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梓醇调节Keap1/Nrf2/HO-1信号通路对口腔鳞癌细胞恶性生物学行为的影响
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作者 陈尧卉 张庚辉 +1 位作者 周婷 王雅雯 《河北医药》 CAS 2024年第11期1636-1641,共6页
目的探究梓醇调节Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1/核因子E2相关因子2/血红素氧合酶-1(Keap1/Nrf2/HO-1)信号通路对口腔鳞癌细胞恶性生物学行为的影响。方法体外培养口腔鳞癌细胞Tac8113;CCK-8法筛选梓醇最佳作用水平;将Tac8113细胞分为对... 目的探究梓醇调节Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1/核因子E2相关因子2/血红素氧合酶-1(Keap1/Nrf2/HO-1)信号通路对口腔鳞癌细胞恶性生物学行为的影响。方法体外培养口腔鳞癌细胞Tac8113;CCK-8法筛选梓醇最佳作用水平;将Tac8113细胞分为对照组、梓醇组(24μg/mL)、sh-NC组(转染sh-NC慢病毒质粒)、sh-Keap1组(转染sh-Keap1慢病毒质粒)、梓醇+sh-NC组(转染sh-NC+24μg/mL梓醇)、梓醇+sh-Keap1组(转染sh-Keap1+24μg/mL梓醇);CCK-8法检测细胞增殖;划痕试验检测细胞迁移;流式细胞术检测细胞凋亡;2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)检测细胞活性氧(ROS)水平;采用试剂盒分别检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;Western Blot分别检测Keap1/Nrf2/HO-1信号通路及凋亡相关蛋白表达水平。结果与0μg/mL组比较,随着梓醇剂量增加Tac8113细胞存活率显著降低(P<0.05),因此,选择24μg/mL梓醇作为后续实验的干预条件;与对照组比较,梓醇组Tac8113细胞OD450值、划痕愈合率、ROS水平、MDA水平及B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Nrf2、HO-1表达显著降低,细胞凋亡率、SOD水平及Keap1、胱天蛋白酶3(caspase3)表达显著升高(P<0.05);Keap1低表达后Tac8113细胞恶性生物学行为程度加重,且逆转了梓醇对Tac8113细胞恶性生物学行为的影响。结论梓醇抑制口腔鳞癌细胞增殖、迁移,诱导细胞凋亡发挥抑癌作用,可能与上调Keap1表达,下调Nrf2和HO-1表达有关。 展开更多
关键词 口腔鳞癌 梓醇 keap1/nrf2/ho-1 增殖 迁移 凋亡
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益气活血托毒方对慢性非细菌性前列腺炎大鼠Keap1/Nrf2/HO-1信号通路的影响
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作者 唐益文 王雄 +7 位作者 陈豪特 周艳艳 丁家森 魏永强 刘建刚 高庆和 高瞻 徐峰 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2024年第1期72-77,共6页
目的观察益气活血托毒方对慢性非细菌性前列腺炎(CNP)大鼠Keap1/Nrf2/HO-1信号通路的影响,探讨其治疗CNP作用机制。方法采用去势结合雌激素诱导法制备CNP大鼠模型。48只SD大鼠采用随机数字表法分为空白组、模型组、塞来昔布组和益气活... 目的观察益气活血托毒方对慢性非细菌性前列腺炎(CNP)大鼠Keap1/Nrf2/HO-1信号通路的影响,探讨其治疗CNP作用机制。方法采用去势结合雌激素诱导法制备CNP大鼠模型。48只SD大鼠采用随机数字表法分为空白组、模型组、塞来昔布组和益气活血托毒方组,每组12只。塞来昔布组予塞来昔布混悬液0.035 g/kg灌胃,益气活血托毒方组予益气活血托毒方水煎剂8.64 g/kg灌胃,空白组和模型组灌胃等体积生理盐水,连续28 d。Von Frey纤维丝测痛仪测定大鼠机械痛阈值,HE染色观察前列腺组织病理变化并进行病理评分,化学荧光法检测前列腺组织活性氧(ROS)含量,比色法测定前列腺组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量,Western blot检测前列腺组织Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠机械痛阈值、前列腺指数显著降低(P<0.01);前列腺组织腺腔大小不一,腔内分泌物消失,间质疏松、水肿,有大量纤维组织增生和炎性细胞浸润,病理评分显著升高(P<0.01);前列腺组织ROS、MDA含量显著升高,GSH-Px活性显著降低(P<0.01),Keap1、Nrf2蛋白表达显著降低,HO-1蛋白表达显著升高(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,益气活血托毒方组大鼠机械痛阈值显著升高(P<0.01);前列腺组织轻微损伤,有少量纤维增生和炎性细胞浸润,病理评分显著降低(P<0.01,P<0.05);前列腺组织ROS、MDA含量显著降低,GSH-Px活性显著升高(P<0.01),Keap1、Nrf2蛋白表达显著升高,HO-1蛋白表达显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论益气活血托毒方可有效改善CNP大鼠前列腺组织病理形态,提高痛阈值,其作用机制可能与激活Keap1/Nrf2/HO-1信号通路,降低大鼠前列腺组织氧化应激损伤有关。 展开更多
关键词 益气活血托毒方 慢性非细菌性前列腺炎 氧化应激 keap1/nrf2/ho-1信号通路 细胞凋亡
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基于Keap1/Nrf2/HO-1信号通路研究当归醇提物对多囊卵巢综合征大鼠的保护作用
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作者 莫思懿 曹后康 +4 位作者 张可锋 晋玲 钟明利 韦日明 高雅 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期740-747,共8页
目的使用来曲唑联合高脂饮食建立多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)大鼠模型,探讨当归醇提物(ethanol extract of Angelicae Sinensis Radix,EEA)对PCOS大鼠的保护作用及其作用机制。方法来曲唑联合高脂饮食诱导雌性SD... 目的使用来曲唑联合高脂饮食建立多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)大鼠模型,探讨当归醇提物(ethanol extract of Angelicae Sinensis Radix,EEA)对PCOS大鼠的保护作用及其作用机制。方法来曲唑联合高脂饮食诱导雌性SD大鼠建立PCOS模型,并用EEA干预。阴道涂片染色、HE染色、酶联免疫吸附法(ELISA)和生化指标检测评价EEA对PCOS大鼠的治疗作用,并通过荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测EEA对Keap1/Nrf2/HO-1信号通路的影响。结果阴道涂片和HE染色结果表明,EEA改善了PCOS大鼠动情周期紊乱和卵巢组织病变,ELISA和生化指标检测结果表明EEA可以调节激素紊乱,改善血脂异常;且在模型组中Keap1蛋白和mRNA表达明显上调,Nrf2和HO-1蛋白和mRNA表达明显下调而经过EEA治疗后Keap1蛋白和mRNA表达明显下调,Nrf2和HO-1蛋白和mRNA表达明显上调(P<0.05或P<0.01)。结论EEA可以减轻大鼠PCOS,其机制可能是通过促进Keap1/Nrf2/HO-1信号通路,从而抑制氧化应激。 展开更多
关键词 当归醇提物 多囊卵巢综合征(PCOS) keap1/nrf2/ho-1信号通路 氧化应激 性激素 血脂
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基于Keap1/Nrf2/HO-1通路探讨虎杖苷对衰老小鼠学习认知障碍的作用机制
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作者 马晓轩 刘毅 +2 位作者 蔡羽 颜春潮 陈运中 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1287-1295,共9页
目的研究虎杖苷对D-半乳糖致衰老模型小鼠的调节作用。方法将56只ICR小鼠(雌雄各半)分为正常组、模型组、阳性组、虎杖苷低、中、高治疗组,通过每日颈后部皮下注射D-半乳糖(500 mg·kg^(-1))建立衰老模型。造模期间,阳性组灌胃盐酸... 目的研究虎杖苷对D-半乳糖致衰老模型小鼠的调节作用。方法将56只ICR小鼠(雌雄各半)分为正常组、模型组、阳性组、虎杖苷低、中、高治疗组,通过每日颈后部皮下注射D-半乳糖(500 mg·kg^(-1))建立衰老模型。造模期间,阳性组灌胃盐酸多奈哌齐片(0.75 mg·kg^(-1)),治疗组灌胃虎杖苷(40、70、100 mg·kg^(-1)),正常组给予等量生理盐水。通过筑巢实验、新型物体识别实验与Morris水迷宫实验评估小鼠学习认知能力;取小鼠心、肝、脾、肾、胸腺计算脏器指数;苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠全脑组织病理变化;ELISA检测小鼠血清与全脑组织中T-SOD、MDA、GSH-Px、AchE水平;Western blot检测小鼠海马组织Keap1、Nrf2、HO-1蛋白表达水平。结果较模型组相比,阳性组与虎杖苷低、中、高剂量组小鼠的筑巢能力、对新物体的识别能力与水下寻找站台的能力有所上升;脏器指数增加;大脑皮层与海马组织的神经元损伤明显改善;血清与脑组织中T-SOD、GSH-Px活性升高,MDA、AchE活性下降;海马组织中Nrf2、HO-1蛋白表达水平上升,Keap1蛋白表达水平降低。结论虎杖苷对D-半乳糖致衰老模型小鼠的学习认知障碍具有改善作用,其机制可能与Keap1/Nrf2/HO-1通路有关。 展开更多
关键词 虎杖苷 D-半乳糖 学习认知障碍 抗衰老 抗氧化应激 keap1/nrf2/ho-1通路
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益肾健脾化瘀汤通过调节Keap1/Nrf2/HO-1通路减轻STZ致大鼠肾损伤
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作者 马怡晖 邱昌龙 +5 位作者 李继安 齐亚娟 杨世瑜 高裕闻 徐文轩 储金秀 《吉林医学》 CAS 2024年第1期5-9,共5页
目的:基于Keap1/Nrf2/HO-1通路观察益肾健脾化瘀汤(YJHD)减轻链脲佐菌素(STZ)所致大鼠肾损伤的情况。方法:在60只SD雄性大鼠中随机选取10只作为对照组,普通维持饲料喂养,其余50只大鼠给予高脂饲料喂养,4 w后,单次小剂量腹腔注射STZ,将... 目的:基于Keap1/Nrf2/HO-1通路观察益肾健脾化瘀汤(YJHD)减轻链脲佐菌素(STZ)所致大鼠肾损伤的情况。方法:在60只SD雄性大鼠中随机选取10只作为对照组,普通维持饲料喂养,其余50只大鼠给予高脂饲料喂养,4 w后,单次小剂量腹腔注射STZ,将造模成功的40只大鼠按照每组10只随机分为模型组、YJHD低、高剂量组和阳性药物组[卡格列净(CANA)组],阳性药物选择卡格列净(CANA),灌胃8 w,同时间内模型组灌胃等容积的蒸馏水。给药后测定口服糖耐量(OGTT)以及曲线下面积(AUC),收集尿液测定24 h尿蛋白,取材时取血,用血清样本测定血肌酐(Cre)、血尿素氮(BUN)及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)及丙二醛(MDA)的水平,HE染色观察肾组织病理改变情况,Western blot迹检测肾组织中Keap1、Nrf2、HO-1水平。结果:与对照组相比,模型组FBG、AUC明显升高(P<0.05),24 h尿蛋白、Cre、BUN水平明显升高(P<0.05),MDA明显升高,SOD、GSH-Px以及CAT明显下降(P<0.05),肾组织中可见大量的炎性细胞增生浸润,Keap1的表达明显升高,Nrf2和HO-1的表达明显降低(P<0.05)。与阳性药物组相比,YJHD组FBG、AUC水平明显下降(P<0.05),24 h尿蛋白、Cre、BUN水平都有明显改善(P<0.05),MDA水平降低,SOD、GSH-Px、CAT水平提高(P<0.05),而在肾组织中,细胞的增生浸润情况有所缓解,Keap1的蛋白表达量降低,Nrf2和HO-1蛋白表达量明显升高(P<0.05)。结论:益肾健脾化瘀汤可能是通过Keap1/Nrf2/HO-1通路来缓解减轻STZ所致的大鼠的肾损伤。 展开更多
关键词 益肾健脾化瘀汤 肾损伤 keap1/nrf2/ho-1通路
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基于Keap1/Nrf2/HO-1信号通路和氧化应激效应研究白肉灵芝多糖对小鼠运动性疲劳的保护作用 被引量:4
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作者 田星 路丛丛 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2023年第1期127-136,共10页
目的:研究白肉灵芝多糖对高强度训练小鼠的抗疲劳作用机制。方法:小鼠随机分为空白对照组、模型对照组和白肉灵芝多糖低、中、高3个处理组,通过跑台训练建立小鼠运动性疲劳模型,处理组按照多糖浓度10、50、100 mg/mL分别连续给予多糖灌... 目的:研究白肉灵芝多糖对高强度训练小鼠的抗疲劳作用机制。方法:小鼠随机分为空白对照组、模型对照组和白肉灵芝多糖低、中、高3个处理组,通过跑台训练建立小鼠运动性疲劳模型,处理组按照多糖浓度10、50、100 mg/mL分别连续给予多糖灌胃,其他组灌胃相同剂量的无菌生理盐水,连续训练4周后进行小鼠爬杆实验,记录小鼠爬杆时间,并测定小鼠体内睾酮(TTS)、皮质酮(CTC)、血尿素氮(BUN)、血乳酸(BLA)、肝糖原(HG)、肌糖原(MG)、丙二醛(MDA)含量和过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物歧化酶(GSH-Px)等活力,同时Western blot检测小鼠骨骼肌中Keap-1、Nrf2、HO-1的蛋白表达量。结果:低、中、高多糖处理组小鼠爬杆时间显著提高(P <0.05),同时小鼠血清中TTS含量逐渐升高,CTC含量则逐渐下降,HG和MG的含量逐渐升高;另外多糖低、中、高剂量组小鼠血清和肝组织中MDA含量均显著降低(P <0.05),CAT、SOD、GSH-Px酶活性均显著提高(P <0.05)。与空白对照组相比,模型组中Keap1的蛋白表达水平显著升高(P <0.05),并下调了Nrf2和HO-1的蛋白表达,与模型组相比白肉灵芝多糖低、中、高多糖处理组的Keap1蛋白表达水平依次下降,Nrf2和HO-1的蛋白表达水平则依次升高。结论:白肉灵芝多糖对小鼠运动性疲劳的保护作用可能是与提高小鼠骨骼肌细胞抗氧化作用及影响Keap1/Nrf2/HO-1信号通路有关。 展开更多
关键词 白肉灵芝 跑台运动 多糖 运动性疲劳 抗氧化酶活性 keap1/nrf2/ho-1
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转位分子蛋白经由Keap1/Nrf2/HO-1通路激活自噬缓解大鼠糖尿病神经病理性疼痛
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作者 高楠 郝璨 +3 位作者 马冰洁 靳天 马柯 刘晓明 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期988-996,共9页
目的·探讨转位分子蛋白(translocator protein,TSPO)激动剂Ro5-4864对糖尿病神经病理性疼痛(diabetic neuropathic pain,DNP)大鼠坐骨神经自噬和Kelch样ECH关联蛋白(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)/核因子E2相关因子(... 目的·探讨转位分子蛋白(translocator protein,TSPO)激动剂Ro5-4864对糖尿病神经病理性疼痛(diabetic neuropathic pain,DNP)大鼠坐骨神经自噬和Kelch样ECH关联蛋白(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)/核因子E2相关因子(nuclear factor erythroid-derived-2-like 2,Nrf2)/血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)通路的影响。方法·通过高脂饮食和链脲佐菌素构建2型糖尿病模型,经行为学筛选获得DNP大鼠。24只大鼠根据数字表随机分配到假手术组(Sham组)、DNP模型组(DNP组)、TSPO激动剂Ro5-4864处理组(Ro组)和TSPO激动剂Ro5-4864合用Nrf2抑制剂ML385处理组(Ro+ML385组)。采用up-down法测量大鼠50%机械缩足反射阈值(paw 50%mechanical withdrawal threshold,50%PMWT),时间点选定为处理前(baseline),处理后第3(D3)、7(D7)、14(D14)、21(D21)和28(D28)天。在最后1天收集坐骨神经,使用免疫荧光和Western blotting分析鞘内注射Ro5-4864对DNP大鼠坐骨神经中自噬相关蛋白和Keap1/Nrf2/HO-1通路相关蛋白的影响。结果·与Sham组相比,DNP组大鼠的50%PMWT自第3天开始大幅下降,全程无改善(各时间点均P=0.000);另外,DNP大鼠坐骨神经中Bcl-2相互作用蛋白(Bcl-2 interacting coiled-coil protein 1,Beclin-1)、微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(microtubule-associated protein light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)、HO-1和核Nrf2蛋白的含量显著减少(均P=0.000),p62则显著增加(P=0.000)。鞘内注射Ro5-4864改善了以上损伤,大鼠50%PMWT与DNP组相比逐渐上升(D14 P=0.039,D21和D28均P=0.000),自噬和Keap1/Nrf2/HO-1通路的损伤也被修复,表现为Beclin-1、LC3-Ⅱ、HO-1和核Nrf2蛋白含量的升高(均P=0.000)以及p62含量的降低(P=0.001)。但是,Ro5-4864的效应被ML385完全抑制。结论·TSPO激动剂Ro5-4864缓解了DNP,其作用机制可能与通过对Keap1/Nrf2/HO-1通路的正向调节激活了DNP大鼠坐骨神经中的自噬相关。这可能为治疗DNP提供了一个新的策略。 展开更多
关键词 转位分子蛋白 神经病理性疼痛 糖尿病 自噬 keap1/nrf2/ho-1通路
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基于Keap1/Nrf2/HO-1抗氧化信号通路探讨泰山磐石散对流产大鼠子宫蜕膜的影响
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作者 刘小倩 冉添福 +3 位作者 林超睿 黄玉欣 钟滨 江澍 《福建中医药》 2023年第3期19-22,30,共5页
目的 探讨泰山磐石散对流产大鼠子宫蜕膜组织Keap1/Nrf2/HO-1抗氧化信号通路的影响。方法 采用随机数字表法将18只SPF级受孕后的SD大鼠分成空白对照组、模型组和治疗组,每组各6只。模型组和治疗组于妊娠第6~8天予皮下注射溴隐亭溶液建... 目的 探讨泰山磐石散对流产大鼠子宫蜕膜组织Keap1/Nrf2/HO-1抗氧化信号通路的影响。方法 采用随机数字表法将18只SPF级受孕后的SD大鼠分成空白对照组、模型组和治疗组,每组各6只。模型组和治疗组于妊娠第6~8天予皮下注射溴隐亭溶液建立流产模型;妊娠第1~11天,治疗组予泰山磐石散药液灌胃,空白对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃。于妊娠第12天取子宫。观察3组大鼠死胎个数及胚胎总数,并计算出胚胎吸收率;HE染色法观察大鼠母胎界面蜕膜组织形态学变化,RT-PCR和免疫组化法分别检测各组大鼠母胎界面蜕膜组织中Keap1、Nrf2和HO-1基因水平和蛋白表达。结果 与空白对照组比较,模型组大鼠胚胎吸收率明显提高(P<0.01),蜕膜组织中Keap1基因水平及蛋白表达明显提高(P<0.05,P<0.01),Nrf2和HO-1基因水平及蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,治疗组大鼠蜕膜组织中Keap1基因水平明显降低(P<0.01),Nrf2和HO-1基因水平明显提高(P<0.01),HO-1蛋白表达明显提高(P<0.05)。与空白对照组比较,模型组蜕膜组织中血管减少且扩张严重、蜕膜细胞排列紊乱;与模型组比较,治疗组大鼠蜕膜组织中血管丰富,血管扩张得到改善,细胞排列相对整齐。结论 泰山磐石散可能通过促进Keap1与Nrf2的解离以及激活Nrf2的转录,上调下游HO-1的表达,降低蜕膜组织的氧化应激水平,减少胚胎的氧化损伤,从而起到保胎的作用。 展开更多
关键词 自然流产 泰山磐石散 keap1/nrf2/ho-1信号通路 蜕膜组织 氧化应激
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Scutellarin alleviates complete freund’s adjuvant-induced rheumatoid arthritis in mice by regulating the Keap1/Nrf2/HO-1 pathway
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作者 JIAN LI QINGQING WANG XIAOYING ZHANG 《BIOCELL》 SCIE 2023年第6期1307-1316,共10页
Scutellarin(SCU)is a herbal flavonoid glucuronide with multiple pharmacological activities,including antioxidant,anti-inflammation,vascular relaxation,anti-platelet,and myocardial protection.However,the effect of SCU... Scutellarin(SCU)is a herbal flavonoid glucuronide with multiple pharmacological activities,including antioxidant,anti-inflammation,vascular relaxation,anti-platelet,and myocardial protection.However,the effect of SCU on complete Freund’s adjuvant(CFA)-induced rheumatoid arthritis(RA)had not been studied.In this study,we investigated the beneficial effects of SCU in the CFA-induced RA mice model and the anti-arthritic activity was evaluated by paw edema.Enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)was carried out to evaluate the plasma levels of immunoglobulin(Ig)G,IgE,tumor necrosis factor(TNF)-α,interleukin(IL)-1β,IL-6,receptor activator of nuclear factor-κB ligand(RANKL),and osteoprotegerin(OPG).Histological slides were prepared from the harvested paws of mice to determine the pathological changes in the joints.The proportions of T helper type 1(Th1)and T helper type 2(Th2)cells of CD4+T lymphocyte subsets were analyzed by flow cytometry.The expression of Kelch-like ECHassociated protein 1(Keap1),nuclear factor erythroid 2-related factor 2(Nrf2),and heme oxygenase-1(HO-1)was analyzed using real-time quantitative PCR(RT-qPCR)and western blotting assays.The present study demonstrated that SCU prevented CFA-induced RA,and inhibited the expression of inflammation factors,IgG,IgE,TNF-α,IL-1β,and IL-6.While SCU also reduced the RANKL level,it increased OPG expression in RA mice.The Th1/Th2 ratio was significantly lower in mice treated with SCU.Additionally,HO-1 expression was reduced while the expression of Keap1 and Nrf2 was elevated following SCU treatment.Results provide preliminary evidence to employ SCU in arthritis treatment which might be related to the regulation of Th1/Th2 balance and the Keap1/Nrf2/HO-1 pathway. 展开更多
关键词 SCUTELLARIN Rheumatoid arthritis Th1/Th2 balance keap1/nrf2/ho-1 pathway Immunosuppression
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金丝桃苷通过激活Keap1/Nrf2/HO-1通路保护小鼠GC-2细胞的氧化损伤 被引量:7
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作者 朱妍妍 王桐生 +4 位作者 戴宁 邓梦云 刘红娟 童小慧 李莉 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期673-680,共8页
目的从Keap1/Nrf2/HO-1通路角度研究金丝桃苷(Hyp)对H2O2所诱导的小鼠精母细胞(GC-2)氧化损伤的保护作用。方法将GC-2细胞随机分为正常组、模型组、氮乙酰半胱氨酸组(阳性组,NAC,2.5 mmol/L)以及金丝桃苷组(50、100、200μmol/L),各组... 目的从Keap1/Nrf2/HO-1通路角度研究金丝桃苷(Hyp)对H2O2所诱导的小鼠精母细胞(GC-2)氧化损伤的保护作用。方法将GC-2细胞随机分为正常组、模型组、氮乙酰半胱氨酸组(阳性组,NAC,2.5 mmol/L)以及金丝桃苷组(50、100、200μmol/L),各组按剂量孵育48 h后,除正常组外其余各组细胞加入H_(2)O_(2)(150μmol/L)处理2 h,正常组给予等容量培养基。采用CCK-8法检测细胞的活力,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,酶联免疫法检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)活力以及丙二醛(MDA)含量,Westernblot和RT-qPCR检测Nrf2、Keap1、HO-1蛋白及mRNA的相对表达水平,免疫荧光法检测Nrf2核转位水平。结果150μmol/L H_(2)O_(2)干预2 h可制备GC-2细胞氧化损伤模型。与正常组比较,模型组GC-2细胞增殖率以及SOD、GSH、CAT活力显著降低,MDA含量、细胞凋亡率,Keap1和Nrf2 mRNA表达显著升高(P<0.05)以及Keap1蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,NAC组和金丝桃苷200μmol/L组细胞增殖率和SOD、GSH-PX、CAT活力显著升高,MDA含量、细胞凋亡率显著下降(P<0.05);金丝桃苷200μmol/L组Keap1 mRNA表达显著下降,HO-1 mRNA表达显著升高(P<0.01);金丝桃苷200μmol/L组Nrf2核蛋白(NEs-Nrf2)以及HO-1的蛋白表达显著升高(P<0.05),Keap1蛋白表达显著下降(P<0.01);金丝桃苷组出现了明显的核转位现象(P<0.05)。结论金丝桃苷可能通过激活Keap1/Nrf2/HO-1信号通路,对H_(2)O_(2)诱导的GC-2细胞氧化损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 金丝桃苷 氧化应激 nrf2 ho-1 keap1 GC-2细胞
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有氧运动通过Keap1Nrf2HO-1通路对睡眠障碍老年大鼠认知的改善机制
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作者 陈晓勇 李洁华 +4 位作者 赵丽花 赵家龙 颜闪闪 林紫薇 高理升 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第2期125-129,共5页
目的探究有氧运动通过Keap1Nrf2HO-1通路对睡眠障碍老年大鼠认知的改善机制。方法选用Wistar大鼠,60只,雌雄各半,将大鼠均分为4组,其中一组为空白组,其余分为模型组、给药组(根据每只大鼠的体重按照0.5 mg/kg进行艾司唑仑片灌胃给药)和... 目的探究有氧运动通过Keap1Nrf2HO-1通路对睡眠障碍老年大鼠认知的改善机制。方法选用Wistar大鼠,60只,雌雄各半,将大鼠均分为4组,其中一组为空白组,其余分为模型组、给药组(根据每只大鼠的体重按照0.5 mg/kg进行艾司唑仑片灌胃给药)和有氧运动组,每组15只。结果与空白组比较,模型组逃避潜伏期延长(P<0.01),且伴随着明显的寻台次数较少、穿越原平台次数降低(P<0.01),大鼠在原平台停留的时间占总游泳时间的百分比降低(P<0.05);与模型组比较,给药组和有氧运动组逃避潜伏期缩短(P<0.01),且伴随着明显的寻台次数增加、穿越原平台次数增加(P<0.01),在原平台停留的时间占总游泳时间的百分比升高(P<0.05)。与空白组比较,模型组MDA水平升高,SOD活性降低(P<0.01),Keap1水平升高(P<0.01),Nrf2和HO-1水平降低(P<0.01);与模型组比较,给药组和有氧运动组MDA水平降低,SOD活性升高(P<0.01),Keap1水平降低,Nrf2和HO-1水平升高(P<0.01)。结论有氧运动能够有效缓解失眠障碍大鼠的认知功能,其机制原理可能与有氧运动通过改善睡眠障碍大鼠机体内海马组织的Keap1/Nrf2/HO-1蛋白表达水平从而产生抗氧化应急作用有关。 展开更多
关键词 有氧运动 keap1/nrf2/ho-1蛋白 睡眠障碍 大鼠 改善机制
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二仙汤对少弱精子症小鼠Keap1/Nrf2/HO-1通路的影响
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作者 江晓翠 萧闵 +5 位作者 刘祺 王望 周艳艳 吕银娟 赵敏 曹继刚 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2024年第6期641-647,共7页
目的:探讨二仙汤对少弱精子症小鼠生精功能和精子质量的影响及其作用机制。方法:48只成年雄性SPF级KM小鼠,随机数字法分为空白组,模型组,二仙汤高、中、低剂量组和维生素E组,每组8只。除空白组外,其余各组以1.25g·kg^(–1)腺嘌呤... 目的:探讨二仙汤对少弱精子症小鼠生精功能和精子质量的影响及其作用机制。方法:48只成年雄性SPF级KM小鼠,随机数字法分为空白组,模型组,二仙汤高、中、低剂量组和维生素E组,每组8只。除空白组外,其余各组以1.25g·kg^(–1)腺嘌呤灌胃构建少弱精子症小鼠模型。造模完成后,二仙汤高、中、低剂量组分别灌胃给予11.7,5.85,2.93 g·kg^(–1)二仙汤,维生素E组灌胃给予0.013 g·kg^(–1)维生素E,连续灌胃21 d后取材。测定睾丸、附睾指数;苏木素-伊红染色观察睾丸组织病理变化并对睾丸生精功能评分;全自动精子分析仪检测精子密度和活动率;生化试剂盒检测睾丸组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、丙二醛(malondialdehyde,MDA);蛋白免疫印迹法检测睾丸组织Kelch-样ECH相关蛋白1(Kelch-like ECH related protein 1,Keap1)、核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)、血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应检测睾丸组织Keap1、Nrf2、HO-1 m RNA表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠附睾指数、睾丸指数,睾丸生精功能,精子密度及活动率,睾丸组织SOD、CAT活性,Nrf2、HO-1蛋白及其m RNA表达水平均降低,睾丸MDA含量、Keap1蛋白及其m RNA表达水平均升高(P<0.01);与模型组比较,二仙汤高、中剂量组小鼠上述指标均有显著逆转(P<0.05,P<0.01)。结论:二仙汤可能通过调控Keap1/Nrf2/HO-1信号通路减轻睾丸组织氧化应激损伤,提高生精功能,改善少弱精子症。 展开更多
关键词 二仙汤 少弱精子症 氧化应激 keap1/nrf2/ho-1 精子质量
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丹蒌片通过Keap1-Nrf2/HO-1信号通路缓解视网膜缺血-再灌注损伤
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作者 蔺彦娜 吴惠琴 +3 位作者 郑博 陈晓冬 雷鹏 陈梦涵 《国际眼科杂志》 CAS 2024年第7期1027-1031,共5页
目的:探讨丹蒌片对小鼠视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI)的保护作用及其机制。方法:将40只ApoE^(-/-)小鼠给予高脂饲料喂养6 wk,通过前房灌注加压法建立RIRI模型,分为对照组(给予生理盐水灌胃8 wk)、RIRI模型组(给予生理盐水灌胃8 wk)及丹... 目的:探讨丹蒌片对小鼠视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI)的保护作用及其机制。方法:将40只ApoE^(-/-)小鼠给予高脂饲料喂养6 wk,通过前房灌注加压法建立RIRI模型,分为对照组(给予生理盐水灌胃8 wk)、RIRI模型组(给予生理盐水灌胃8 wk)及丹蒌片低、中、高剂量组[分别给予丹蒌片溶液1、2、4 g/(kg·d)灌胃8 wk]。采用苏木精-伊红(HE)染色观察各组小鼠视网膜组织形态学变化情况,TUNEL染色检测各组小鼠视网膜细胞凋亡情况,Western-blot法检测各组小鼠视网膜组织中Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)、转录因子核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、超氧化物歧化酶(Sod2)蛋白表达情况。结果:与对照组比较,RIRI模型组小鼠视网膜萎缩,厚度变薄,细胞凋亡增加,视网膜组织中Sod2蛋白表达下调,Keap1蛋白表达上调(均P<0.01);与RIRI模型组比较,丹蒌片中、高剂量组小鼠视网膜厚度增加(均P<0.01),丹蒌片低、中、高剂量组小鼠视网膜细胞凋亡降低(均P<0.05),丹蒌片低剂量组小鼠视网膜组织中Keap1和HO-1蛋白表达水平无明显差异(P>0.05),丹蒌片中、高剂量组小鼠视网膜组织中Sod2、Nrf2、HO-1蛋白表达上调,Keap1蛋白表达下调(均P<0.05)。结论:丹蒌片能缓解RIRI小鼠模型视网膜萎缩变薄,减少视网膜细胞凋亡,其作用是通过调控Keap1-Nrf2/HO-1信号通路降低RIRI氧化应激反应来实现。 展开更多
关键词 丹蒌片 ApoE^(-/-)小鼠 高脂血症 视网膜缺血-再灌注损伤 keap1-nrf2/ho-1通路
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枸杞多糖调节Nrf2/HO-1/GPX4铁死亡途径对妊娠期糖尿病大鼠胰岛素抵抗的改善作用
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作者 张翠翠 谢玲 孙文萍 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期626-630,共5页
目的 探讨枸杞多糖调节Nrf2/HO-1/GPX4铁死亡途径对妊娠期糖尿病(GDM)大鼠胰岛素抵抗的改善作用。方法 将SD成年大鼠雌雄合笼得到孕鼠,建立GDM模型,随机分为模型组,枸杞多糖低、中、高剂量组,ferrostatin-1组,每组8只,另设对照组,腹腔... 目的 探讨枸杞多糖调节Nrf2/HO-1/GPX4铁死亡途径对妊娠期糖尿病(GDM)大鼠胰岛素抵抗的改善作用。方法 将SD成年大鼠雌雄合笼得到孕鼠,建立GDM模型,随机分为模型组,枸杞多糖低、中、高剂量组,ferrostatin-1组,每组8只,另设对照组,腹腔注射等剂量柠檬酸缓冲液。末次给药24 h后,检测大鼠FBG、FINS、IRI水平。再次复制GDM模型32只,随机分为模型组、枸杞多糖组、ML385组、枸杞多糖+ML385组,另设对照组。药物分组干预后,检测大鼠FBG、FINS、IRI、TG、TC水平,妊娠第19天检测母体及胎鼠体质量以及血清IL-18、IL-6、SOD、MDA水平,子宫内膜组织ACSL4、PTGS2、Nrf2/HO-1/GPX4通路蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠FBG、FINS、IRI,母体及胎鼠体质量,血清TG、TC、IL-18、IL-6、MDA水平,子宫内膜组织ACSL4、PTGS2蛋白表达升高(P<0.05),血清SOD水平、子宫内膜组织Nrf2、HO-1、GPX4蛋白表达降低(P<0.05);与枸杞多糖+ML385组比较,枸杞多糖组大鼠FBG、FINS、IRI,母体及胎鼠体质量,血清TG、TC、IL-18、IL-6、MDA水平,子宫内膜组织ACSL4、PTGS2蛋白表达降低(P<0.05),血清SOD、子宫内膜组织Nrf2、HO-1、GPX4蛋白表达升高(P<0.05)。结论 枸杞多糖可通过促进Nrf2/HO-1/GPX4信号传导,抑制铁死亡途径,降低GDM大鼠血糖血脂水平,减弱其胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 枸杞多糖 妊娠期糖尿病 胰岛素抵抗 nrf2/ho-1/GPX4 铁死亡途径
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Nrf2/Keap1通路和PINK/Parkin介导的线粒体自噬失调在子痫前期进展中的分子机制研究
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作者 王莉 孔娇 +4 位作者 林青 郑林媚 郑颖 王艾桦 陈小菊 《中国性科学》 2024年第3期104-109,共6页
目的探讨Nrf2/Keap1通路和PINK/Parkin介导的线粒体自噬失调在子痫前期疾病进展中的分子机制。方法选取2020年6月至2023年1月于海南省人民医院妇产科做孕期检查并分娩的15例有重度子痫前期(sPE)早产史的孕妇的子宫内膜样本作为研究对象... 目的探讨Nrf2/Keap1通路和PINK/Parkin介导的线粒体自噬失调在子痫前期疾病进展中的分子机制。方法选取2020年6月至2023年1月于海南省人民医院妇产科做孕期检查并分娩的15例有重度子痫前期(sPE)早产史的孕妇的子宫内膜样本作为研究对象,纳入sPE组;并选取同期同院做孕期检查并分娩的15例有正常孕产史的孕妇的子宫内膜样本作为对照,纳入nPCB组。分离两组原代子宫内膜基质细胞(hESCs)。采用流式细胞术(FCM)测定活性氧(ROS)水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定总超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)水平。将hESCs进行处理并分组为nPCB-hESCs组、nPCB-hESCs处理组、sPE-hESCs组、sPE-hESCs处理组。分别对处理组两种来源的hESCs给予cAMP+MPA诱导蜕膜化。采用Western blot测定自噬相关蛋白和线粒体自噬相关蛋白的表达水平,测定JAr细胞球状体向hESCs的植入率。另选取hESCs进行处理并分组为nPCB-hESCs组、nPCB-hESCs+H/R组、sPE-hESCs组、sPE-hESCs+H/R组。H/R组分别对两种来源的hESCs给予缺氧/复氧(H/R)处理。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和Western blot测定Nrf2/Keap1 mRNA和蛋白质的表达水平。结果与nPCB-hESCs相比,sPE-hESCs中ROS的水平显著升高,SOD、GSH和GPx的水平显著降低(P<0.05)。与nPCB-hESCs组相比,nPCB-hESCs处理组细胞自噬/线粒体自噬相关蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与nPCB-hESCs组相比,sPE-hESCs组JAr细胞向hESCs植入的植入率显著较低(P<0.05)。与nPCB-hESCs处理组相比,sPE-hESCs处理组JAr细胞向hESCs植入的植入率显著较低(P<0.05)。与nPCB-hESCs+H/R组相比,sPE-hESCs+H/R组细胞内Nrf2 mRNA和蛋白质的表达水平显著降低,Keap1 mRNA和蛋白质的表达水平显著升高(P<0.05)。结论有子痫前期史的孕妇hESCs中Nrf2/Keap1通路激活受损和线粒体自噬功能被抑制,导致细胞内ROS的异常积累及其体外蜕膜化功能受损。 展开更多
关键词 子痫前期 原代人子宫内膜基质细胞 氧化应激 线粒体自噬 nrf2/keap1
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枸杞多糖通过激活Nrf2/HO-1通路保护HK-2细胞氧化损伤的作用
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作者 赵杰 史素芳 +4 位作者 单铁强 郭明 皮珊珊 张银平 郭菲 《中国实验诊断学》 2024年第4期474-477,共4页
目的分析枸杞多糖(LBP)干预对氧化损伤的人肾小管上皮细胞(HK-2)内的核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)通路蛋白表达的变化,探索LBP拮抗HK-2细胞氧化损伤的分子机制。方法采用过氧化氢诱导HK-2细胞制备氧化损伤细胞模型,HK-... 目的分析枸杞多糖(LBP)干预对氧化损伤的人肾小管上皮细胞(HK-2)内的核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)通路蛋白表达的变化,探索LBP拮抗HK-2细胞氧化损伤的分子机制。方法采用过氧化氢诱导HK-2细胞制备氧化损伤细胞模型,HK-2被分成4组:正常组、LBP组、氧化损伤组及LBP干预组。观察4组细胞的长势和形态变化;细胞活力测定法比较每组细胞的存活率;比色法分析氧化产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)的水平;免疫印迹技术检测细胞内Nrf2/HO-1通路蛋白Nrf2、HO-1的相对水平。结果正常组和LBP组相比,两组的细胞长势、形态和存活率,细胞产生MDA的量、SOD和GSH-Px的水平,通路蛋白Nrf2、HO-1的相对水平均无明显差异(均P>0.05);氧化损伤组和正常组相比,细胞皱缩变圆并脱落、贴壁细胞变少,存活率减少、MDA量增加、SOD和GSH-Px降低,通路蛋白Nrf2、HO-1的相对值下降(均P<0.05);LBP干预组和氧化损伤组相比,细胞长势、形状恢复、贴壁细胞较多,存活率增加、MDA量减少、SOD和GSH-Px升高,通路蛋白Nrf2、HO-1的相对值升高(均P<0.05)。结论枸杞多糖能通过激活Nrf2/HO-1通路提高HK-2细胞的抗氧化酶活性达到减轻细胞氧化损伤的目的。 展开更多
关键词 枸杞多糖 肾小管上皮细胞 氧化损伤 nrf2/ho-1通路
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金雀异黄酮通过Nrf2/HO-1信号通路减轻皮质神经元低氧/复氧损伤
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作者 李慧 刘少军 +2 位作者 霍好利 邢瑞敏 樊璐洁 《脑与神经疾病杂志》 CAS 2024年第4期251-257,共7页
目的研究金雀异黄酮(GEN)对皮质神经元低氧/复氧(H/R)损伤的影响,并基于核因子E2相关因子2/血红素加氧酶1(Nrf2/HO-1)信号通路探讨其机制。方法分离并体外培养C57BL/6J小鼠胎鼠(妊娠15 d)皮质神经元,设正常对照(Normal)组、模型(H/R)组... 目的研究金雀异黄酮(GEN)对皮质神经元低氧/复氧(H/R)损伤的影响,并基于核因子E2相关因子2/血红素加氧酶1(Nrf2/HO-1)信号通路探讨其机制。方法分离并体外培养C57BL/6J小鼠胎鼠(妊娠15 d)皮质神经元,设正常对照(Normal)组、模型(H/R)组、GEN(12.5μmol·L^(-1))组、TBHQ(Nrf2激动剂,10μmol·L^(-1))组、GEN(12.5μmol·L^(-1))+TBHQ(10μmol·L^(-1))组。除正常对照组外,其他组采用低氧(5%CO_(2)+95%N_(2))4 h后复氧(5%CO_(2)+95%空气)24 h的方法制备H/R损伤皮质神经元模型,各组分别于造模前2h给药干预。采用CCK-8法、流式细胞术检测神经元活力和凋亡率,DCFH-DA荧光探针法检测神经元活性氧(ROS)含量,分光光度法检测神经元中丙二醛(MDA)含量和抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)]活性,RT-PCR法检测神经元Nrf2、HO-1 mRNA表达,Western blot法检测神经元Nrf2、HO-1、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、激活型Caspase-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达。结果与H/R组比较,GEN组、TBHQ组和GEN+TBHQ组皮质神经元活力明显升高、凋亡率明显降低(P<0.05);神经元中ROS、MDA含量明显降低,SOD、GSH-Px活性明显升高(P<0.05);Nrf2、HO-1 mRNA表达量明显升高(P<0.05);Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白表达量及Bcl-2/Bax比值明显升高,Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达量明显降低(P<0.05)。GEN+TBHQ组对H/R损伤皮质神经元活力、凋亡率、氧化应激指标、Nrf2/HO-1信号通路相关mRNA和蛋白表达的调控作用均明显优于GEN组和TBHQ组(P<0.05)。结论GEN可通过促进Nrf2/HO-1信号通路活化抑制氧化应激损伤和神经元凋亡,对皮质神经元H/R损伤起到保护作用。 展开更多
关键词 金雀异黄酮 皮质神经元 低氧/复氧 nrf2/ho-1信号通路 氧化应激
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神经生长因子联合BMSCs-源外泌体通过Keap1/NQO1/Nrf2信号通路缓解脑出血大鼠神经损伤
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作者 李方 唐仕军 麦麦提依明·托合提 《医学分子生物学杂志》 CAS 2024年第4期341-346,共6页
目的探讨大鼠神经生长因子(rat nerve growth factor,RtNGF)联合骨髓间充质干细胞-源外泌体(BMSCs exosomes)缓解脑出血(intracerebral haemorrhage,ICH)大鼠神经损伤的疗效及其作用机制。方法制备BMSCs exosomes。60只大鼠随机分为假手... 目的探讨大鼠神经生长因子(rat nerve growth factor,RtNGF)联合骨髓间充质干细胞-源外泌体(BMSCs exosomes)缓解脑出血(intracerebral haemorrhage,ICH)大鼠神经损伤的疗效及其作用机制。方法制备BMSCs exosomes。60只大鼠随机分为假手术(Sham)组,ICH组,ICH+RtNGF组,ICH+BMSCs exosomes组,ICH+RtNGF+BMSCs exosomes组,每组12只。建立ICH大鼠模型,并给予RtNGF或BMSCs exosomes单独治疗或联合治疗。制备各分组大鼠脑组织石蜡组织切片,并对其进行HE染色。qPCR法测定各分组大鼠脑组织中Keap1/NQO1/Nrf2信号通路蛋白质因子mRNA的相对表达水平。免疫组化(IHC)法测定各分组大鼠脑组织中Keap1/NQO1/Nrf2信号通路蛋白质因子的表达水平。结果与Sham组相比,ICH组大鼠脑组织中存在多处明显的组织腔隙和血凝块。ICH+RtNGF组、ICH+BMSCs exosomes组和ICH+RtNGF+BMSCs exosomes组均有所改善,且ICH+RtNGF+BMSCs exosomes组缓解神经损伤效果最好。与Sham组相比,ICH组大鼠脑组织中Keap1,NQO1和Nrf2 mRNA表达水平升高(P<0.05);上述3种蛋白质IHC相对染色评分升高(P<0.05)。与ICH组相比,ICH+RtNGF组、ICH+BMSCs exosomes组和ICH+RtNGF+BMSCs exosomes组上述检测指标水平降低(P<0.05),且与ICH+RtNGF组或ICH+BMSCs exosomes组相比,ICH+RtNGF+BMSCs exosomes组上述检测指标水平更低(P<0.05)。结论RtNGF联合BMSCs exosomes治疗ICH大鼠,可通过Keap1/NQO1/Nrf2信号通路降低氧化应激缓解神经损伤。 展开更多
关键词 脑出血 大鼠神经生长因子 BMSCs-源外泌体 keap1/NQO1/nrf2信号通路 神经损伤
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基于Keap1/Nrf2/HO-1通路汉黄芩素7-O-β-D-乙基葡萄糖醛酸苷体外抗氧化应激作用研究 被引量:3
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作者 黎浩 胡蕴然 +2 位作者 杨慧 柳航 葛卫红 《药物评价研究》 CAS 2023年第4期772-780,共9页
目的探讨汉黄芩素7-O-β-D-乙基葡萄糖醛酸苷(WODE)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞(RAW264.7)的抗氧化应激作用及机制。方法MTS法检测WODE(2.5、5.0、10.0、20.0、40.0、80.0、160.0μmol·L^(−1))对RAW264.7细胞活力的影响;体外... 目的探讨汉黄芩素7-O-β-D-乙基葡萄糖醛酸苷(WODE)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞(RAW264.7)的抗氧化应激作用及机制。方法MTS法检测WODE(2.5、5.0、10.0、20.0、40.0、80.0、160.0μmol·L^(−1))对RAW264.7细胞活力的影响;体外培养RAW264.7细胞,WODE(10、20、40μmol·L^(−1))或地塞米松(1μmol·L^(−1),阳性药)预处理1 h,再给予LPS刺激24 h(造模过程不再加药),对照组不加LPS和受试物,模型组只给予LPS刺激;荧光探针检测胞内活性氧(ROS)水平;Griess反应测定细胞上清液中NO生成量;ELISA检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的分泌;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测细胞内诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、环氧化酶-2(COX-2)、白细胞介素-1β(IL-1β)、醌氧化还原酶1(NQO-1)、超氧化物歧化酶-1(SOD-1)的mRNA表达水平;Western blotting法检测细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达水平;免疫荧光染色法检测细胞内Kelch ECH相关蛋白1(Keap1)表达水平。结果与对照组比较,WODE浓度小于40μmol·L^(−1)时,细胞存活率没有明显变化;浓度大于80μmol·L^(−1)时,细胞存活率下降,但未见统计学差异。与模型组比较,WODE 10、20、40μmol·L^(−1)组ROS水平显著降低(P<0.01);20、40μmol·L^(−1)组NO释放显著降低(P<0.05、0.01);40μmol·L^(−1)组iNOS mRNA表达水平显著降低(P<0.01);10、20、40μmol·L^(−1)组COX-2和20、40μmol·L^(−1)组IL-1βmRNA表达水平显著降低(P<0.05、0.01);10、20、40μmol·L^(−1)组TNF-α和IL-6的释放受到显著抑制(P<0.01);10、20、40μmol·L^(−1)组NQO-1 mRNA表达水平显著升高(P<0.01),40μmol·L^(−1)组SOD-1 mRNA表达水平显著升高(P<0.01);10、20、40μmol·L^(−1)组Keap1蛋白表达水平显著降低(P<0.01);10、20、40μmol·L^(−1)组HO-1蛋白和mRNA表达水平显著提高(P<0.05、0.01);20、40μmol·L^(−1)组Nrf2蛋白和40μmol·L^(−1)组Nrf2 mRNA表达水平显著增加(P<0.01)。结论WODE对LPS诱导的RAW264.7细胞的氧化应激具有抑制作用,其作用机制可能与调控Keap1/Nrf2/HO-1信号通路相关。 展开更多
关键词 汉黄芩素7-O-β-D-乙基葡萄糖醛酸苷 抗氧化应激 RAW264.7细胞 keap1/nrf2/ho-1信号通路 活性氧
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乌头赤石脂丸方对急性心肌梗死后心肌肥厚模型大鼠心肌组织氧化应激及Keap1/Nrf2/HO-1/NQO-1通路的影响 被引量:2
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作者 王鑫赫 史晓梅 +4 位作者 肖钰雪 王松 谢璐璐 郭军鹏 刘宏岩 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2023年第10期1036-1043,共8页
目的 探讨乌头赤石脂丸方治疗急性心肌梗死后心肌肥厚的可能作用机制。方法 将40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、培哚普利叔丁胺组和乌头赤石脂丸组,每组10只。除正常组外,其余3组通过结扎左冠状动脉前降支制备急性心肌梗死,术后各组... 目的 探讨乌头赤石脂丸方治疗急性心肌梗死后心肌肥厚的可能作用机制。方法 将40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、培哚普利叔丁胺组和乌头赤石脂丸组,每组10只。除正常组外,其余3组通过结扎左冠状动脉前降支制备急性心肌梗死,术后各组大鼠正常饲养28天后建立心肌梗死后心肌肥厚模型。造模成功后培哚普利叔丁胺组给予培哚普利叔丁胺片0.4 mg/(kg·d)灌胃,乌头赤石脂丸组给予乌头赤石脂丸药液4.9 g/(kg·d)灌胃,正常组和模型组给予6.67 ml/(kg·d)生理盐水灌胃,均干预28天。观察各组大鼠心肌肥厚指数(包括心脏质量指数和左心室质量指数);HE染色、Masson染色法观察心肌细胞病理学变化;检测血清中心房钠尿肽(ANP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(ALD)和羟脯氨酸(HYP)含量,心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)水平,检测心肌组织中Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1 (Keap1)、核因子E2相关因子2 (Nrf2)、血红素氧合酶-1 (HO-1)、醌氧化还原酶-1(NQO-1)、B细胞淋巴瘤-2 (Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠心脏质量指数和左心室质量指数显著升高(P<0.01),病理结果显示心肌细胞横截面积变大,心肌纤维紊乱,心肌组织周围胶原纤维断裂、紊乱;血清ANP、AngⅡ、ALD、HYP含量均显著升高,心肌组织中MDA、ROS水平及Keap1、Bax蛋白表达升高,SOD活性及Nrf2、HO-1、NQO-1、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,乌头赤石脂丸组和培哚普利叔丁胺组大鼠心脏质量指数和左心室质量指数降低(P<0.01),心肌病理损伤改善,心肌细胞横截面积明显减小,血清中AngⅡ、ALD、ANP、HYP含量及心肌组织MDA、ROS水平及Keap1、Bax蛋白表达显著降低,SOD活性及Nrf2、HO-1、NQO-1、Bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。乌头赤石脂丸组在降低心脏质量指数和左心室质量指数、心肌细胞横截面积、ROS水平方面优于培哚普利叔丁胺组(P<0.05)。结论 乌头赤石脂丸方能够减轻急性心肌梗死后心室肥厚模型大鼠心肌组织氧化应激损伤和心肌细胞凋亡,降低心肌纤维化程度,从而抑制心肌肥厚的程度,其作用机制可能与激活Keap1/Nrf2/HO-1/NQO-1信号通路有关。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 心肌肥厚 乌头赤石脂丸 氧化应激 细胞凋亡 keap1/nrf2/ho-1/NQO-1信号通路
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