K_(Ca)3.1通道抑制剂TRAM-34对TGF-β1诱导系膜细胞增生的影响

目的 观察TRAM-34对TGF-β1诱导系膜细胞增生的影响,了解KCa 3.1在肾小球硬化中的作用.方法2ng/mL TGF-β1诱导系膜细胞增生后,采用流式细胞技术和MTT方法观察8、16、24nmol/L TRAM-34分别对细胞周期和细胞增殖的影响,并选用最佳抑制浓度TRAM-34干预15、30、60min后,用RT-PCR技术观察其对系膜细胞α-SMA和FSP-1转录水平的影响.结果 与空白对照组相比,2ng/mL TGF-β1诱导的系膜细胞阻滞于G0～G1期,表现为G0～G1期细胞百分比明显升高[（48.45±1.89）% vs.（70.29±1.84）%,P〈0.01],而S期细胞百分比相应下降[（38.54±1.13）% vs.（19.56±1.67）%;P〈0.01）;各浓度TRAM-34组均可以改善阻滞于G0～G1期的系膜细胞增生,使细胞周期中G0～G1期细胞百分比明显减少,S期细胞百分比明显增多,其中24nmol/L组降低最明显[TGF-β1组vs.TRAM-34组：G0～G1期为（70.29±1.84）% vs.（61.90±1.88）%;S期为（19.56±1.67）% vs.（25.52±1.62）%;P〈0.05）.MTT实验结果也显示各浓度TRAM-34对TGF-β1诱导系膜细胞增生具有抑制作用,其中24nmol/L组抑制作用最显著,与8nmol/L和16nmol/L组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）.24nmol/L的TRAM-34可显著抑制系膜细胞α-SMA和FSP-1的表达.结论 TRAM-34能够改善TGF-β1诱导的系膜细胞阻滞,减少细胞的早衰、表型转化和纤维样增生.