三株假单胞菌低温噬菌体生物学特性比较研究

对分离自东帕米尔高原喀拉库勒湖和云南明永冰川的3株假单胞菌(Pseudomonas)低温噬菌体Muztag BP1、Muztag BP2和MYBP2A-15的生物学特征开展研究。以双层平板法培养噬菌体,观察噬菌斑特征,采用透射电镜观察经磷钨酸负染的噬菌体颗粒形态,比较分析了3株噬菌体的增殖温度、热稳定性、p H稳定性、化学试剂敏感性及一步生长曲线等特性。结果表明,3株噬菌体宿主虽然同属假单胞菌,但形态及生物学特征明显不同。3株噬菌体均属头尾型结构,其中Muztag BP1、MYBP2A-15头部呈正多面体对称,直径约68 nm和74 nm,具收缩尾,长度分别约130 nm、160 nm,初步鉴定为肌尾噬菌体科(Myoviridae);Muztag BP2头部直径约82 nm,尾管细长,约640 nm,归属为长尾噬菌体科(Siphoviridae);3株噬菌体均具热不稳定性,对紫外有一定耐受性;Muztag BP1对氯仿、异丙醇和乙醚极其敏感,推断其核衣壳外含有脂膜包被,Muztag BP2和MYBP2A-15对氯仿、异丙醇和乙醚不敏感,其核衣壳外无脂质成分;一步生长曲线显示3株噬菌体的潜伏期、裂解期和裂解量各异。

新疆喀拉库勒湖区景观空间格局动态变化分析

为了研究喀拉库勒湖区不同景观类型的空间分布情况和时空变化规律,以研究区1990、1999和2010年3期Landsat TM/ETM影像为数据源,利用决策树方法并结合实地调研进行景观分类,运用景观生态学理论和方法对喀拉库勒湖区1990—2010年间的景观格局变化和景观类型空间转化特点进行分析。结果表明,研究时段内,喀拉库勒湖区域在外观特征和空间格局均有显著变化,荒漠和河流面积先减小后扩张,湖泊面积持续扩张,绿洲和冰川面积呈先扩张后减小。整体景观蔓延度和破碎化程度下降;景观优势度和异质性增加,景观变化受自然环境的影响较大。

喀拉库勒湖两株侵染同一宿主黄杆菌低温噬菌体的分离及生物学特性研究

低温噬菌体作为高原湖泊中的主要生物类群,在调控原核菌群结构及C,N等元素循环方面意义重大.从喀拉库勒湖中分离纯化低温噬菌体并对其生物学特性进行研究,采用双层平板法分离纯化低温噬菌体,利用透射电镜观察噬菌体粒子形态;结合16S rDNA序列比对及系统发育分析确定宿主菌分类地位;对噬菌体最佳感染复数、一步生长曲线和吸附速率等基本生物学特性进行比较,分析理化因素对噬菌体的影响;采用PEG沉淀法浓缩噬菌体颗粒;酚-氯仿法提取噬菌体基因组并进行酶切.结果表明:从喀拉库勒湖分离到两株能侵染同一宿主黄杆菌Flavobacterium sp.KHhb03的噬菌体KH-sph01和KH-sph02,其均能在4℃侵染宿主并增殖,从形态上分别归属为长尾噬菌体科(Siphoviridae)和肌尾噬菌体科(Myoviridae).KH-sph01和KH-sph02均对热敏感,在pH值为7~8范围内最稳定,对氯仿、表面活性剂等不敏感,对蛋白酶K敏感;最佳感染复数分别为10和0.1,吸附速率均较强,裂解量分别为3.16个和10.22个,基因组均为dsDNA,初步估算基因组大小分别为60~65 kb和40~45 kb.得出噬菌体KH-sph01和KH-sph02能侵染同一宿主菌Flavobacterium sp.KHhb03,但生物学特性各异.

一株希瓦氏菌低温噬菌体的分离及特征研究

采用双层平板法从新疆东帕米尔高原喀拉库勒湖中分离纯化低温噬菌体,并对其特征进行研究。结果分离得到1株烈性低温噬菌体,命名为KLP17,其宿主菌KLB17经16SrRNA基因序列分析鉴定为Shewanella菌株。KLP17裂解性好,可在双层平板上感染宿主菌KLB17形成直径2-4mm的圆形、透明噬菌斑。电镜下其颗粒形态呈头尾型,头部为正多面体对称,直径约88nm,收缩性尾长约160nm,属肌尾噬菌体科(Myoviridae)。噬菌体KLP17对高温敏感,耐碱不耐酸,对氯仿和异丙醇均不敏感,但对SDS和蛋白酶K十分敏感,推测其衣壳组分为蛋白质而无脂质包被。KLP17最佳感染复数为0.01,感染宿主菌KLB17的潜伏期、裂解期分别为55min和30min,裂解量为27。酶切结果显示其基因组为dsDNA,大小约67~69kb,研究结果不仅为进一步探究微生物适冷机制积累重要素材,而且为深入解析低温噬菌体与宿主菌及环境的互作关系提供数据参考。