慢性异体肾移植病人肾纤维化组织中MMP-2、TIMP-1、Vimentin、Keratin免疫组化定量分析

目的:探讨慢性异体肾移植病人肾纤维化组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、金属蛋白酶抑制物(TIMP-1)、波形蛋白(Vimentin)和角蛋白(Keratin)的表达与肾纤维化间的关系。方法:收集我院18例肾移植后不同程度肾纤维化病人及10例正常肾组织,进行MMP-2、TIMP-1、Vimentin及Keratin的免疫组化定量检测分析。结果:肾纤维化早期,与正常肾组织对比,抗MMP-2和Keratin呈显较强免疫阳性反应,且量增加;随肾纤维化程度增加,抗MMP-2和Keratin免疫染色阳性反应减弱,量减少,甚至出现阴性;抗TIMP-1和Vimentin免疫染色阳性增强,并随着纤维化进展而量增加。结论:由肾纤维化组织局部Vimentin阳性与相关细胞产生并分泌的细胞因子以诱导MMP-2、TIMP-1的活性改变在慢性肾移植肾病患者的肾纤维化过程中具有关键性作用。

AP-1对羊毛KRTs的调控研究

滩羊是我国优良的地方绵羊品种,其裘皮形成的机理极为复杂,且是出生后35 d左右特有的性状。综述转录因子AP-1的组成、功能结构、作用机理和结合特点,以及角蛋白的分类及表达特点,并对AP-1对羊毛KRTs基因特异性启动子的结合位点进行预测,为转录因子对羊毛角蛋白基因的调控研究提供有效的参考。

血清癌胚抗原、胃泌素释放肽前体、细胞角质蛋白19片段抗原21-1及鳞状细胞癌抗原对早期肺癌的诊断价值

目的探讨血清癌胚抗原(CEA)、胃泌素释放肽前体(Pro-GRP)、细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)对早期肺癌的诊断价值。方法选取117例早期肺癌患者和93例肺部良性疾病患者,分别作为观察组和对照组。检测并比较两组患者的血清CEA、Pro-GRP、CYFRA21-1、SCC-Ag水平,采用Logistic回归模型分析早期肺癌发生的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估血清CEA、Pro-GRP、CYFRA21-1、SCC-Ag对早期肺癌的诊断价值。结果观察组患者的血清CEA、Pro-GRP、CYFRA21-1、SCC-Ag水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,CEA、Pro-GRP、CYFRA21-1、SCC-Ag阳性表达均是早期肺癌发生的独立危险因素(P﹤0.05)。ROC曲线显示,血清CEA、Pro-GRP、CYFRA21-1、SCC-Ag诊断早期肺癌的AUC分别为0.800、0.664、0.763、0.799。结论早期肺癌患者血清CEA、Pro-GRP、CYFRA21-1、SCC-Ag水平均升高,且上述指标对早期肺癌均具有一定的诊断价值。

血清CYFRA21-1、CA125、CA153、CEA对乳腺癌的诊断及预测术后复发的价值

目的 探讨血清C角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原153(CA153)、癌胚抗原(CEA)对乳腺癌的诊断及预测术后复发的价值。方法 选取2019年9月至2020年8月在平顶山市第一人民医院诊治的97例乳腺癌患者作为研究组,随访3 a,按照术后有无复发分为复发组19例和未复发组78例,并选取同期健康体检者50例作为对照组,比较研究组与对照组、复发组与未复发组血清CYFRA21-1、CA125、CA153、CEA水平,并分析血清CYFRA21-1、CA125、CA153、CEA对乳腺癌的诊断价值,以及对乳腺癌术后复发的预测价值。结果 研究组血清CYFRA21-1、CA125、CA153、CEA水平高于对照组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清CYFRA21-1、CA125、CA153、CEA、四者联合诊断乳腺癌的AUC分别为0.784、0.722、0.754、0.821、0.888,在最佳临界值对应的敏感度、特异度CA125为59.8%、100.0%,CA153为55.7%、100.0%,CEA为58.8%、100.0%,四者联合为70.4%、100.0%。复发组血清CYFRA21-1、CA125、CA153、CEA水平高于未复发组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清CYFRA21-1、CA125、CA153、CEA预测乳腺癌术后复发的AUC分别0.843、0.862、0.825、0.731、0.914,在最佳临界值对应的敏感度、特异度CA125为68.4%、100%,CA153为73.7%、74.4%,CEA为57.9%、88.5%,四者联合为78.9%、96.2%。结论 血清CYFRA21-1、CA125、CA153、CEA四者联合对乳腺癌诊断和预测术后复发均具有较高的价值。

胸苷激酶1、细胞角质蛋白19片段抗原21-1在非小细胞肺癌中的表达及与患者临床特征和预后的关系

目的探讨胸苷激酶1(TK1)、细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及与患者临床特征和预后的关系。方法选取100例NSCLC患者,采用免疫组化法检测肿瘤组织及癌旁组织中TK1、CYFRA21-1表达情况,比较NSCLC患者肿瘤组织与癌旁组织中TK1、CYFRA21-1的表达情况,以及不同临床特征NSCLC患者肿瘤组织中TK1、CYFRA21-1的表达情况。根据预后情况将NSCLC患者分为预后不良组和预后良好组,采用Logistic回归分析NSCLC患者的预后影响因素。结果肿瘤组织中TK1、CYFRA21-1的阳性表达率均明显高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。不同淋巴结转移情况NSCLC患者肿瘤组织中TK1、CYFRA21-1阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。预后良好组(n=71)和预后不良组(n=29)患者淋巴结转移情况及TK1、CYFRA21-1表达情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,有淋巴结转移及TK1、CYFRA21-1阳性表达均是NSCLC患者预后不良的独立危险因素(P﹤0.05)。结论TK1、CYFRA21-1在NSCLC中的阳性表达率较高,有淋巴结转移及TK1、CYFRA21-1阳性表达均是NSCLC患者预后不良的危险因素。

血清CYFRA21-1、NSE、VEGF水平联合检测对肺癌患者淋巴结转移的诊断价值

目的:探讨血清细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、血管内皮生长因子(VEGF)水平联合检测对肺癌患者淋巴结转移的诊断价值。方法:回顾性分析2020年1月至2022年12月该院收治的150例肺癌患者的临床资料。根据是否发生淋巴结转移将其分为转移组(n=52)与未转移组(n=98)。比较两组患者的病理分型、临床分期和血清CYFRA21-1、NSE、VEGF水平,以及不同临床分期患者的血清CYFRA21-1、NSE、VEGF水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CYFRA21-1、NSE、VEGF水平单项及联合检测对肺癌淋巴结转移的诊断价值。结果:转移组小细胞肺癌占比、临床分期及血清CYFRA21-1、NSE、VEGF水平均高于未转移组,且患者临床分期越高,血清CYFRA21-1、NSE、VEGF水平越高,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,血清CYFRA21-1、NSE、VEGF水平单项及联合检测诊断肺癌淋巴结转移的曲线下面积分别为0.873、0.828、0.701、0.954,联合检测诊断价值高于单一指标检测。结论:血清CYFRA21-1、NSE、VEGF水平检测对肺癌淋巴结转移具有较高的诊断价值,且联合检测的诊断价值高于单项指标检测。

血小板血小板/淋巴细胞比值淋巴细胞比值、预后营养指数预后营养指数、细胞角质蛋白细胞角质蛋白19片段抗原2121-1与胸腺瘤患者临床特征及预后的关系

目的目的探讨血小板/淋巴细胞比值(PLR)、预后营养指数(PNI)、细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYR-FA21-1)与胸腺瘤患者临床特征及预后的关系。方法方法选取125例胸腺瘤患者作为观察组,另选取116例健康体检者作为对照组,比较两组受试者及不同临床特征胸腺瘤患者PLR、PNI、CYFRA21-1。对胸腺瘤患者随访1年,根据预后情况分为预后良好组和预后不良组,比较不同预后胸腺瘤患者的临床特征,并采用多元Logistic回归模型分析胸腺瘤患者预后的影响因素。结果结果观察组患者PLR、PNI及CYFRA21-1均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。不同组织学类型、Masaoka分期、肿瘤直径胸腺瘤患者PLR、CYFRA21-1比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01);不同组织学类型、Masaoka分期胸腺瘤患者PNI比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。预后良好组(n=98)和预后不良组(n=27)患者组织学类型、Masaoka分期、PLR、PNI、CYFRA21-1比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,组织学类型、Masaoka分期、PLR、PNI、CYFRA21-1均是胸腺瘤患者预后的影响因素(P﹤0.05)。结论结论PLR、PNI、CYFRA21-1在胸腺瘤中高表达,与患者的临床特征有关,是胸腺瘤患者预后的影响因素。

拟青霉菌株Z-1降解羽毛角蛋白特性的研究

从某养殖场污水处理系统中分离到一株能够降解羽毛角蛋白的真菌,经鉴定,暂定为拟青霉属(Paeciliomyces)菌株Z-1.菌株Z-1是一种好氧菌,供氧充足有利于它将羽毛角蛋白转化为可溶性蛋白.在分批培养中,最适初始pH值为9,最适温度30℃,钙离子和镁离子对其酶活性有促进作用.在菌株Z-1的酶解作用下,6d后羽毛角蛋白分解率高达91.4%.

抗角蛋白自身抗体对白细胞介素1β诱发角朊细胞增殖的影响

目的：研究抗角蛋白自身抗体（ＡＫａｕｔｏＡｂ）对白细胞介素１β（ＩＬ－１β）诱发角朊细胞增殖的影响．方法：采用角朊细胞无血清培养方法，以３Ｈ－ＴｄＲ标示角朊细胞增殖程度，检测ＩＬ－１β刺激角朊细胞及ＡＫａｕ－ｔｏＡｂ处理角朊细胞的增殖代谢．结果：１６００Ｕ／ｍｌ及以上浓度ＩＬ－１β对角朊细胞增殖有明显促进作用（Ｐ＜０．０１），正常血清浓度ＡＫａｕｔｏＡｂ对ＩＬ－１β引起的角朊细胞增殖有抑制作用（Ｐ＜０．０１）．结论：ＡＫａｕｔｏＡｂ抑制ＩＬ－１β引起的角朊细胞增殖，提示皮肤炎症反应中，角朊细胞内沉积的ＡＫａｕｔｏＡｂ对角朊细胞的过度增殖有调节作用．

不同品种绵羊皮肤毛囊中角蛋白关联蛋白8-1基因差异表达研究

试验旨在研究不同品种绵羊皮肤毛囊中角蛋白关联蛋白8-1(keratin associated protein 8-1,KAP8-1)基因相对表达量,从而明确KAP8-1基因对绵羊皮肤毛囊发育的调控作用。采用Real-time PCR SYBR GreenⅠ染料法,测定KAP8-1基因荧光定量Ct值,所得结果采用2-△△Ct法计算相对表达量。结果表明,南非肉用美利奴羊(♂)×东北细毛羊(♀)组、南非肉用美利奴羊(♂)×小尾寒羊(♀)组、杜泊羊(♂)×小尾寒羊(♀)组3个品种羊皮肤毛囊内KAP8-1基因均有表达,且三者相对表达量的比值为7.56∶2.19∶1。说明KAP8-1基因对皮肤毛囊发育、羊毛品质差异均具有一定的调控作用,且品种之间存在一定的差异。

拔毛·剃毛对绵羊皮肤中GHR·IGF-1·IGF-1R·KAP3.2和KAP6-1基因表达的影响

选取36只新疆细毛羊随机分成6组进行拔毛、剃毛处理,于第0、3、6、9、12、50天采集皮肤样品,用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法,定量分析绵羊皮肤中生长激素受体(GHR)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)和胰岛素样生长因子1型受体(IGF-1R)、角蛋白关联蛋白KAP3.2和KAP6-1mRNA的相对丰度。实验结果显示,与对照组相比,剃毛可显著提高IGF-1的表达量,但对GHR、IGF-1R、KAP3.2和KAP6-1的表达量均无明显的影响;而拔毛对皮肤中GHRI、GF-1I、GF-1R、KAP3.2和KAP6-1基因表达均无明显影响。

慢病毒介导小鼠K26/KAP26.1基因过表达对相关基因的调控作用

【目的】利用慢病毒介导过表达技术,明确小鼠K26和KAP26.1基因过表达后对角蛋白关联蛋白基因KAP6.2、KAP7.1、KAP8.2、KAP11.1和对骨形态发生蛋白基因BMP-4、BMPR-IB的影响,探究小鼠绒毛细度变化的影响机制,达到人为调控(如慢病毒载体技术)使相关基因过表达,改善动物绒毛品质的目的,为哺乳动物绒毛细度调控的研究奠定理论基础,【方法】试验在辽宁省生物技术与分子药物研发重点实验室完成,小白鼠采自大连医科大学实验动物中心,选取出生后5周龄昆明种雄鼠。在Genebank查找到小鼠基因K26(Gene ID:NM_001033397)及KAP26.1(Gene ID:NM_027105.2)序列,根据目的基因序列设计引物,将质粒转入生长状态良好的293T细胞,构建小鼠K26和KAP26.1基因慢病毒过表达载体,将含有目的基因K26及KAP26.1的慢病毒表达载体分别转染小鼠皮肤成纤维细胞,用荧光显微镜观察其转染情况,确定慢病毒表达载体转染成功后,从病毒感染后的细胞中抽提总RNA,将RNA反转录成c DNA后放入Eppendorf Realplex荧光定量PCR仪,检测K26和KAP26.1基因过表达对KAP6.2、KAP7.1、KAP8.2、KAP11.1、BMP-4和BMPR-IB基因表达的影响。【结果】经RT-PCR检测,证明小鼠慢病毒载体p Lenti6.3-K26-IRES-EGFP和p Lenti6.3-K26.1-IRES-EGFP构建成功。经荧光场对比,发现目的慢病毒载体转染293T细胞72h时转染率最高。经PCR检测,证实包装好的目的慢病毒K26及KAP26.1转染小鼠成纤维细胞72 h后转染成功。经RT-PCR检测与SPSS Statistics 19软件分析目的基因表达量与阳性对照组(空载体质粒组,BLACK)、阴性对照组(小鼠表皮成纤维细胞,NC)表达量之间的显著性差异,发现K26基因过表达会导致KAP26.1基因上调,反之亦然,说明K26和KAP26.1基因之间存在一定的协同作用;K26和KAP26.1基因过表达后,均能导致KAP6.2、KAP7.1、KAP8.2、KAP11.1基因下调;K26基因过表达能使BMP-4基因表现为上调,而BMPR-IB基因表现为下调;KAP26.1基因过表达时,BMP-4和BMPR-IB基因均表现为上调。【结论】K26与KAP26.1基因在毛囊的内根鞘中起到协同作用,K26和KAP26.1基因的高表达会抑制KAP6.2、KAP7.1、KAP8.2、KAP11.1基因的表达,影响m TOR下游蛋白合成信号,进而起到调节绒毛粗细的作用;K26和KAP26.1基因过表达均能使BMP-4基因表现为上调,BMP-4是BMP信号通路的激活剂,能够激活BMP信号通路向下游转导,进而影响到毛囊的发育周期;K26基因过表达下调BMPR-IB基因的表达,而KAP26.1基因过表达上调BMPR-IB基因的表达,BMPR-IB基因是BMP信号的Ⅰ型受体,当BMPR-IB受体减少时,会抑制BMP信号向下游转导,从而使绒毛生长周期重新开始;当BMPR-IB受体增加时,会促进下游信号分子转录,进而影响毛囊发育周期。说明K26和KAP26.1基因过表达均能激活BMP信号通路,并由BMP和m TOR信号调节KAP6.2、KAP7.1、KAP8.2、KAP11.1、BMP-4和BMPR-IB基因的表达,但K26与KAP26.1基因对BMPR-IB基因的相反调节作用有待深入研究。

血清胸苷激酶1、细胞角质蛋白19片段抗原21-1及dickkopfWNT信号通路抑制剂1对食管癌的诊断价值

目的探讨血清胸苷激酶1(TK1)、细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)及dickkopf WNT信号通路抑制剂1(DKK1)对食管癌的诊断价值。方法选取62例食管癌患者作为食管癌组,59例健康体检者作为对照组。对比两组受试者TK1、CYFRA21-1、DKK1水平,对比不同分期食管癌患者TK1、CYFRA21-1、DKK1水平,分析TK1、CYFRA21-1、DKK1单独及联合检测对食管癌的诊断价值。结果食管癌组患者TK1、CYFRA21-1、DKK1水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。Ⅲ~Ⅳ期食管癌患者TK1、CYFRA21-1、DKK1水平均明显高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。TK1+CYFRA21-1+DKK1联合检测诊断食管癌的灵敏度和特异度分别为88.50%、79.10%,曲线下面积为0.779(95%CI:0.695~0.864),均高于三者单独检测。结论TK1、CYFRA21-1、DKK1联合检测有利于提高食管癌的诊断效能,防止误诊漏诊,三者对其病情评估具有一定参考价值。

血清CEA、CYFRA21-1表达与晚期NSCLC患者化疗效果的关系及疗效影响因素分析

目的探讨晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者化疗前后血清癌胚抗原(CEA)、细胞角质蛋白19片段(CYFRA21-1)的水平及其与化疗效果的关系,并对化疗效果的影响因素进行分析。方法回顾性分析120例接受化疗的晚期NSCLC患者的病历资料,观察分析NSCLC患者的化疗效果,检测化疗前后NSCLC患者的血清CEA、CYFRA21-1水平,并对NSCLC患者化疗效果的影响因素进行分析。结果 120例NSCLC患者中,化效有效者68例(化疗有效组);化疗无效者52例(化疗无效组)。化疗前和化疗后,化疗有效组患者的血清CEA、CYFRA21-1水平均低于化疗无效组患者(P﹤0.05)。单因素分析结果显示:化疗有效组TNM分期为Ⅳ期的NSCLC患者所占比例明显低于化疗无效组(P﹤0.01),化疗有效组CEA≤5.0 ng/ml、CYFRA21-1≤5.0 ng/ml的NSCLC患者所占比例均高于化疗无效组(P﹤0.05);多因素分析结果显示,TNM分期为Ⅳ期、CEA﹥5.0 ng/ml、CYFRA21-1﹥5.0 ng/ml为晚期NSCLC患者化疗效果的独立危险因素(P﹤0.05)。结论化疗前,血清CEA、CY-FRA21-1高水平是NSCLC患者化疗效果的独立危险因素,在化疗前进行血清CEA、CYFRA21-1水平检测对预测和评估化疗效果具有重要意义。

卡瑞利珠单抗联合化疗对老年非小细胞肺癌患者血清细胞角蛋白19片段抗原21-1、基质金属蛋白酶9表达及肿瘤生长转移的影响

目的观察卡瑞利珠单抗联合化疗对老年非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清细胞角蛋白19片段抗原21-1(CY211)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达及肿瘤生长转移的影响。方法选取2017年1月至2019年10月在本院就诊的老年NSCLC患者120例,随机分为观察组和对照组各60例,对照组给予化疗方案治疗,观察组给予卡瑞利珠单抗联合化疗方案治疗,3个周期后进行疗效评价,并比较两组患者治疗前后血清CY211、MMP-9表达及肿瘤生长转移的变化情况。结果治疗后,观察组总有效率显著高于对照组(P <0.05);两组患者血清CY211、MMP-9、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平均较治疗前降低,观察组低于对照组(P <0.05);两组卡氏生存质量(KPS)评分均较治疗前提高,观察组高于对照组(P <0.05)。结论卡瑞利珠单抗联合化疗对老年NSCLC患者疗效显著,可显著降低患者血清CY211、MMP-9、VEGF水平,减少新生血管生成及抑制肿瘤生长转移,提高患者生存质量。

正常及突变角蛋白K1部分螺旋亚区分子模拟及其比较

目的研究先天性大疱性鱼鳞病样红皮病(BCIE)患者存在角蛋白K1E477K突变的可能致病途径。方法对K1E477K突变所在的K12B尾区进行分子模拟,观察角蛋白中氨基酸之间的相互作用,以及突变所造成的影响。结果突变后的赖氨酸与对应链上的精氨酸理论距离增大。结论突变使分子间相互作用减弱,影响了角蛋白K1/K10异源二聚体的稳定性,这可能是导致角蛋白细丝网络破坏的部分原因。

人角蛋白K1cDNA基因克隆及其定点突变

目的既往的研究曾发现一先天性大疱性鱼鳞病样红皮病BCIE患者存在K1E477K突变现进一步探讨该突变的致病意义。方法首先克隆出正常人K1cDNA全长编码序列,并以此pK1cDNA重组质粒为模板,采用PCR介导的重叠延伸诱变法对K1第477位密码子GAG→AAG进行定点突变。结果克隆的正常人K1cDNA经测序证实长2022bp,与美国国立生物技术信息中心(NCBI)上所公布序列一致定点突变准确未改变其他序列。结论通过该研究得到了正常人角蛋白K1的基因克隆pK1cDNA及其突变体pMK1cDNA,为以后研究致病基因功能奠定了基础。

紫杉醇联合顺铂对晚期NSCLC患者的疗效及血清CEA、CA125、Cyfra21-1及NSE水平的影响

目的探讨紫杉醇联合顺铂对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者的疗效及血清癌坯抗原(CEA)、糖抗原125(CA125)、细胞角质素片段抗原21-1(Cyfra21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平的影响。方法选取2012年1月至2016年1月确诊的晚期NSCLC患者120例,根据化疗方案分为A组60例(紫杉醇联合顺铂)、B组60例(吉西他滨联合顺铂),比较2组的化疗效果。结果 A组的总缓解率为45. 00%、总有效率为95. 00%与B组的40. 00%、88. 33%比较,差异均无统计学意义(P> 0. 05);治疗前后,2组患者血清CEA、CA125、Cyfra21-1、NSE水平差异无统计学意义(P> 0. 05);治疗后,2组患者的血清CEA、CA125、Cyfra21-1、NSE水平较本组治疗前均显著降低(P <0. 05); A组患者的恶心呕吐、腹泻、白细胞减少、血小板降低、血红蛋白降低程度显著的低于B组(P <0. 05); 2组患者的皮疹、肝肾功能损害、脱发程度比较差异无统计学意义(P> 0. 05);随访1年,A组失访3例,生存23例(40. 35%),B组失访5例,生存20例(36. 36%),2组1年生存率比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论紫杉醇联合顺铂与吉西他滨联合顺铂治疗NSCLC的效果相当,但是不良反应发生率较低。

动态监测血清CEA、CA19-9、CA125、CA153和CYFRA21-1对肺癌患者围手术期疗效评估的临床研究

目的探讨动态监测肺癌患者围手术期血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原153(CA153)和细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)的临床意义.方法分别选择120例肺癌患者和同期120例健康体检者为肺癌组和对照组,检测肺癌组患者术前、术后1天、术后7天、术后30天和术后90天的血清CEA、CA19-9、CA125、CA153和CYFRA21-1水平,并与对照组体检时的上述各血清肿瘤标志物水平进行比较,分析CEA、CA19-9、CA125、CA153、CYFRA21-1对肺癌的诊断价值.结果与CEA、CA19-9、CA125、CA153、CYFRA21-1单独诊断肺癌比较,CEA、CA19-9、CA125、CA153及CYFRA21-1联合诊断肺癌的灵敏度和准确度均较高.术前肺癌组患者的血清CEA、CA19-9、CA125、CA153和CYFRA21-1水平均高于对照组体检时,差异均有统计学意义(P﹤0.05).术后,肺癌组患者的血清CEA、CA19-9、CA125、CA153和CYFRA21-水平均随时间延长呈下降趋势,术后90天肺癌组患者的血清CEA、CA19-9、CA125、CA153和CYFRA21-1水平均低于术后1天,差异均有统计学意义(P﹤0.05).术后对所有肺癌患者随访10个月,其中复发患者57例,未复发患者63例.术后复发患者术后7天的血清CEA、CA19-9、CA125、CA153和CYFRA21-1水平均高于术后未复发患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05).结论对肺癌患者的血清CEA、CA19-9、CA125、CA153和CYFRA21-1水平进行动态检测,不仅有助于肺癌的临床诊断,还可用于评估术后疗效,对术后治疗具有一定的指导意义.

人细胞角蛋白19片段单克隆抗体的制备和鉴定

目的制备人细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)的单克隆抗体(mAb),并对其免疫特性进行鉴定。方法用重组CYFRA21-1蛋白免疫BALB/c小鼠,取血清效价最高小鼠的脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,筛选出阳性杂交瘤细胞株,进行亚克隆,并鉴定分泌抗体亚型;制备小鼠腹水,用protein G从腹水中纯化出CYFRA21-1的mAb;用间接ELISA测定mAb的效价,Western blot和竞争ELISA对mAb的免疫特性进行检测,竞争ELISA对mAb的临床应用性进行评价。结果获得2G8和12G7两株能稳定分泌人CYFRA21-1mAb的杂交瘤细胞株,其分泌抗体都为轻链为κ的IgG1;两株mAb都能特异识别人血清中的CYFRA21-1,效价分别为1×10-6和5×10-7;检测134份血清样本CYFRA21-1含量的结果与北京源德生物医学工程有限公司CYFRA21-1化学发光法定量检测试剂盒检测结果的相关性分别为y=0.8167x+0.3755(r=0.9772)和y=0.8142x+0.3655(r=0.9770)。结论成功制备两株人CYFRA21-1的特异mAb,为后期人血清CYFRA21-1定量测定试剂盒的完全国产化奠定了良好的基础。