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甲基丙烯化明胶微球缓释Kartogenin修复髓核退变的体外评估
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作者 田鑫 刘滔 +1 位作者 杨惠林 何帆 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第5期724-730,共7页
背景:细胞外基质合成与降解的失衡是髓核退变的主要原因,小分子药物Kartogenin(KGN)可恢复基质合成和降解的平衡。利用合适的载药系统实现KGN的缓释对KGN发挥长期有效的治疗至关重要。目的:用甲基丙烯酰化明胶(gelatin methacryloyl,Gel... 背景:细胞外基质合成与降解的失衡是髓核退变的主要原因,小分子药物Kartogenin(KGN)可恢复基质合成和降解的平衡。利用合适的载药系统实现KGN的缓释对KGN发挥长期有效的治疗至关重要。目的:用甲基丙烯酰化明胶(gelatin methacryloyl,GelMA)包裹KGN,通过微流控技术制备成可注射的水凝胶微球,探究其生物相容性和对髓核细胞生物学功能的影响。方法:将β-环糊精(β-cyclodextrins,β-CD)与KGN混合成包合物,与10%GelMA按1∶9的体积混合,利用微流控技术制备可注射水凝胶微球GelMA@β-CD@KGN,扫描电镜表征微球的微观形貌,检测水凝胶微球浸泡于PBS中1个月的药物释放情况。提取SD大鼠髓核细胞,将第1代细胞分3组培养:对照组单独培养髓核细胞,另外两组分别将GelMA@β-CD微球、GelMA@β-CD@KGN微球与髓核细胞共培养,利用CCK-8法检测细胞增殖,活死细胞染色检测细胞存活。分别用含有白细胞介素1β和不含白细胞介素1β的完全培养基将髓核细胞与两种微球共培养,采用RT-PCR法检测髓核细胞基质合成蛋白和分解蛋白的mRNA表达。结果与结论:①扫描电镜下可见,冻干后的GelMA@β-CD@KGN微球为规则的球形,保持高度分散且大小均一,形状饱满;GelMA@β-CD@KGN微球体外可持续释放药物,至30 d时药物释放量达到总量的62%;②活死细胞染色显示,GelMA@β-CD@KGN可保持髓核细胞的活性;CCK-8检测显示,GelMA@β-CD@KGN可促进髓核细胞的增殖;③在含或不含白细胞介素1β的完全培养基中,GelMA@β-CD@KGN微球组聚集蛋白聚糖、Ⅱ型胶原的mRNA表达均高于GelMA@β-CD微球组(P<0.05,P<0.01),基质金属蛋白酶13、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶5的mRNA表达均低于GelMA@β-CD微球组(P<0.01);④结果表明,GelMA@β-CD@KGN微球具有良好的生物相容性和药物缓释能力,作为载药系统是一种具有广阔应用前景的生物材料。 展开更多
关键词 椎间盘 髓核 微球 甲基丙烯化明胶 微流控 kartogenin 载药系统
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Kartogenin促进肩袖损伤修复小鼠模型腱-骨愈合的作用及机制
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作者 徐天波 刘德国 +2 位作者 张颉鸿 郑宇翔 侯振海 《浙江医学》 CAS 2024年第2期151-155,I0006,共6页
目的构建纤维蛋白-Kartogenin(KGN)释放体系,探索其对肩袖损伤修复小鼠模型腱-骨愈合的作用及机制。方法使用纤维蛋白封闭剂负载KGN,使用高效液相色谱法测定体外释放效率。采用随机数字表法将小鼠分为KGN组和对照组,每组36只。构建肩袖... 目的构建纤维蛋白-Kartogenin(KGN)释放体系,探索其对肩袖损伤修复小鼠模型腱-骨愈合的作用及机制。方法使用纤维蛋白封闭剂负载KGN,使用高效液相色谱法测定体外释放效率。采用随机数字表法将小鼠分为KGN组和对照组,每组36只。构建肩袖损伤修复小鼠模型,每只小鼠均接受单侧冈上肌腱分离和经骨修复,对照组在腱-骨修复部位应用纤维蛋白空载体系,KGN组在腱-骨修复部位应用纤维蛋白-KGN释放体系。采用qRT-PCR检测两组小鼠肩关节中肌腱重塑和成熟相关分子腱调蛋白(TNMD)、血小板衍生生长因子-AA(PDGFAA)、软骨形成基因Y染色体性别决定区盒转录因子9(SOX9)、成骨基因SP7转录因子(SP7)mRNA表达水平;采用免疫组化染色法检测小鼠肩关节TNMD、PDGFAA、SOX9、SP7蛋白表达情况;采用HE染色及阿尔新蓝染色染色观察纤维软骨面积,采用天狼星红染色观察胶原纤维密度。结果纤维蛋白-KGN释放体系中的KGN可释放5 d,释放量随时间递减,以前3天为主,占释放体系中KGN总量的34.29%。与对照组比较,KGN组小鼠肩关节中TNMD、PDGFAA、SOX9、SP7 mRNA相对表达水平均上调(均P<0.01),相应蛋白的表达增加,纤维软骨面积减小,而胶原纤维密度增加。结论KGN可以促进肩袖损伤修复小鼠模型腱-骨愈合,可能是通过促进骨生成和肌腱的重塑与成熟实现的。 展开更多
关键词 kartogenin 肩袖损伤 腱-骨愈合
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小分子药物Kartogenin诱导骨髓间充质干细胞定向分化中基质金属蛋白酶2的表达 被引量:2
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作者 王呈 薄其玉 +1 位作者 戴国锋 杨伟巍 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第50期7475-7480,共6页
背景:体外实验发现小分子药物Kartogenin(KGN)能诱导间充质干细胞转变成为软骨细胞,KGN的发现为人们找到了修复软骨的新途径,未来很有希望成为新型骨关节炎治疗药物。目的:通过体外实验观察小分子药物KGN在骨髓间充质干细胞定向分化为... 背景:体外实验发现小分子药物Kartogenin(KGN)能诱导间充质干细胞转变成为软骨细胞,KGN的发现为人们找到了修复软骨的新途径,未来很有希望成为新型骨关节炎治疗药物。目的:通过体外实验观察小分子药物KGN在骨髓间充质干细胞定向分化为软骨细胞的过程中的诱导作用。方法:体外传代培养人骨髓间充质干细胞至对数生长期,分为空白对照组、1μmol/L KGN组和10μmol/L KGN组,3组KGN的终浓度分别为0,1和10μmol/L,培养72 h后通过显微镜检骨髓间充质干细胞的增生和分化情况,用酶联免疫吸附实验检测上清中软骨代谢降解标记物基质金属蛋白酶2水平,用免疫荧光染色技术观察Ⅱ型胶原蛋白表达情况。结果与结论:镜检发现随着KGN药物浓度的增高能明显促进骨髓间充质干细胞的增生和分化;免疫荧光染色结果显示随着KGN浓度的增高Ⅱ型胶原蛋白的表达增加;而随着KGN药物浓度增加,基质金属蛋白酶2的表达随之降低。提示小分子药物KGN能诱导人骨髓间充质干细胞向软骨细胞定向分化,且随着药物浓度的增加,软骨细胞外基质的破坏也随之被抑制。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓干细胞 骨关节炎 kartogenin(kgn) 基质金属蛋白酶2 Ⅱ型胶原 软骨分化
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小分子药物kartogenin保护终板软骨退变的实验研究 被引量:3
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作者 郑权 徐宏光 +3 位作者 汪景 熊寿良 王弘 张晓玲 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2014年第8期846-850,共5页
目的:研究小分子药物kartogenin(KGN)对终板软骨组织细胞外基质分泌的影响,探讨其在终板软骨以及椎间盘退变中的作用。方法:建立大鼠椎间盘体外器官退变模型,分为对照组、退变组(穿刺注射生理盐水)、KGN处理组(穿刺注射100nmol/L KGN),... 目的:研究小分子药物kartogenin(KGN)对终板软骨组织细胞外基质分泌的影响,探讨其在终板软骨以及椎间盘退变中的作用。方法:建立大鼠椎间盘体外器官退变模型,分为对照组、退变组(穿刺注射生理盐水)、KGN处理组(穿刺注射100nmol/L KGN),利用HE染色观察终板软骨及椎间盘形态,番红-固绿染色观察终板软骨细胞外基质的分泌。通过Real time-PCR评价三组终板软骨组织中Ⅱ型胶原、蛋白多糖、SOX-9的表达变化,Western blot检测Ⅱ型胶原、SOX-9蛋白表达变化。结果:HE染色结果显示与对照组比较,退变组椎间盘髓核消失,终板软骨减少,发生明显退变,KGN处理组椎间盘结构较完整;番红-固绿染色可见实验组较对照组终板软骨细胞外基质分泌增多。Realtime-PCR结果显示退变组终板软骨组织Ⅱ型胶原、蛋白聚糖及SOX-9表达明显下调,KGN处理组中终板软骨组织Ⅱ型胶原、蛋白聚糖及SOX-9表达上调;Western blot结果显示实验组软骨细胞中Ⅱ型胶原、SOX-9蛋白表达明显增高。结论:体外穿刺及培养能够诱导椎间盘及终板软骨的退变,小分子药物KGN能够促进终板软骨细胞外基质的分泌从而保护终板软骨及椎间盘的退变。 展开更多
关键词 椎间盘 终板软骨 退变 kartogenin
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合成聚合物Kartogenin/Pluronic F127胶束与骨髓间充质干细胞的成骨分化 被引量:2
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作者 陈栋 蒋欣 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第34期5473-5477,共5页
背景:小分子药物Kartogenin是Smad4/Smad5通路激活剂,拥有极强的促骨分化能力,可促进骨髓间充质干细胞定向分化为成骨细胞,但其药物效果较为局限。目的:设计并研制Kartogenin/Pluronic F127胶束,观察其对骨髓间充质干细胞定向成骨分化... 背景:小分子药物Kartogenin是Smad4/Smad5通路激活剂,拥有极强的促骨分化能力,可促进骨髓间充质干细胞定向分化为成骨细胞,但其药物效果较为局限。目的:设计并研制Kartogenin/Pluronic F127胶束,观察其对骨髓间充质干细胞定向成骨分化的作用。方法:将小分子药物Kartogenin溶于二甲基亚砜中,然后与Pluronic F127溶液混合均匀,通过真空旋转蒸发仪去除有机溶剂购形成一干燥的药脂膜,加入PBS制备为Kartogenin/Pluronic F127胶束。取对数生长期的大鼠骨髓间充质干细胞,分4组处理,分别加入常规细胞培养液(空白组)、含Pluronic F127胶束溶液的细胞培养液(Pluronic F127组)、含Kartogenin的细胞培养液(药物组)、含Kartogenin/Pluronic F127胶束溶液的细胞培养液(实验组),其中药物组与实验组中药物浓度均为1μmol/L,Pluronic F127组与实验组胶束浓度一致。检测细胞增殖、凋亡及成骨相关蛋白表达。结果与结论:①透射电镜显示Kartogenin/Pluronic F127胶束呈现出不规则的球状形态,粒径分布较为均匀,粒径范围为32.6-118.9 nm,多集中在77.3 nm;②MTT检测显示,随着培养时间的延长,4组细胞存活率下降,但均保持在90%以上,4组间细胞生存率比较差异无显著性意义(P>0.05);③处理24 h后的流式细胞仪检测显示,4组间的细胞凋亡率比较差异无显著性意义(P>0.05);④处理24 h后的Western blot检测显示,药物组、实验组的骨桥蛋白、碱性磷酸酶、骨形态发生蛋白2及基质金属蛋白酶2表达均高于Pluronic F127胶束组、空白组(P<0.05),实验组的碱性磷酸酶、骨形态发生蛋白2及基质金属蛋白酶2表达高于药物组(P<0.05);⑤结果表明,Kartogenin/Pluronic F127胶束可促进骨髓间充干细胞的成骨分化。 展开更多
关键词 材料 胶束 Pluronic F127 kartogenin 干细胞 成骨分化 细胞增殖 蛋白
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kartogenin对骨关节炎的治疗作用机制及其在软骨组织工程学中应用的研究进展 被引量:4
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作者 张诗晨 金丽鸥 +5 位作者 李跃 郑晓雪 王婧 魏欣 王众泽 韩冰 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期519-527,共9页
kartogenin (KGN)是近年来发现的小分子物质,其可通过调节核心结合因子β亚基(CBFβ)-Runt相关转录因子1 (RUNX1)等信号通路促进间充质干细胞(MSCs)增殖和成软骨分化修复软骨缺损,并可与转化生长因子β3 (TGF-β3)产生协同作用。KGN的... kartogenin (KGN)是近年来发现的小分子物质,其可通过调节核心结合因子β亚基(CBFβ)-Runt相关转录因子1 (RUNX1)等信号通路促进间充质干细胞(MSCs)增殖和成软骨分化修复软骨缺损,并可与转化生长因子β3 (TGF-β3)产生协同作用。KGN的成软骨分化作用还与其旁分泌机制有关。除促软骨再生修复外,KGN还可通过保护软骨和软骨细胞,促进人润滑素分泌,保护和改建软骨下骨及缓解疼痛,从而对骨关节炎(OA)产生治疗作用。此外,利用KGN的结构和功能特点,大量软骨组织工程学研究将其以物理或化学方法结合于各类载体以修复软骨缺损和治疗OA。现结合相关文献阐述KGN对OA的治疗作用机制,并从纳米级和微米级聚合物、水凝胶及其他聚合物支架三3方面就软骨组织工程学研究中用以搭载KGN的载体组成、理化特点、释药特点及优势性能等进行综述,旨在为OA的软骨组织工程学治疗提供新思路和新靶点。 展开更多
关键词 kartogenin 骨关节炎 软骨 间充质干细胞 组织工程
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KGN修复软骨、促进腱-骨愈合作用的研究进展 被引量:3
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作者 丁伟 谭洪波 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第16期102-104,共3页
交叉韧带断裂、肩袖损伤等肌腱损伤是常见的运动损伤,腱-骨连接结构愈合是其治疗关键,但其愈合困难是目前临床一大难题。促进腱-骨愈合是修复肌腱损伤、防止再撕裂的关键,但是目前还没有能有效、持续促进肌腱损伤修复术后腱-骨连接结构... 交叉韧带断裂、肩袖损伤等肌腱损伤是常见的运动损伤,腱-骨连接结构愈合是其治疗关键,但其愈合困难是目前临床一大难题。促进腱-骨愈合是修复肌腱损伤、防止再撕裂的关键,但是目前还没有能有效、持续促进肌腱损伤修复术后腱-骨连接结构恢复的方法。应用各种来源的干细胞及细胞因子等生物治疗方法在促进腱-骨愈合方面受到了广泛关注,其中骨髓间充质干细胞(BMSCs)是研究的热点。小分子化合物Kartogenin(KGN)被发现能够显著诱导BMSCs向软骨分化,具有极强的促进软骨形成和腱-骨愈合作用,且与药物释放系统整合后能更好的发挥效能。本文就KGN修复软骨、促进腱-骨愈合方面的研究作一综述,为临床上促进软骨修复、提高腱-骨损伤的治疗效果提供新思路。 展开更多
关键词 kartogenin 腱-骨愈合 骨髓间充质干细胞 软骨修复 肌腱损伤
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Kartogenin与软骨修复的研究进展 被引量:3
8
作者 邵加华 陈松 +2 位作者 谢金硕 许震宇 吴海山 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期471-476,共6页
骨关节炎是一种由多因素引起的退行性病变,以关节软骨退化、关节边缘和软骨下骨反应性增生为特征,而干细胞用于软骨再生有良好的发展前景。目前,一种新的小分子化合物kartogenin(KGN)被发现,它拥有极强的促软骨分化能力,能有效地促进间... 骨关节炎是一种由多因素引起的退行性病变,以关节软骨退化、关节边缘和软骨下骨反应性增生为特征,而干细胞用于软骨再生有良好的发展前景。目前,一种新的小分子化合物kartogenin(KGN)被发现,它拥有极强的促软骨分化能力,能有效地促进间充质干细胞向软骨细胞分化。当KGN可明显抑制白介素1β(interleukin 1β,IL-1β)引起的细胞外基质和蛋白聚糖的减少,同时KGN对于促进软骨细胞分泌物lubricin的分泌与转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)、骨形态发生蛋白7(bone morphogenetic protein 7,BMP-7)具有协同作用,此外,KGN还促进腱-骨连接处形成软骨样组织,并且与壳聚糖结合的KGN较未结合的KGN成软骨能力更强。本文就KGN对于软骨修复的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 骨关节炎 软骨细胞 软骨修复 kartogenin
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采用磁微粒分离酶联免疫法构建基于KGN细胞的雌激素生物合成筛选模型 被引量:2
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作者 鲁丹枫 Azimova Bahtigul Jovliqizi +1 位作者 张国林 王飞 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期27-30,67,共5页
雌激素在机体生长发育中发挥着重要作用,其合成代谢紊乱会导致乳腺癌和骨质疏松等疾病发生。目前,基于细胞的雌激素合成筛选模型需用到放射性底物,对环境污染大,成本较高,限制了具有组织特异性调控雌激素合成的药物筛选。我们以高表达... 雌激素在机体生长发育中发挥着重要作用,其合成代谢紊乱会导致乳腺癌和骨质疏松等疾病发生。目前,基于细胞的雌激素合成筛选模型需用到放射性底物,对环境污染大,成本较高,限制了具有组织特异性调控雌激素合成的药物筛选。我们以高表达芳香化酶的KGN细胞为检测对象,比较基于聚苯乙烯酶联免疫法和磁微粒分离酶联免疫法的雌二醇ELISA试剂盒的交叉反应和灵敏度,发现相对于聚苯乙烯酶联免疫法,磁微粒分离酶联免疫法能够稳定高效的检测雌激素合成。进一步比较培养基中酚红和底物睾酮对雌二醇检测的影响,成功建立通过磁微粒酶联免疫法检测KGN细胞雌二醇合成的筛选模型。 展开更多
关键词 kgn细胞 雌激素 ELISA 筛选
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microRNA-130a抑制KGN细胞FOXL2基因的表达及对细胞增殖的影响
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作者 李亚玲 张伟 +3 位作者 梁惠宇 周陆陆 姚永明 唐胜建 《中国美容医学》 CAS 2016年第1期30-33,共4页
目的:研究外源性microRNA-130a在卵巢颗粒细胞KGN中过表达对FOXL2基因表达的影响,探索microRNA-130a对KGN细胞增殖的影响。方法:人工设计合成靶向FOXL2基因的microRNA-130a模拟物,脂质体法将microRNA-130a模拟物转染入KGN细胞中,Trizol... 目的:研究外源性microRNA-130a在卵巢颗粒细胞KGN中过表达对FOXL2基因表达的影响,探索microRNA-130a对KGN细胞增殖的影响。方法:人工设计合成靶向FOXL2基因的microRNA-130a模拟物,脂质体法将microRNA-130a模拟物转染入KGN细胞中,Trizol法和RIPA蛋白裂解法分别获取高纯度的细胞总RNA和总蛋白,实时荧光定量聚合酶联反应(FQ-PCR)检测microRNA模拟物转染后细胞中FOXL2基因mRNA表达水平,Western Blot检测FOXL2蛋白表达水平,四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测microRNA-130a转染后KGN细胞的增殖情况。结果:成功转染KGN细胞后,阴性对照组FOXL2基因mRNA和蛋白的表达水平与空白对照组相比无明显的差异(P>0.05),mi R-130a转染组能显著抑制FOXL2 mRNA和蛋白的表达,与空白对照组和阴性对照组相比均有统计学差异(P<0.05)。MTT法检测各组KGN细胞的OD值及细胞增值率,microRNA-130a转染后能明显促进KGN细胞的增殖,与与空白对照组和阴性对照组相比均有统计学差异(P<0.05)。结论:外源性的mi R-130a对FOXL2基因mRNA和蛋白表达有明显的抑制作用,且能明显促进KGN细胞的增殖。 展开更多
关键词 miR-130a 转染 kgn细胞 FOXL2 基因表达调控 细胞增殖
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Kartogenin and Its Application in Regenerative Medicine 被引量:2
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作者 Jiang-yu CAI Li ZHANG +1 位作者 Jun CHEN Shi-yi CHEN 《Current Medical Science》 SCIE CAS 2019年第1期16-20,共5页
Regenerative medicine refers to the possibility of replacing aged/daniaged cells with genetically similar young and functional cells to restore or establish normal function.Kartogenin(KGN),a small heterocyclic,drug-li... Regenerative medicine refers to the possibility of replacing aged/daniaged cells with genetically similar young and functional cells to restore or establish normal function.Kartogenin(KGN),a small heterocyclic,drug-like compound was discovered in 2012,which is strongly associated with regenerative medicine.KGN has been applied in many regenerative fields,including cartilage regeneration and protection,tendon-bone healing,wound healing,and limb devclopmcnt.KGN could facilitate cartilage repair,promote fonnation of cartilage-like transition zone in tendon-bone junctions,stimulate collagen synthesis for wound healing,and regulate limb development in a coordinated manner.Considering the related mechanism,filamin A/CBFβ/RUNX1,Ihh,and TGFβ/Smad pathways have been reported to involve KGN.Therefore,KGN is proven a promising agent in regenerative medicine;however,studies conducted on the effect of KGN are limited to date and not convictive for Iong-term use.Further studies are recommended to explore the long-term effect and poteniial molecular mechanisms of KGN.Our investigations may motivate researchers to expand its applications in different forms and fields. 展开更多
关键词 kartogenin REGENERATIVE MEDICINE MECHANISM
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缺氧诱导因子-1α对人卵巢颗粒细胞KGN能量代谢的影响及作用机制研究 被引量:1
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作者 李晓红 龙旭 杨卓 《广西医科大学学报》 CAS 2023年第8期1283-1289,共7页
目的:探究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对人卵巢颗粒细胞KGN能量代谢的影响及作用机制。方法:将KGN细胞随机分为KGN组(细胞不做任何处理),si-NC组(转染阴性对照si-NC)和si-HIF-1a组(转染siRNA si-HIF-1a)。利用实时荧光定量聚合酶链式反应... 目的:探究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对人卵巢颗粒细胞KGN能量代谢的影响及作用机制。方法:将KGN细胞随机分为KGN组(细胞不做任何处理),si-NC组(转染阴性对照si-NC)和si-HIF-1a组(转染siRNA si-HIF-1a)。利用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测HIF-1a、线粒体DNA(mtDNA)及己糖激酶(HK2)的mRNA表达;蛋白质免疫印迹法(western blotting)检测HIF-1α蛋白表达;细胞计数试剂盒(CCK-8)检测各组细胞的增殖活力;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;细胞外通量分析仪测量细胞外酸化率;线粒体超氧化物(MitSOX)荧光染色检测各组细胞内的线粒体活性氧(ROS)含量;5,5’,6,6’-四氯-1,1’,3,3’-四乙基苯并咪唑基碳氰碘化物(JC-1)荧光染色检测各组细胞膜电位;三磷酸腺苷(ATP)检测试剂盒检测各组细胞内ATP含量。结果:低表达HIF-1a可以降低KGN的细胞增殖活力(P<0.01),增加细胞的凋亡率(P<0.01);同时细胞外酸化率显著增加(P<0.01),而糖酵解关键酶HK2表达显著下降(P<0.01);细胞内线粒体中ROS含量显著增加(P<0.01),相对膜电位及ATP含量显著下降(P<0.01)。结论:低表达HIF-1a降低KGN细胞糖酵解能力及上调线粒体ROS含量致线粒体受损,最终影响KGN细胞的生长。 展开更多
关键词 缺氧诱导因子-1Α kgn细胞 能量代谢 增殖 凋亡 糖酵解
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整合KGN的壳聚糖-透明质酸水凝胶用于髓核修复的研究
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作者 罗志强 吴张松 +3 位作者 谭杰 江彦良 何晓欣 朱艳霞 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1427-1434,共8页
可注射水凝胶在退变髓核组织再生修复中有着重要的意义。研究以磷酸甘油(glycerol phosphate, GP)作为交联剂,利用壳聚糖(chitosan,CS)和透明质酸(hyaluronicacid,HA),制备不同体积比的水凝胶(CS:GP:HA,6:3:1,5:3:2,4:3:3,3:3:4,2:3:5,1... 可注射水凝胶在退变髓核组织再生修复中有着重要的意义。研究以磷酸甘油(glycerol phosphate, GP)作为交联剂,利用壳聚糖(chitosan,CS)和透明质酸(hyaluronicacid,HA),制备不同体积比的水凝胶(CS:GP:HA,6:3:1,5:3:2,4:3:3,3:3:4,2:3:5,1:3:6,V:V:V),并整合小分子物质kartogenin(KGN)。检测水凝胶的成胶时间,形态学特征,溶胀度,压缩模量,生物降解度,KGN累积释放量及细胞生物相容性。然后研究KGN,TGF-β及KGN+TGF-β对促进人脂肪干细胞(human adipose-derived stem cells,ADSCs)分化为髓核样细胞的影响。结果表明含高浓度HA的水凝胶成胶时间短,溶胀度高,生物降解及KGN释放速率快;其中体积比为5:3:2(CS:GP:HA)的水凝胶更适于脂肪干细胞增殖和分化;免疫荧光及实时定量PCR显示KGN,TGF-β及KGN+TGF-β诱导Ⅱ型胶原及蛋白聚糖表达量与对照组相比具有显著性差异,但各组间差异无统计学意义。研究成功建立可缓释KGN的可注射CS/HA/KGN水凝胶体系,该体系能促进脂肪干细胞增殖并分化为髓核样细胞,为临床椎间盘髓核退变微创手术后髓核再生修复提供一个简单有效的方法。 展开更多
关键词 壳聚糖 透明质酸 kgn 脂肪干细胞 髓核再生
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Kartogenin对肩袖止点腱骨愈合的干预作用及机制研究 被引量:3
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作者 李庆标 罗惠慈 戴冠东 《心电图杂志(电子版)》 2017年第2期179-182,共4页
目的分析Kartogenin(KGN)促肩袖止点腱骨愈合作用、机制情况。方法选取健康新西兰大白兔60只,所有均建立肩袖损失修复模型,随机将白兔分为4组,术后1组白兔不给予任何植物,2组给予100μmol/L KGN,3组给予500μmol/L KGN,4组给予1 mmol/L ... 目的分析Kartogenin(KGN)促肩袖止点腱骨愈合作用、机制情况。方法选取健康新西兰大白兔60只,所有均建立肩袖损失修复模型,随机将白兔分为4组,术后1组白兔不给予任何植物,2组给予100μmol/L KGN,3组给予500μmol/L KGN,4组给予1 mmol/L KGN,观察4组白兔肩袖腱骨愈合质量,同时选择BMP-7、Smad5、BMP-2、Smad4等靶基因通过组织学染色法,分析KGN促肩袖腱骨愈合的机制。结果 KGN能促CBFβ、Smad5、BMP-7、Smad4表达上升;KGN组BMP-7、Smad5阳性细胞多于对照组;使用KGN的2、3、4组均有不同程度软骨细胞出现。结论 KGN能诱导肩袖止点腱骨中软骨生成,从而起到促愈合作用,同时其作用机制是激活BMP-7基因、介导Smad5来达到治疗目的。 展开更多
关键词 机制 腱骨愈合 kgn 肩袖止点
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Wnt5a激活c-Jun氨基末端激酶(JNK)促进KGN人颗粒细胞增殖和自噬
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作者 马亚博 谢贤国 +3 位作者 原筱潭 刘新峰 徐金瑞 杨易 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期992-997,共6页
目的 探究无翅基因5a(Wnt5a)对KGN人颗粒细胞自噬的作用。方法 采用Wnt5a重组蛋白(rWnt5a)、抑制剂IWP2和BOX5处理KGN人颗粒细胞并设置对照组,Western blot法检测Wnt5a蛋白表达水平,免疫荧光细胞化学染色法观察rWnt5a组和抑制剂IWP2组中... 目的 探究无翅基因5a(Wnt5a)对KGN人颗粒细胞自噬的作用。方法 采用Wnt5a重组蛋白(rWnt5a)、抑制剂IWP2和BOX5处理KGN人颗粒细胞并设置对照组,Western blot法检测Wnt5a蛋白表达水平,免疫荧光细胞化学染色法观察rWnt5a组和抑制剂IWP2组中Wnt5a蛋白和颗粒细胞特异性标志物叉头盒L2(FOXL2)的表达共定位。CCK-8法检测KGN细胞的增殖能力,Western blot法检测rWnt5a及其抑制剂IWP2对KGN细胞自噬的影响以及c-Jun氨基末端激酶(JNK)和活化T细胞核因子1(NFAT1)蛋白的表达变化。结果 与对照组相比,rWnt5a组Wnt5a蛋白水平增加,促进细胞增殖,微管相关蛋白1轻链3(LC3)、 JNK、 NFAT1蛋白表达增加,核孔蛋白62(P62)蛋白表达降低;IWP2组Wnt5a蛋白水平降低,抑制人颗粒细胞增殖,LC3、 JNK和NFAT1蛋白表达降低,P62表达增加。结论 Wnt5a激活JNK促进KGN人颗粒细胞的增殖和自噬。 展开更多
关键词 无翅基因5a(Wnt5a) kgn人颗粒细胞 细胞自噬 细胞增殖
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高效液相色谱法测定大鼠关节腔内Kartogenin的含量
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作者 陈海敏 王则涛 雷丹青 《广西医科大学学报》 CAS 2019年第3期467-470,共4页
目的:采用高效液相色谱法(HPLC)建立检测大鼠关节滑液和关节软骨内Kartogenin(KGN)含量的方法。方法:样品加乙腈去蛋白沉淀后,采用HPLC测定关节滑液和关节软骨内KGN的含量。色谱柱为ZORBAX300SB-C18 column(4.6 mm×250 mm),流动相... 目的:采用高效液相色谱法(HPLC)建立检测大鼠关节滑液和关节软骨内Kartogenin(KGN)含量的方法。方法:样品加乙腈去蛋白沉淀后,采用HPLC测定关节滑液和关节软骨内KGN的含量。色谱柱为ZORBAX300SB-C18 column(4.6 mm×250 mm),流动相A相为0.1%H_3PO_4的超纯水,B相为乙腈,进行梯度洗脱,流速为1 mL/min,检测波长为280 nm,进样体积为10μL;柱温为30℃。结果:KGN浓度在3~200μg/mL范围线性关系良好。低、中、高3种浓度日内、日间RSD值均在2.68%以下;平均加样回收率均在88.67%~95.29%。结论:本方法操作简便,灵敏度高,准确性好,可用于大鼠关节滑液和关节软骨内KGN含量的测定。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 kartogenin 大鼠关节滑液 大鼠关节软骨 药物浓度
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KGN8-12型与KYN28-12型开关柜比较之我见 被引量:2
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作者 周慧东 晁志刚 张炜 《科技信息》 2009年第29期346-347,共2页
KGN8-12型开关柜与KYN28-12型开关柜进行对比,KGN8-12型开关柜有着诸多优点,在未来几年有取代KYN28的趋势,好的固定柜才是未来的发展方向。
关键词 kgn8-12型开关柜 KYN28-12型开关柜 优点 趋势
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京尼平对脂多糖诱导的KGN细胞株炎性反应的影响研究
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作者 田东梅 廖海霞 +3 位作者 王雪娇 李亨利 尹欣 朱明辉 《现代医药卫生》 2021年第6期920-922,926,共4页
目的研究不同质量浓度京尼平对脂多糖诱导的人卵巢颗粒细胞系(KGN细胞株)炎性反应的影响。方法2018年9月,用脂多糖诱导KGN细胞株炎性反应,24h后分别加入不同质量浓度(0、0.05、0.10、0.20、0.30mmol/L)京尼平,设置空白对照组(添加相应... 目的研究不同质量浓度京尼平对脂多糖诱导的人卵巢颗粒细胞系(KGN细胞株)炎性反应的影响。方法2018年9月,用脂多糖诱导KGN细胞株炎性反应,24h后分别加入不同质量浓度(0、0.05、0.10、0.20、0.30mmol/L)京尼平,设置空白对照组(添加相应剂量溶剂二甲基亚砜的DMEM/F12培养基)、脂多糖组和脂多糖+0.05、0.10、0.20、0.30mmol/L京尼平组。采用CCK-8法检测KGN细胞株的活性;采用酶联免疫吸附试验检测各组上清液中雌激素水平,以及白细胞介素-4(IL-4)、IL-5、IL-1β、IL-6的表达;蛋白质印迹法检测各组17α羟化酶(CYP17A1)、芳香化酶(CYP19A1)、线粒体解偶联蛋白2(UCP2)、核因子κB(NF-κB)蛋白表达。结果与空白对照组比较,高质量浓度(≥0.10mmol/L)京尼平对KGN细胞株生长具有明显抑制作用,差异均有统计学意义(P<0.05);低质量浓度(≤0.05mmol/L)京尼平对KGN细胞株生长无明显影响,与空白对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。脂多糖诱导的KGN细胞株IL-4、IL-5、IL-1β、IL-6表达,以及UCP2、NF-κB蛋白表达均明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05);脂多糖诱导的KGN细胞株用高质量浓度京尼平干预后IL-4、IL-5、IL-1β、IL-6表达,以及NF-κB蛋白表达均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);UCP2、CYP17A1、CYP19A1蛋白表达变化均不明显,差异均无统计学意义(P>0.05);各组雌激素水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论脂多糖能诱导KGN细胞株发生明显的炎性反应,京尼平对炎性反应具有明显的抑制作用,并伴随NF-κB蛋白表达的下降而更明显。而京尼平在炎性状态下可能不影响雌激素的分泌。 展开更多
关键词 脂多糖类 白细胞介素类 kgn细胞株 解偶联蛋白2 核因子-κB 京尼平
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Kartogenin诱导兔关节液来源间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究
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作者 许顺 惠明 欧阳建安 《大医生》 2023年第8期120-123,共4页
目的探究兔关节液来源间充质干细胞在Kartogenin(KGN)的诱导下向软骨细胞分化的效果。方法选择100只符合研究要求的新西兰大白兔,随机分为低浓度组(KGN浓度为1µmol/L)、中浓度组(KGN浓度为5µmol/L)、高浓度组(KGN浓度为10... 目的探究兔关节液来源间充质干细胞在Kartogenin(KGN)的诱导下向软骨细胞分化的效果。方法选择100只符合研究要求的新西兰大白兔,随机分为低浓度组(KGN浓度为1µmol/L)、中浓度组(KGN浓度为5µmol/L)、高浓度组(KGN浓度为10µmol/L)及对照组(KGN浓度为0µmol/L)。对比分析各组Ⅱ型胶原蛋白染色阳性面积占比、成软骨分化标志基因的表达水平和成软骨细胞数量。结果中浓度组Ⅱ型胶原蛋白染色阳性面积占比均显著高于低浓度组、高浓度组和对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。中浓度组COL2A1、SOX9和ACAN的表达水平均显著高于低浓度组、高浓度组和对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。中浓度组成软骨细胞数量均显著高于低浓度组、高浓度组和对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论KGN能诱导关节液来源间充质干细胞向软骨细胞分化,其中浓度为5µmol/L的作用最明显。 展开更多
关键词 kartogenin 关节液 间充质干细胞 软骨细胞
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KGN8开关柜
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作者 唐嘉隆 夏阜 《电器工业》 2005年第5期48-48,共1页
KGN8—12(Z)户内铠装固定式交流金属封闭开关设备(以下简称KGN8开关柜).是上海森隆源电气有限公司自主开发研制的小型化中压开关柜。
关键词 kgn8 开关柜 小型化 户内铠装固定式交流金属封闭开关设备 上海森隆源电气有限公司
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