappa阿片受体存在于动物和人的中枢神经以外的不同组织器官中,其激动剂无吗啡样副作用和中枢副作用,是一类高效的镇痛、抗炎药物。

泻剂结肠大鼠结肠中的mu、kappa阿片受体变化

目的:探讨mu、kappa阿片受体在泻剂结肠大鼠结肠中的变化.方法:以泻剂复制大鼠泻剂结肠模型,观察泻剂结肠的mu、kappa阿片受体活性.结果:泻剂结肠的mu阿片受体的最大结合数和解离常数明显高于对照组(207.00±22.9vs82.00±4.23fmol/mg.p,P<0.01;3.30±0.45vs2.40±0.57mmol/L,P<0.05).与对照组相比,泻剂结肠的kappa阿片受体最大结合数明显增高(957.00±102.41vs459.00±52.41fmol/mg.p,P<0.01),解离常数无明显的差异.结论:mu,kappa阿片受体可能参与了泻剂结肠的功能紊乱,mu阿片受体较重要.

慢性吗啡依赖大鼠条件性位置厌恶过程杏仁核中央核Kappa阿片受体表达变化

目的:探讨阿片依赖戒断后厌恶动机形成的生物学基础。方法:采用慢性吗啡腹腔注射注射一日两次(10 mg/kg)后予一次纳洛酮(0.3 mg/kg)催瘾注射(同时与条件性位置训练箱搭配)建立大鼠条件性位置厌恶(CPA)模型。在CPA建立前后,采用免疫组织化学方法检测杏仁核中央核(CeA)内Kappa阿片受体(KOR)表达情况。结果:CPA建立前,吗啡注射+纳洛酮催瘾组(MN组)KOR蛋白表达水平(132.89±10.35)与吗啡对照组(MS组)(109.83±7.30)和纳洛酮组(SN组)(121.00±2.73),差异无统计学意义(P>0.05)。CPA建立后,三组KOR蛋白表达水平比较差异有统计学意义(P<0.01)其中MN组(99.56±7.67)低于MS组(85.43±7.81,P<0.01),高于SN组(118.25±1.71,P<0.01)。结论:1杏仁核中央核内Kappa受体的适应性变化,可能是慢性吗啡依赖大鼠纳洛酮催瘾戒断条件性位置厌恶模型建立的基础。2杏仁核中央核内Kappa受体的表达变化可能引起了慢性吗啡依赖大鼠纳洛酮催瘾戒断条件性位置厌恶模型发生突触可塑性的变化。

蛋脑啡肽对猴免疫缺陷病毒感染CEM×174细胞kappa阿片受体表达的调节作用(英文)

目的：研究蛋脑啡肽对猴免疫缺陷病毒（ＳＩＶ）感染ＣＥＭ×１７４ 细胞ｋａｐｐａ 阿片受体表达的调节作用。方法：用ＳＩＶ 感染ＣＥＭ×１７４ 细胞并加入不同浓度蛋脑啡肽。在２４ ｈ 提取ＲＮＡ，用ＲＴ－ＰＣＲ 方法扩增ｋａｐｐａ 阿片受体ｍ ＲＮＡ 并且进行定量分析。结果：显示ＳＩＶ 能够抑制ＣＥＭ×１７４ 细胞的生长。在１０－ ７ｍ ｏｌ／Ｌ蛋脑啡肽存在下，ＳＩＶ 对细胞的损害减轻。１０－ ７ｍ ｏｌ／Ｌ和１０－ ６ｍ ｏｌ／Ｌ蛋脑啡肽不能改变正常细胞ｋａｐｐａ 阿片受体的表达，但是在ＳＩＶ 感染组的表达显著增高。结论：实验结果提示蛋脑啡肽能够维持正常淋巴细胞的生长。Ｋａｐｐａ

金仓鼠脑内的 kappa 受体

目的：研究〔３Ｈ〕依托啡与金仓鼠脑内ｋａｐｐａ受体结合及其在脑内分布的特性。方法：用受体结合和药物的竞争抑制试验研究〔３Ｈ〕依托啡与金仓鼠脑匀浆中ｋａｐｐａ受体结合。结果：〔３Ｈ〕依托啡与金仓鼠脑匀浆中ｋａｐｐａ受体结合的Ｋｄ值和Ｂｍａｘ值分别为０．５２ｎｍｏｌ·Ｌ－１和３４．０ｐｍｏｌ·ｇ－１蛋白。５μｍｏｌ·Ｌ－１（Ｄ－Ａｌａ２，Ｄ－Ｌｅｕ５）脑啡肽可完全阻断〔３Ｈ〕依托啡与ｋａｐｐａ受体的结合。该结合易被苯吗啡烷类及奥列巴文类药物取代，而不易被强啡肽Ａ（１－１３）取代。金仓鼠脑内ｋａｐｐａ受体存在不同的局部分布，纹状体和中脑的密度较高（Ｋｄ和Ｂｍａｘ值为０．４８±０．０２１ｎｍｏｌ·Ｌ－１和２６．６±２．１ｐｍｏｌ·ｇ－１蛋白；０．４１±０．０１５ｎｍｏｌ·Ｌ－１和２４．９±０．３６ｐｍｏｌ·ｇ－１蛋白），大脑皮层的密度较低（Ｋｄ和Ｂｍａｘ值为０．４２±０．０２ｎｍｏｌ·Ｌ－１和１０．５±０．８５ｐｍｏｌ·ｇ－１蛋白）。结论：金仓鼠脑内有优势的ｋａｐｐａ受体，它不同于经典的ｋａｐｐａ受体，可能属于ｋａｐ－ｐａ２受体。纹状体和中脑的ｋａｐｐａ受体分布密度最高。

共表达人kappa阿片受体与PKAcat-EGFP的CHO稳定细胞株建立及功能鉴定

目的在中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞上建立人kappa阿片受体(human kappa opioid receptor,hKOR)及增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)标记的蛋白激酶A催化亚基(catalytic domain of cAMP-dependent protein kinase A,PKAcat)融合蛋白(PKAcat-EGFP)稳定共表达的细胞模型,为体外高通量筛选作用于hKOR的药物及药物分子机制研究打下基础。方法通过脂质体介导法将潮霉素B抗性的hKOR重组质粒[pcDNA3.1/Hygro(+)-hKOR]转染入已稳定表达PKAcatEGFP的CHO细胞中,随后用含潮霉素B的选择性培养基培养细胞,有限稀释法挑取耐药单克隆,PKA重分布实验筛选阳性克隆,利用Z’因子对建立的细胞模型的可靠性进行评价,利用PKA重分布实验与LANCE cAMP 384 Kit检测受体功能。结果 PKA重分布实验与LANCE cAMP 384 Kit结果表明,CHO-PKAcat-EGFP/hKOR-13号克隆反应性良好,100nmol·L^(-1)的U-50488作用时的Z’平均值为0.596,证明了该细胞模型的可靠性,且经多次传代后的受体表达也能保持稳定。结论成功建立了hKOR与PKAcat-EGFP融合蛋白稳定共表达的细胞模型CHO-PKAcat-EGFP/h KOR-13。

伏隔核Kappa阿片受体对海洛因戒断性抑郁样行为的调控

目的探讨伏隔核(nucleus accumbens,NAc)Kappa阿片受体(Kappa opiod receptor,KOR)在海洛因戒断性抑郁行为(heroin withdrawal depression-like behavior,HW-D)中的作用。方法每天9点给小鼠腹腔注射1 mg/kg海洛因,每日1次,连续注射14 d后戒断3~8周,通过旷场、糖水偏爱及悬尾实验评估其抑郁样行为,根据行为学结果海洛因组小鼠分为海洛因戒断性抑郁易感组及不易感组。参照G.Paxinos小鼠脑立体定位图谱分离双侧NAc脑区,Western blotting检测NAc KOR及强啡肽原(prodynorphin,PDYN)蛋白表达量;于戒断后第4周利用脑立体定位仪向小鼠NAc微量注射KOR拮抗剂nor-BNI进行药物干预,评估其对抑郁行为的影响。结果小鼠持续注射海洛因14 d后,戒断3周、4周及8周,行为结果显示,与生理盐水组及HW-D不易感组相比,HW-D易感组糖水偏爱率下降(P<0.01),悬尾不动时间延长(P<0.05)。戒断4周及8周后,与生理盐水组及HW-D不易感组相比,HW-D易感组伏隔核KOR(P<0.05)与PDYN(P<0.05)蛋白表达量显著升高。nor-BNI干预后,HW-D易感组糖水偏爱率升高(P<0.05),悬尾不动时间缩短(P<0.05)。结论小鼠NAc KOR调控了海洛因长期戒断后的抑郁行为,在NAc给予KOR拮抗剂可以改善这种抑郁样行为。

慢传输性便秘结肠阿片受体的病理生理改变

目的为了更加深入地了解慢传输性便秘的发病机理和病理生理改变。方法应用放射配体结合分析检测了患者结肠mu、Kappa阿片受体含量变化。结果与正常对照组比较,STC患者结肠壁肌层ma、Kappa阿片受体含量增加。结论 STC患者内源性阿片肽活性增加,肠道运动受抑制,提示阿片受体拮抗剂可能是治疗STC的一个新途径。

人角质形成细胞Notch信号通路与转化生长因子β调控受体蛋白的作用

背景:在皮肤中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的调控至关重要,而转化生长因子β似乎是其调控的上游因子,既然Notch信号和转化生长因子β信号通道如此相关,那么Notch是不是也参加了转化生长因子β信号对受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的调控呢?目的:探讨Notch信号通道在人角质形成细胞中对转化生长因子β调控受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的作用的影响。方法:在分别用Jagged-1激活和用Γ-分泌酶抑制剂抑制Notch信号通道后,加入转化生长因子β,同时设立对照组,用Real-timePCR测试人角质形成细胞中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappamRNA表达量。结果与结论:覆盖率为40%的角质形成细胞在加入了转化生长因子β后,受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappamRNA量在各时间点均高于对照组。在用Jagged-1激活Notch通道的角质形成细胞中,单独加入Jagged-1、转化生长因子β及两者都加入时均高于对照组(P<0.05,P<0.01)。在用γ-分泌酶抑制剂抑制Notch通道的角质形成细胞中,只加入转化生长因子β显著高于对照组(P<0.01),只加入γ-分泌酶抑制剂和两者均加入时与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。说明加入转化生长因子β导致角质形成细胞中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa表达增加,而分别对Notch信号进行激活和抑制后发现,受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa信号分别显著增加和显著被抑制。所以在转化生长因子β升高受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa表达过程中Notch信号通道是非常重要且不可或缺的。

脑啡肽类物质与胃肠运动

脑啡肽属内源性阿片样物质,它是一种脑肠肽,分布于中枢神经系统及整个胃肠道。脑啡肽是含5个氨基酸残基的肽,可分为两种类型,其C端为甲硫氨基酸者称为甲啡肽(结构为:H—酪—甘—甘—苯丙—蛋—OH),其C端为亮氨酸者称为亮啡肽(结构为:H—酪—甘—甘—苯丙—亮—OH)。近年来,肽类神经递质作为胃肠道的第三类神经递质成为研究比较活跃的领域。它们在调节胃肠道功能活动中起着重要的作用。脑啡肽类物质的人工合成使该领域的研究取得了很大进展。脑啡肽及其类似物有相似的生理及药理作用,它们作用于中枢及胃肠道阿片受体(包括mu,kappa,delta)调节胃肠道运动功能。

含(1-芳乙酰胺基-2-叔胺基)乙烷结构的六氢-1H-1,4-二氮(艹卓)类化合物的合成与镇痛活性

2－或－5－取代的六氢－1H－1，4－二氮Zhuo类化合物（1－3）经单酰化及酰化反应后，合成了16个带有（1－芳乙酰胺基－2－叔胺基）乙烷结构的六氢－1H，1－4二氮Zhuo类目标化合物（5－9，11－13，15－17，19－23），经元素分析，IR，MS和^1H NMR确证了其组成和结构。对所有目标化合物都进行了豚鼠回肠试验，初步药理试验表明，16个化合物对受试标本显示不同程度的抑制作用，对抑制率较高的两个化合物和5和7测试了IC50值。对在豚鼠肠试验中显示较强激动作用的4个化合物进行了小鼠扭体法镇痛活性试验，测得了其ED50值。