超声内镜检查术联合血清丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal 1型和分泌型磷蛋白1对食管癌的早期诊断价值

目的探讨超声内镜检查术(EUS)联合血清丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal 1型(SPINK1)和分泌型磷蛋白1(SPP1)早期诊断食管癌的临床价值。方法选取2021年6月-2023年5月于该院就诊的276例患者作为研究对象。经手术病理诊断为食管癌92例,作为食管癌组,同期收治且经组织活检判定为食管良性病变89例,作为良性病变组,同期在该院体检且身体健康的95例正常人,作为健康对照组。以病理结果为金标准,验证EUS诊断食管癌的准确率;比较3组患者血清SPINK1和SPP1表达情况;探讨食管癌患者血清SPINK1和SPP1表达与病理特征的关系;采用受试者操作特征曲线(ROC curve)分析EUS联合血清SPINK1和SPP1水平检测对食管癌的早期诊断效能。结果EUS结果显示,81例被诊断为食管癌,79例被诊断为良性病变,11例漏诊,10例误诊,准确率为88.40%(160/181);与健康对照组和良性病变组比较,食管癌组血清SPINK1和SPP1表达水平明显升高,良性病变组血清SPINK1和SPP1表达水平明显高于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);血清SPINK1表达与患者肿瘤直径>2 cm、淋巴结转移、淋巴结阳性和组织分级为Ⅲ级有关(P<0.05),血清SPP1表达水平与肿瘤直径>2 cm、淋巴结转移、淋巴结阳性和雌激素受体阳性有关(P<0.05);ROC curve显示,EUS、血清SPINK1、SPP1水平单独检测和三者联合检测,早期诊断食管癌的曲线下面积(AUC)分别为0.862,0.834,0.782和0.926,三者联合早期诊断食管癌的临床效能明显优于EUS、血清SPINK1和SPP1单独检测(Z=2.30、Z=3.70、Z=4.23,P=0.022、P=0.000、P=0.000)。结论食管癌患者血清SPINK1和SPP1表达均异常上调,EUS联合血清SPINK1和SPP1表达水平联合检测用于早期诊断食管癌,具有较高的临床应用价值。

长岛型掌跖角化病一家系丝氨酸蛋白酶抑制剂B7基因的突变分析

目的:对一家系长岛型掌跖角化病(NPPK)丝氨酸蛋白酶抑制剂B7(SERPINB7)基因突变进行分析。方法:采用聚合酶链式反应扩增SERPINB7基因所有的外显子及其邻近的剪切点并进行直接测序。结果:一家系成员5人,患者1人。先证者,男,23岁,先证者及其母亲均检测到SERPINB7纯合突变c.796C>T(p.Arg266Ter),该突变导致SERPINB7基因编码的蛋白第266位氨基酸由精氨酸变为终止密码。先证者父亲、两位弟弟及100例正常对照中均未检测到SERPINB7基因突变。结论:SERPINB7 c.796C>T(p.Arg266Ter)基因纯合突变可能是该例NPPK患者的致病原因。

丝氨酸蛋白酶抑制因子Kazal 1型在人肺腺癌组织表达上调并促进肺腺癌细胞的增殖

目的探讨肺腺癌组织丝氨酸蛋白酶抑制因子Kazal 1型(SPINK1)表达与生存时间的关系及其对肺腺癌细胞生长的影响。方法用Real-time PCR法、免疫组织化学法检测285例肺腺癌组织和癌旁组织SPINK1的表达,并分析其表达水平与临床病理特征及预后的关系。利用SPINK1慢病毒表达载体及小干扰RNA(si RNA),处理人肺腺癌细胞系,光学显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)表达情况,ELISA或Real-time PCR检测SPINK1表达水平,细胞计数和集落形成法检测肺腺癌细胞生长情况。结果肺腺癌组织SPINK1 mRNA和蛋白表达均上调(均P<0. 0001),SPINK1高表达组患者总生存时间短于低表达组(50. 0个月vs 64. 5个月,P<0. 001)。SPINK1过表达组,肺腺癌细胞上清液SPINK1蛋白高表达(P <0. 05),增殖与克隆形成能力均上调(P <0. 05);SPINK1敲减组,肺腺癌细胞SPINK1 mRNA表达下调,增殖能力下调(P<0. 05)。结论肺腺癌组织SPINK1高表达提示患者预后不良; SPINK1促进人肺腺癌细胞的增殖。

人Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子抗肿瘤作用研究进展

围绕人Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子的结构、主要成员及其抗肿瘤作用做一综述。Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子在机体内发挥重要的生理作用,具有广泛的研究和应用价值。它们在各种肿瘤中有着或高或低的表达,与肿瘤发生、发展相关,可能成为肿瘤治疗的新标靶。

丙型肝炎病毒和丝氨酸蛋白酶抑制因子Kazal1型的关系研究

目的探讨丙型肝炎病毒(hepatitis Cvirus,HCV)对丝氨酸蛋白酶抑制因子Kazal1型(SPINK1)表达的影响及其临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot印迹法检测JFH-1株HCV病毒感染的Huh7.5.1细胞及其对照细胞中SPINK1mRNA和蛋白的表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清及丙肝患者血清中SPINK1的含量,分析健康对照者及丙肝患者SPINK1血清含量的差异。结果HCV感染的Huh7.5.1细胞中SPINK1mRNA和蛋白的表达水平较对照细胞高;SPINK1血清含量在丙肝患者明显高于健康体检者(P=0.016)。结论HCV能够上调SPINK1的表达。

SPINK7对IL-22介导的角质细胞异常增殖及炎症应答的影响

目的:探讨SPINK7对IL-22刺激后角质形成细胞HaCaT的过度增殖及炎症应答的影响及其可能的机制。方法:采用IL-22刺激体外培养的HaCaT细胞。采用RT-PCR检测SPINK7和细胞炎症因子的mRNA表达;Western blot检测SPINK7,cyclin D1、survivin和Wnt/β-catenin通路相关蛋白的表达;MTT法检测细胞增殖能力的变化;ELISA法检测上清液中IL-23、TNF-α和IL-17A的表达水平。结果:IL-22处理的HaCaT细胞中,SPINK7的mRNA和蛋白表达量均显著升高。此外,沉默SPINK7明显抑制IL-22诱导的细胞增殖,同时抑制凋亡相关蛋白cyclin D1及survivin的表达水平。SPINK7沉默显著降低IL-22刺激诱导的促炎性细胞因子IL-23、TNF-α和IL-17A的mRNA表达水平和分泌量。机制研究发现SPINK7沉默能够抑制IL-22激活的Wnt/β-catenin信号通路。结论:沉默SPINK7能够抑制IL-22诱导的细胞增殖和炎症应答反应,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关,这为银屑病的诊断提供了新的标志物和治疗靶点。

全外显子组测序鉴定一家系长岛型掌跖角化症SERPINB7基因突变分析

目的对一例临床诊断遗传性掌跖角化症患者进行全外显子组测序分析致病基因。方法收集一例临床诊断遗传性掌跖角化症的临床资料,采集患者及家系成员样本提取外周血DNA,通过全外显子组测序结果筛选致病变异,进一步用Sanger测序进行家系验证。结果一家系成员3人,患者1人,女,17岁,表现为掌跖角化症17年。患者检测到SERPINB7纯合突变c.796C>T(p.Arg266Ter)位点,该突变导致SERPINB7基因编码的蛋白第266位氨基酸由精氨酸变为终止密码。先证者父亲和母亲均检测到SERPINB7杂合突变c.796C>T(p.Arg266Ter)位点。该例患者诊断为长岛型掌跖角化症(Nagashima-type palmoplantar keratosis,NPPK)。结论NPPK患者符合常染色体隐性遗传模式,SERPINB7 c.796C>T(p.Arg266Ter)基因纯合突变是导致该例NPPK患者的临床表型。

动态增强MRI联合血清SPINK1水平诊断原发性肝癌价值研究

目的探讨动态增强磁共振(MRI)联合血清丝氨酸蛋白酶抑制剂因子Kazal 1型(SPTINK1)水平诊断原发性肝癌(PLC)的价值。方法2020年4月~2023年4月我院收治的乙型肝炎肝硬化患者204例,均接受动态增强MRI扫描检查,对肝内占位性病变者行细针穿刺病理学检查。采用ELISA法检测血清SPTINK1和甲胎蛋白水平。应用二元多因素Logistic回归分析诊断HCC的血清指标,应用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清指标的诊断效能。结果在204例乙型肝炎肝硬化患者中,发现肝内占位性病变并经穿刺病理学检查诊断肝细胞癌(HCC)30例(14.7%);HCC组血清SPTINK1和AFP水平分别为(23.9±5.2)ng/mL和(426.5±67.0)ng/mL,显著高于肝硬化组【分别为(7.4±2.1)ng/mL和(14.4±4.3)ng/mL,P<0.05】;血清SPTINK1(OR:3.69,95%CI:1.08~12.49)和甲胎蛋白(AFP,OR:3.54,95%CI:1.04~11.98)均与HCC高度相关;以血清AFP水平大于等于360.1 ng/mL为截断点,其诊断HCC的AUC为0.80(95%CI:0.72~0.89),灵敏度和特异度分别为71%和73%,以血清SPTINK1水平等于或大于15.6 ng/mL为截断点,其诊断HCC的AUC为0.82(95%CI:0.74~0.91),灵敏度和特异度分别为82%和79%。结论在肝硬化患者,经影像学检查发现肝内占位性病变时,血清SPINK1和AFP水平升高可以帮助初步判断病变性质,应尽早进行穿刺病理学检查。

运用SPINK5突变分析对致死型Netherton综合征的产前诊断

Netherton综合征(NS)是一种严重的常染色体隐性遗传角化病。它包括临床三联征:先天性干皮病,内折性脆发症(TI)及异位表现(如异位皮炎,高热,血管性水肿,荨麻疹,血清IgE升高及嗜红细胞增多症)。由于致命并发症如高钠性脱水,支气管肺炎及脓毒血症的出现使该病死亡率极高,因而预后极差且至今无特效治疗。最新发现。

SPINK1在结直肠癌中的表达及其与预后的关系

目的探讨丝氨酸蛋白酶抑制剂KazalⅠ型(SPINK1)与表皮生长因子受体(EGFR)在结直肠癌中的表达及其与预后的关系。方法采用免疫组化法检测SPINK1、EGFR蛋白在结直肠腺瘤和结直肠癌患者中的表达情况,并分析二者的表达与临床病理特征及预后之间的关系。结果在结直肠癌中,SPINK1蛋白表达阳性率为78.18%(43/55),高于结直肠腺瘤20.93%(9/43,P<0.05)和正常对照组2.50%(1/40,P<0.05)。结直肠癌中EGFR蛋白表达阳性率为89.09%(49/55),高于结直肠腺瘤18.60%(8/43,P<0.05)和正常对照组7.50%(3/40,P<0.05)。结直肠癌SPINK1蛋白与性别、肿瘤大小、淋巴结有无转移、远处转移和肿瘤分期有关(P<0.05),EGFR蛋白与有无远处转移和肿瘤分期有关。Pearson相关分析显示SPINK1和EGFR在结直肠癌中表达呈正相关(r=0.496,P<0.05)。Kaplan-Meie分析显示SPINKl阳性表达的病例相对于阴性者具有较短的生存期或疾病进展期(P<0.05)。结论 SPINK1蛋白可能通过EGFR信号通路在肿瘤增殖与恶性转化发挥了重要作用。SPINK1可以作为判断结直肠癌预后的指标。

川陈皮素对糖尿病肾病大鼠的作用研究

目的构建糖尿病肾病大鼠模型,从整体水平观察川陈皮素对其的治疗作用,并从分子水平研究川陈皮素对丝氨酸蛋白酶家族B成员7(serpin family B member 7,Megsin)、血小板衍生生长因子-BB(platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB)、细胞外信号调节蛋白激酶1/2(extracellular signal-regulated protein kinase,ERK1/2)和Ⅳ型胶原(collagen IV)蛋白及mRNA表达的影响。方法清洁级雄性SD大鼠120只分为正常组、糖尿病肾病模型组、贝那普利组、川陈皮素低、中和高剂量组,高脂高糖饮食1月+一次性腹腔注射链尿佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导糖尿病肾病大鼠模型,相应药物治疗6周后处死,收集尿液、血液和肾脏,检测血糖、血清和尿液中肌酐和β2-MG、小鼠肾重与体重比(KW/BW),同时检测肾脏炎性因子IL-1、IL-6和TNF-α含量,收集肾组织标本,聚合酶链式反应和蛋白印记法测定肾组织中Megsin、PDGF-BB、pERK1/2及collagen IV的表达。结果肾脏组织HE染色可见,正常组大鼠形态正常,模型组出现明显肾小球萎缩和硬化,与模型组相比,贝那普利组、川陈皮素低、中和高剂量组均明显好转,此外贝那普利组和川陈皮素高剂量组基本一致;与正常组相比,模型组大鼠血糖、KW/BW、尿液肾功能指标UREA和β2-MG、血液肾功能指标UREA和β2-MG、肾脏炎性因子IL-1、IL-6和TNF-α、肾脏组织中Megsin、PDGF-BB、pERK1/2和collagen IV蛋白与mRNA均明显升高(P<0.05),与模型组相比,贝那普利组、川陈皮素低、中和高剂量组血糖、KW/BW、尿液肾功能指标UREA和β2-MG、血液肾功能指标UREA和β2-MG、肾脏炎性因子IL-1、IL-6和TNF-α、肾脏组织中Megsin、PDGF-BB、pERK1/2和collagen IV蛋白与mRNA均降低(P<0.05),此外川陈皮素各组血糖均明显低于贝那普利组(P<0.05),川陈皮素高剂量组IL-1、IL-6和TNF-α低于贝那普利组(P<0.05),但KW/BW、尿液UREA和β2-MG、血液UREA和β2-MG、肾脏中Megsin、PDGF-BB、pERK1/2和collagen IV蛋白与mRNA和贝那普利组相比没有差异。结论川陈皮素对糖尿病肾病大鼠有明显的治疗作用,这与川陈皮素可调节肾脏中megsin、PDGF-BB、pERK1/2及collagen IV的表达有关。

SPINK1在前列腺癌中的基础及临床转化研究进展

在肿瘤发生和演进中发挥驱动作用的基因改变常可作为特异性诊断标志物、分子分型的依据和治疗新靶点。丝氨酸蛋白酶抑制因子Kazal1型(SPINK1)又被称为胰腺分泌性胰酶抑制因子(PSTI)或肿瘤相关性胰酶抑制因子(TATI),是一种由56个氨基酸残基组成的分泌性多肽,主要作用是抑制胰蛋白酶原等多种丝氨酸蛋白酶原活性。最近的研究提示,SPINK1可能通过发挥类生长因子作用,促进前列腺癌的生长和侵袭。SPINK1和前列腺癌患者的预后密切相关,可能是某些恶性程度高的前列腺癌的潜在治疗靶点。本课题组研究初步证实SPINK1的过表达与前列腺癌患者的临床不良预后呈正相关。本文通过对现阶段前列腺癌中SPINK1的基础及临床转化研究作简要综述,旨在强调其在前列腺癌的预后评价和治疗靶点选择上的重要意义。

SPINK1/Spink3的研究进展

丝氨酸蛋白酶抑制因子Kazal 1型(serine protease inhibitor Kazal type 1,SPINK1)是蛋白酶抑制剂家族中最主要的成员之一,它可抑制胰腺中胰蛋白酶原的非正常性激活,保护胰腺组织,在胰腺炎的发病过程中可能起着重要的作用。除此之外,越来越多的研究表明SPINK1/Spink3(小鼠同源基因)还具有生长因子、自噬的负调节因子等作用,且其基因突变可能是胰腺炎发病的重要危险因素之一,与此同时还发现SPINK1/Spink3可能在肿瘤的发生、发展及预后中起着重要的作用。但有关SPINK1/Spink3发挥其作用的信号传导通路目前尚不清楚。本文就SPINK1/Spink3在以上方面的最新研究进展进行综述。