夏枯草提取物对间变性大细胞淋巴瘤细胞株Karpas 299生物学特性的影响

目的:研究夏枯草提取物对间变性大细胞淋巴瘤细胞株Karpas 299的影响。方法:体外培养Karpas 299细胞,采用CCK8方法计算各治疗组对Karpas 299细胞增殖的作用,并在显微镜下观察细胞的形态学变化。通过流式细胞学技术,检测各治疗组对细胞凋亡的作用。采用蛋白质印迹法检测各治疗组作用细胞后凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl2关联X蛋白(Bcl2 associated X protein,Bax)的表达变化。结果:夏枯草提取物能够抑制Karpas 299细胞增殖,与药物浓度和作用时间呈正相关,作用48 h的半抑制浓度IC50最低,为(33.2±1.8)mg/L;夏枯草提取物和长春新碱作用Karpas 299细胞后,会促进细胞凋亡;凋亡蛋白Bcl-2表达有所降低、凋亡蛋白Bax表达有所升高。结论:夏枯草提取物可能通过促进细胞凋亡来抑制Karpas 299细胞的增殖,治疗间变性大细胞淋巴瘤。

基于JAK/STAT信号通路探讨夏枯草提取物对间变性大细胞淋巴瘤的作用及机制研究

目的研究夏枯草提取物对间变性大细胞淋巴瘤作用及机制。方法收集2011年到2021年淋巴瘤患者的病历资料,详细筛选并规范化处理,将其录入数据挖掘系统“中医传承辅助平台V2.5”,建立处方数据库,采用频数分析的方法,对处方用药进行研究。体外培养Karpas299细胞,采用CCK8的方法计算不同浓度的夏枯草提取物在不同时间对Karpas299细胞增殖的抑制作用。采用流式细胞技术检测夏枯草提取物对Karpas299细胞凋亡的影响。采用Western blot技术检测夏枯草提取物对Karpas299细胞JAK3、STAT3、Bcl-2、Bax凋亡蛋白表达的影响。通过BALB/c裸鼠构建间变性大细胞淋巴瘤动物模型,观察夏枯草提取物对ALCL的作用效果。结果夏枯草提取物可显著抑制Karpas299细胞的增殖,并且随着药物浓度的增高,抑制作用明显增强,并且随着药物作用时间的延长,抑制作用明显增强,其48小时抑制Karpas299细胞增殖的药物IC50为(33.2±1.8)ug/ml,通过流式细胞仪检测夏枯草提取物作用Karpas299细胞后细胞凋亡的影响,通过Western blot技术检测夏枯草提取物作用Karpas299细胞后,p-JAK3蛋白表达下降、p-STAT3蛋白表达下降、凋亡蛋白Bcl-2表达降低、Bax表达升高。动物实验同时证明,夏枯草提取物可抑制瘤组织的生长,与空白对照组相比,其中夏枯草提取物组、长春新碱组瘤组织体积增大明显减少,P<0.01(P=0.0094,P=0.0091),降低瘤组织p-JAK3蛋白、p-STAT3蛋白和Bcl-2蛋白的表达,促进瘤组织Bax蛋白的表达。结论夏枯草提取物抑制Karpas299细胞增殖可能与抑制JAK3/STAT3进而促进凋亡有关。

间变性大细胞淋巴瘤动物模型的构建与鉴定

目的探索间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)小鼠模型的构建方法。方法选取BALB/c小鼠为研究对象,环磷酰胺抑制小鼠机体免疫功能,用Karpas299细胞在小鼠体内建立ALCL模型。结果 1ALCL模型成功建立,免疫组织化学结果显示,CD30和间变性淋巴瘤激酶(ALK)阳性;2聚合酶链反应(PCR)结果显示,核基因重组激活基因2(RAG2)条带阳性,大小517 bp;3环磷酰胺腹腔注射后,小鼠外周血CD3、CD8、CD19和CD20阳性细胞比例显著降低,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.05);4成瘤组小鼠外周血CD3、CD8、CD19及CD20阳性细胞比例显著低于未成瘤组小鼠(P<0.05)。结论采用环磷酰胺抑制小鼠机体免疫功能,可成功构建BALB/c小鼠ALCL模型;细胞免疫功能低下可能是模型成功建立的原因或机制。